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FGL2基因沉默对大鼠心肌微血管内皮细胞凋亡的影响及相关分子机制的初步研究

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
目录第7-9页
中英文缩写词表第9-10页
第1章 引言第10-13页
第2章 材料与方法第13-27页
    2.1 实验材料第13-16页
        2.1.1 实验动物第13页
        2.1.2 主要试剂第13页
        2.1.3 主要仪器第13-14页
        2.1.4 主要试剂配置第14-16页
    2.2 实验方法第16-27页
        2.2.1 器材的准备第16-17页
        2.2.2 心肌微血管内皮细胞培养与鉴定第17-18页
        2.2.3 FGL2RNAi 慢病毒载体的构建第18-19页
        2.2.4 实验分组第19页
        2.2.5 慢病毒转染大鼠 MMVECs第19页
        2.2.6 细胞总RNA提取及鉴定细胞中FGL2、Bcl-2、Bax、Cox-2mRNA的表达第19-22页
        2.2.7 细胞膜蛋白的提取及蛋白浓度的测定第22-23页
        2.2.8 Western blot 检测细胞中 FGL2 蛋白的表达第23-25页
        2.2.9 MTT 检测内皮细胞增殖能力第25页
        2.2.10 流式细胞仪检测内皮细胞凋亡第25-26页
        2.2.11 统计学分析第26-27页
第3章 实验结果第27-38页
    3.1 心肌微血管内皮细胞的形态学观察第27页
    3.2 免疫荧光法鉴定细胞第27-28页
    3.3 FGL2RNAi 慢病毒载体的构建、鉴定及外源靶选第28-29页
    3.4 荧光倒置显微镜下观察慢病毒转染 MMVECs第29-30页
    3.5 Western blot 检测细胞中 FGL2 蛋白的表达第30-31页
    3.6 流式细胞仪检测细胞凋亡第31-33页
    3.7 MTT 检测内皮细胞增殖能力第33-34页
    3.8 qRT—PCR 检测FGL2RNAi慢病毒转染MMVECs96小时后FGL2、Bax、Bcl-2、Cox-2mRNA 的表达变化第34-38页
第4章 讨论第38-42页
    4.1 原代心肌微血管内皮细胞培养与鉴定第38-39页
    4.2 构建 FGL2RNAi 慢病毒载体并转染心肌微血管内皮细胞第39页
    4.3 检测 FGL2 沉默对心肌微血管内皮细胞增殖、凋亡能力的影响第39-42页
第5章 结论第42-43页
参考文献第43-46页
致谢第46-47页
攻读学位期间的研究成果第47-48页
综述第48-53页
参考文献第53-55页

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