| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 一、前言 | 第12-21页 |
| 1.1 热应激严重影响肉鸡的健康生长 | 第12-14页 |
| 1.1.1 热应激影响肉鸡生产性能和肉品质 | 第12-13页 |
| 1.1.2 热应激对肉鸡神经内分泌机能的影响 | 第13页 |
| 1.1.3 热应激对肉鸡免疫机能的影响 | 第13页 |
| 1.1.4 热应激对肉鸡血液生化指标的影响 | 第13-14页 |
| 1.2 蛋白质组学技术进展及在热应激调控机制研究中的应用 | 第14-18页 |
| 1.2.1 定性蛋白质组学技术 | 第14-16页 |
| 1.2.2 定量蛋白质组学技术分类 | 第16-17页 |
| 1.2.3 蛋白质组学技术在畜禽热应激调控机制研究中的应用 | 第17-18页 |
| 1.3 磷酸化蛋白组学技术及应用 | 第18-20页 |
| 1.3.1 磷酸化修饰蛋白的鉴定技术和研究进展 | 第18-19页 |
| 1.3.2 磷酸化蛋白组技术在热应激调控机制研究中的应用 | 第19-20页 |
| 1.4 本研究目的和意义 | 第20-21页 |
| 二、利用非标蛋白质组学技术研究肉鸡热应激调控机制 | 第21-45页 |
| 2.1 材料与方法 | 第21-27页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第21-22页 |
| 2.1.2 试验日粮 | 第22-23页 |
| 2.1.3 蛋白质提取 | 第23页 |
| 2.1.4 蛋白质酶切方法 | 第23-24页 |
| 2.1.5 多肽的液相色谱分离条件优化 | 第24-25页 |
| 2.1.6 质谱数据采集条件优化 | 第25页 |
| 2.1.7 质谱数据处理和检索 | 第25-26页 |
| 2.1.8 使用SWATH方法采集定量数据 | 第26页 |
| 2.1.9 蛋白定量数据的提取 | 第26页 |
| 2.1.10 MRM验证差异蛋白 | 第26-27页 |
| 2.1.11 Western Blotting验证 | 第27页 |
| 2.1.12 数据统计和GO分析 | 第27页 |
| 2.2 结果与分析 | 第27-37页 |
| 2.2.1 肝脏蛋白提取与定量结果分析 | 第27-28页 |
| 2.2.2 蛋白质酶切条件优化 | 第28-29页 |
| 2.2.3 多肽分离条件优化 | 第29-30页 |
| 2.2.4 质谱采集条件优化 | 第30-32页 |
| 2.2.5 建立SWATH定量分析鸡肝蛋白质库 | 第32页 |
| 2.2.6 统计分析定量SWATH采集数据的重现性 | 第32-34页 |
| 2.2.7 统计分析发现热应激下鸡肝差异蛋白 | 第34页 |
| 2.2.8 GO分析热应激下鸡肝差异蛋白的功能 | 第34-35页 |
| 2.2.9 KEGG分析热应激下鸡肝差异蛋白的功能 | 第35-36页 |
| 2.2.10 MRM验证差异蛋白质的表达水平 | 第36页 |
| 2.2.11 Western Blot验证差异蛋白质的表达水平 | 第36-37页 |
| 2.3 讨论 | 第37-43页 |
| 2.3.1 肉鸡热应激肝蛋白质组数据的重复性和可靠性分析 | 第37-38页 |
| 2.3.2 肉鸡肝脏差异表达蛋白质的生物学功能鉴定 | 第38-39页 |
| 2.3.3 热应激通过抑制的ERK1/2信号路径调节细胞存活 | 第39-40页 |
| 2.3.4 热应激影响肉鸡肝脏脂类代谢和氨基酸代谢 | 第40-42页 |
| 2.3.5 热应激诱导肝细胞炎症反应和免疫应答 | 第42-43页 |
| 2.4 小结 | 第43-45页 |
| 三、磷酸化蛋白组技术研究肉鸡热应激前期信号调控机制 | 第45-57页 |
| 3.1 材料与方法 | 第45-49页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第45-46页 |
| 3.1.2 试验日粮 | 第46页 |
| 3.1.3 蛋白质提取 | 第46页 |
| 3.1.4 蛋白质酶切方法 | 第46-47页 |
| 3.1.5 多肽iTRAQ标记和分级 | 第47页 |
| 3.1.6 磷酸化肽段的富集 | 第47-48页 |
| 3.1.7 iTRAQ蛋白质组定量分析 | 第48页 |
| 3.1.8 磷酸化肽段和蛋白的鉴定 | 第48-49页 |
| 3.1.9 磷酸化蛋白功能注释和分析 | 第49页 |
| 3.2 结果 | 第49-54页 |
| 3.2.1 MAPK信号通路中关键基因表达分析 | 第49-50页 |
| 3.2.2 比较不同酸对磷酸化富集效果 | 第50-51页 |
| 3.2.3 磷酸化蛋白质组学实验解析磷酸化修饰在热应激调控作用机制 | 第51-52页 |
| 3.2.4 总蛋白水平比较热应激24小时后鸡肝蛋白的变化 | 第52-53页 |
| 3.2.5 比较分析热应激下磷酸化修饰蛋白 | 第53-54页 |
| 3.3 讨论 | 第54-57页 |
| 四、全文结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 博士后期间发表的文章和主持项目 | 第68-69页 |
| 个人简历 | 第69-70页 |
