摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
目录 | 第7-9页 |
中英文缩写词表 | 第9-10页 |
第1章 引言 | 第10-13页 |
第2章 材料与方法 | 第13-27页 |
2.1 实验材料 | 第13-16页 |
2.1.1 实验动物 | 第13页 |
2.1.2 主要试剂 | 第13页 |
2.1.3 主要仪器 | 第13-14页 |
2.1.4 主要试剂配置 | 第14-16页 |
2.2 实验方法 | 第16-27页 |
2.2.1 器材的准备 | 第16-17页 |
2.2.2 心肌微血管内皮细胞培养与鉴定 | 第17-18页 |
2.2.3 FGL2RNAi 慢病毒载体的构建 | 第18-19页 |
2.2.4 实验分组 | 第19页 |
2.2.5 慢病毒转染大鼠 MMVECs | 第19页 |
2.2.6 细胞总RNA提取及鉴定细胞中FGL2、Bcl-2、Bax、Cox-2mRNA的表达 | 第19-22页 |
2.2.7 细胞膜蛋白的提取及蛋白浓度的测定 | 第22-23页 |
2.2.8 Western blot 检测细胞中 FGL2 蛋白的表达 | 第23-25页 |
2.2.9 MTT 检测内皮细胞增殖能力 | 第25页 |
2.2.10 流式细胞仪检测内皮细胞凋亡 | 第25-26页 |
2.2.11 统计学分析 | 第26-27页 |
第3章 实验结果 | 第27-38页 |
3.1 心肌微血管内皮细胞的形态学观察 | 第27页 |
3.2 免疫荧光法鉴定细胞 | 第27-28页 |
3.3 FGL2RNAi 慢病毒载体的构建、鉴定及外源靶选 | 第28-29页 |
3.4 荧光倒置显微镜下观察慢病毒转染 MMVECs | 第29-30页 |
3.5 Western blot 检测细胞中 FGL2 蛋白的表达 | 第30-31页 |
3.6 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第31-33页 |
3.7 MTT 检测内皮细胞增殖能力 | 第33-34页 |
3.8 qRT—PCR 检测FGL2RNAi慢病毒转染MMVECs96小时后FGL2、Bax、Bcl-2、Cox-2mRNA 的表达变化 | 第34-38页 |
第4章 讨论 | 第38-42页 |
4.1 原代心肌微血管内皮细胞培养与鉴定 | 第38-39页 |
4.2 构建 FGL2RNAi 慢病毒载体并转染心肌微血管内皮细胞 | 第39页 |
4.3 检测 FGL2 沉默对心肌微血管内皮细胞增殖、凋亡能力的影响 | 第39-42页 |
第5章 结论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-46页 |
致谢 | 第46-47页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第47-48页 |
综述 | 第48-53页 |
参考文献 | 第53-55页 |