| 缩略语表 | 第6-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| ABSTRACT | 第9页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-17页 |
| 1 苹果茎沟病毒的研究概况 | 第10-14页 |
| 1.1 ASGV的生物学特性 | 第10-11页 |
| 1.2 ASGV的分子生物学特性 | 第11-12页 |
| 1.3 ASGV的株系与血清学 | 第12页 |
| 1.4 ASGV的检测技术 | 第12-14页 |
| 2 单克隆抗体技术及其在植物病毒研究中的应用 | 第14-16页 |
| 2.1 单克隆抗体技术 | 第14-15页 |
| 2.2 单克隆抗体在植物病毒研究中的应用 | 第15-16页 |
| 3 选题目的及意义 | 第16-17页 |
| 第二章 苹果茎沟病毒的分离与提纯 | 第17-25页 |
| 1 研究材料及方法 | 第17-22页 |
| 1.1 研究材料 | 第17页 |
| 1.2 研究所用试剂 | 第17页 |
| 1.2.1 RT-PCR主要试剂 | 第17页 |
| 1.2.2 蛋白分析主要试剂 | 第17页 |
| 1.3 研究方法 | 第17-22页 |
| 1.3.1 RT-PCR方法 | 第17-19页 |
| 1.3.2 病毒接种方法 | 第19页 |
| 1.3.3 病毒提纯方法 | 第19-20页 |
| 1.3.4 SDS-PAGE分析 | 第20页 |
| 1.3.5 Western blot分析 | 第20-21页 |
| 1.3.6 蛋白浓度测定 | 第21页 |
| 1.3.7 IC-RT-PCR | 第21-22页 |
| 2 结果与分析 | 第22-25页 |
| 2.1 ASGV的草本接种与症状表现 | 第22-23页 |
| 2.2 病毒提取效果分析 | 第23-25页 |
| 2.2.1 病毒提取液的SDS-PAGE与Western blot分析 | 第23-24页 |
| 2.2.3 提取病毒的分子生物学检测 | 第24-25页 |
| 第三章 ASGV单克隆抗体的制备与检测应用 | 第25-35页 |
| 1 研究材料 | 第25页 |
| 1.1 病毒、植物材料和抗体 | 第25页 |
| 1.2 主要试剂 | 第25页 |
| 2 研究方法 | 第25-30页 |
| 2.1 单克隆抗体制备 | 第25-29页 |
| 2.1.1 小鼠免疫 | 第25页 |
| 2.1.2 SP2/0骨髓瘤细胞的活化及瘤细胞的制备 | 第25-26页 |
| 2.1.3 饲养细胞的制备 | 第26页 |
| 2.1.4 免疫脾细胞制备 | 第26-27页 |
| 2.1.5 细胞融合 | 第27页 |
| 2.1.6 分泌抗ASGV抗体杂交瘤细胞株的筛选 | 第27-28页 |
| 2.1.7 杂交瘤细胞的克隆化与扩增 | 第28页 |
| 2.1.8 杂交瘤细胞株的保存与复苏 | 第28页 |
| 2.1.9 腹水抗体的制备 | 第28-29页 |
| 2.2 单克隆抗体的评价 | 第29页 |
| 2.2.1 ID-ELISA法检测单克隆抗体效价 | 第29页 |
| 2.2.2 单克隆抗体的灵敏度检测 | 第29页 |
| 2.3 单克隆抗体在病毒检测中的应用 | 第29-30页 |
| 3. 结果与分析 | 第30-35页 |
| 3.1 分泌抗ASGV抗体杂交瘤细胞株的筛选结果 | 第30页 |
| 3.2 单克隆抗体的Western blot分析 | 第30-31页 |
| 3.3 腹水抗体的效价检测 | 第31-32页 |
| 3.4 单克隆抗体检测原核表达产物的灵敏度 | 第32页 |
| 3.5 TAS-ELISA检测田间样品ASGV的效果分析 | 第32-35页 |
| 第四章 结论与讨论 | 第35-37页 |
| 参考文献 | 第37-43页 |
| 附录：主要试剂及溶液的配制 | 第43-47页 |
| 致谢 | 第47页 |
