| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-26页 |
| ·糖蛋白中糖链的生物学功能 | 第10-12页 |
| ·糖链参与细胞识别和分子识别 | 第10-11页 |
| ·糖链在细胞粘附中的作用 | 第11页 |
| ·糖链在糖蛋白新生肽链折叠和缔合中的作用 | 第11页 |
| ·糖链影响糖蛋白的分泌和稳定 | 第11页 |
| ·抑制蛋白酶对糖蛋白的水解和免疫屏蔽作用 | 第11-12页 |
| ·糖链与ABO血型系统的关系 | 第12页 |
| ·O-糖链的生物学意义 | 第12页 |
| ·糖蛋白上糖链的结构研究 | 第12-24页 |
| ·糖肽键的结构类型 | 第12页 |
| ·糖蛋白的分离纯化 | 第12-16页 |
| ·根据分子大小不同的纯化方法 | 第12-13页 |
| ·透析法(dialysis) | 第12-13页 |
| ·超过滤或超滤(ultrafiltration) | 第13页 |
| ·凝胶过滤(分子排阻层析molecular-exclusion) | 第13页 |
| ·利用溶解度差别的纯化方法 | 第13-14页 |
| ·等电点沉淀和pH控制 | 第13-14页 |
| ·蛋白质的盐溶和盐析 | 第14页 |
| ·有机溶剂分级分离法 | 第14页 |
| ·根据电荷不同的纯化方法 | 第14-16页 |
| ·电泳(electrophoresis) | 第14页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyarylamide gel electrophoresis,PAGE) | 第14-15页 |
| ·毛细管电泳(capillary electrophoresis) | 第15页 |
| ·等电聚焦(isoelectric focusing) | 第15页 |
| ·层析聚焦(chromatofocusing) | 第15页 |
| ·离子交换层析(ion exchange chromatography) | 第15页 |
| ·高效液相层析(high performance chromatography,HPLC) | 第15-16页 |
| ·糖链的解离 | 第16-17页 |
| ·酶解法 | 第16页 |
| ·化学裂解法 | 第16-17页 |
| ·肼解法 | 第16页 |
| ·β-消除法 | 第16-17页 |
| ·糖链的分离与纯化 | 第17页 |
| ·糖链的分析方法 | 第17-24页 |
| ·色谱法 | 第17-20页 |
| ·气相色谱(GC) | 第17-18页 |
| ·高效液相色谱(HPLC) | 第18-20页 |
| ·糖类物质衍生化与HPLC分析 | 第18-20页 |
| ·质谱在糖类物质分析中的应用 | 第20-23页 |
| ·寡糖的电喷雾离子化质谱分析 | 第21-22页 |
| ·基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laserdesorption ionization masss pectrometry,MALDI-TOF-MS) | 第22-23页 |
| ·毛细管电泳(CE)技术对糖类物质的分析 | 第23页 |
| ·核磁共振 | 第23-24页 |
| ·光谱法 | 第24页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第24-26页 |
| 第二章 PMP与几种常见衍生化方法的比较与非还原性解离条件的建立 | 第26-40页 |
| ·引言 | 第26页 |
| ·实验部分 | 第26-38页 |
| ·实验仪器与试剂 | 第26-27页 |
| ·实验仪器 | 第26-27页 |
| ·实验试剂 | 第27页 |
| ·质谱条件 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-31页 |
| ·AEC、ABEE、2-AP、2-AB、PMP5种衍生化方法的比较 | 第27-29页 |
| ·非还原性解离反应条件的确立 | 第29-31页 |
| ·反应温度的确定 | 第29页 |
| ·反应时间的确定 | 第29页 |
| ·PMP衍生化前后对糖类物质质谱信号的影响 | 第29-30页 |
| ·PMP衍生化与否对糖类物质降解反应的影响 | 第30页 |
| ·非还原性β-消除反应解离O-糖链碱性试剂的选择 | 第30-31页 |
| ·实验结果与讨论 | 第31-38页 |
| ·2-AB、2-AP、ABEE、AEC、PMP5种衍生化反应的比较 | 第31-33页 |
| ·O-糖链的非还原性解离及同时PMP衍生化新方法反应条件的确定 | 第33-38页 |
| ·反应温度的确立 | 第33-34页 |
| ·反应时间的确定 | 第34页 |
| ·PMP衍生化对糖类物质质谱灵敏度的提高 | 第34-35页 |
| ·非还原性β-消除反应解离O-糖链碱性介质的选择 | 第35-38页 |
| ·实验小结 | 第38-40页 |
| 第三章 非还原性β-消除反应对粘蛋白和胎牛蛋白中O-糖链的解离及分析 | 第40-49页 |
| ·实验材料、仪器、试剂 | 第40-41页 |
| ·实验材料 | 第40页 |
| ·实验仪器 | 第40页 |
| ·实验试剂 | 第40页 |
| ·色谱条件 | 第40-41页 |
| ·质谱条件 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-43页 |
| ·O-糖链的非还原性解离及PMP衍生化同时进行新方法的反应机理 | 第41-42页 |
| ·非还原性解离O-糖链并同时进行PMP衍生化标记新方法的操作流程 | 第42页 |
| ·非还原性解离O-糖链并同时进行PMP衍生化标记新方法对粘蛋白中O-糖链的解离及分析 | 第42页 |
| ·非还原性解离O-糖链并同时进行PMP衍生化标记新方法对胎牛蛋白O-糖链的解离及分析 | 第42-43页 |
| ·实验结果和讨论 | 第43-48页 |
| ·非还原性解离O-糖链并同时进行PMP衍生化标记新方法对于粘蛋白中O-糖链ESI-MS分析 | 第43-44页 |
| ·非还原性解离O-糖链并同时进行PMP衍生化标记新方法对于胎牛蛋白中O-糖链ESI-MS分析 | 第44-45页 |
| ·非还原性O-消除反应对于粘蛋白中O-糖链的ESI-LC-MS分析 | 第45-48页 |
| ·本章小结 | 第48-49页 |
| 第四章 非还原性β-消除反应对于复杂生物样品中O-糖链的分析 | 第49-54页 |
| ·实验材料、试剂及仪器 | 第49-50页 |
| ·实验材料 | 第49页 |
| ·实验仪器 | 第49页 |
| ·实验试剂 | 第49页 |
| ·质谱条件 | 第49-50页 |
| ·实验方法 | 第50页 |
| ·非还原性β-消除反应解离O-糖链新方法在胎牛血清中的应用 | 第50页 |
| ·非还原性β-消除反应解离O-糖链新方法在人血清中的应用 | 第50页 |
| ·实验结果与讨论 | 第50-53页 |
| ·非还原性β-消除反应解离O-糖链新方法在胎牛血清中的应用 | 第50-52页 |
| ·非还原性β-消除反应解离O-糖链新方法在人血清中的应用 | 第52-53页 |
| ·本章总结 | 第53-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-66页 |
| 攻读硕士学位期间取得的科研成果 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
