| 致谢 | 第4-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-16页 |
| 1 文献综述 | 第9-14页 |
| 1.1 HSPs基因家族的研究进展 | 第9-13页 |
| 1.1.1 HSPs基因家族的产生及分类 | 第9-10页 |
| 1.1.2 HSPs基因家族的功能多样性 | 第10-12页 |
| 1.1.3 展望 | 第12-13页 |
| 1.2 非生物逆境胁迫对植物的影响 | 第13-14页 |
| 1.2.1 干旱对植物的影响 | 第13页 |
| 1.2.2 盐胁迫对植物的影响 | 第13-14页 |
| 1.2.3 展望 | 第14页 |
| 2 引言 | 第14-15页 |
| 3 技术路线 | 第15-16页 |
| 第二章 NtDnaJ1的基因克隆与序列分析 | 第16-33页 |
| 1 材料 | 第16-19页 |
| 1.1 植物材料 | 第16页 |
| 1.2 菌株和载体 | 第16页 |
| 1.3 试剂 | 第16页 |
| 1.4 培养基和溶液的配制 | 第16-18页 |
| 1.5 引物序列 | 第18-19页 |
| 2 实验方法 | 第19-26页 |
| 2.1 植物材料培养 | 第19页 |
| 2.2 抗旱材料的筛选及兴趣基因获得 | 第19-20页 |
| 2.2.1 抗旱材料筛选 | 第19-20页 |
| 2.2.2 兴趣基因的获得 | 第20页 |
| 2.3 植物总RNA的提取 | 第20-21页 |
| 2.4 植物总RNA的纯化 | 第21页 |
| 2.5 RNA纯化后电泳和浓度检测 | 第21页 |
| 2.5.1 电泳检测RNA的完整性 | 第21页 |
| 2.5.2 RNA纯度检测 | 第21页 |
| 2.6 RNA的反转 | 第21-22页 |
| 2.7 NtDnaJ1目的基因的获得 | 第22-23页 |
| 2.8 切胶回收基因片段 | 第23页 |
| 2.9 T载体连接并转化大肠杆菌 | 第23-25页 |
| 2.9.1 基因片段连接到T载体 | 第23-24页 |
| 2.9.2 连接产物转化大肠杆菌DH10B | 第24-25页 |
| 2.10 NtDnaJ1基因测序及序列分析 | 第25页 |
| 2.10.1 基因序列分析 | 第25页 |
| 2.10.2 同源性分析 | 第25页 |
| 2.11 NtDnaJ1组织特异性表达分析 | 第25页 |
| 2.12 Real-time PCR | 第25-26页 |
| 3 结果与分析 | 第26-31页 |
| 3.1 抗旱材料筛选 | 第26-27页 |
| 3.2 NtDnaJ1目的基因的获得 | 第27-31页 |
| 3.2.1 龙江851总RNA提取与检测 | 第27-28页 |
| 3.2.2 NtDnaJ1基因全长克隆 | 第28页 |
| 3.2.3 NtDnaJ1基因片段的序列分析 | 第28-30页 |
| 3.2.4 NtDnaJ1组织特异性表达 | 第30-31页 |
| 4 结论与讨论 | 第31-33页 |
| 4.1 小结 | 第31页 |
| 4.2 讨论 | 第31-33页 |
| 第三章 拟南芥DnaJ突变体纯合系鉴定及逆境胁迫下的表型分析 | 第33-39页 |
| 1 材料 | 第33-34页 |
| 1.1 植物材料 | 第33页 |
| 1.2 试剂 | 第33页 |
| 1.4 培养基和溶液的配制 | 第33-34页 |
| 1.5 引物序列 | 第34页 |
| 2 实验方法 | 第34-36页 |
| 2.1 植物材料培养 | 第34页 |
| 2.2 组织基因组DNA粗提取 | 第34-35页 |
| 2.3 特异性引物扩增检测纯合系 | 第35页 |
| 2.4 拟南芥突变株纯合系逆境胁迫处理方法 | 第35-36页 |
| 2.4.1 干旱胁迫 | 第35-36页 |
| 2.4.2 盐胁迫 | 第36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-38页 |
| 3.1 拟南芥DnaJ突变体纯合系鉴定 | 第36页 |
| 3.2 DnaJ突变体纯合系逆境胁迫下的表型鉴定 | 第36-38页 |
| 4 小结与讨论 | 第38-39页 |
| 第四章 NtDnaJ1转基因拟南芥的获得及鉴定 | 第39-52页 |
| 1 材料 | 第39-41页 |
| 1.1 植物材料 | 第39页 |
| 1.2 菌种和载体 | 第39页 |
| 1.3 试剂 | 第39页 |
| 1.4 培养基和溶液的配制 | 第39-40页 |
| 1.5 引物序列 | 第40-41页 |
| 2 实验方法 | 第41-45页 |
| 2.1 植物培养方法 | 第41页 |
| 2.2 植物表达载体p27:NtDnaJ的构建 | 第41-43页 |
| 2.3 转化农杆菌GV3101 | 第43-44页 |
| 2.3.1 制备农杆菌感受态 | 第43页 |
| 2.3.2 连接产物转化到农杆菌 | 第43-44页 |
| 2.4 花序侵染Floral Dip法转化拟南芥 | 第44页 |
| 2.4.1 拟南芥培养 | 第44页 |
| 2.4.2 Floral Dip法转化拟南芥 | 第44页 |
| 2.5 转基因植株的鉴定 | 第44页 |
| 2.6 转基因植物的抗逆性鉴定 | 第44-45页 |
| 3 结果与分析 | 第45-50页 |
| 3.1 植物表达载体构建 | 第45-47页 |
| 3.1.1 pRNAi69: NtDnaJ1中间载体的构建 | 第45-46页 |
| 3.1.2 植物表达载体P27: NtDnaJ1的构建 | 第46-47页 |
| 3.2 转基因植株的筛选与鉴定 | 第47-49页 |
| 3.3 转基因株系抗逆性鉴定 | 第49-50页 |
| 4 小结与讨论 | 第50-52页 |
| 4.1 小结 | 第50页 |
| 4.2 讨论 | 第50-52页 |
| 第五章 结论 | 第52-54页 |
| 1 结论 | 第52页 |
| 2 展望 | 第52-54页 |
| Abstracts | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
