| 缩略语表 | 第5-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 前言 | 第14-15页 |
| 文献回顾 | 第15-28页 |
| 实验一 HCV感染者CD4+T细胞miR-181a抑制DUSP6表达 | 第28-49页 |
| 1 材料 | 第28-31页 |
| 1.1 外周血来源 | 第28-29页 |
| 1.2 试剂 | 第29-30页 |
| 1.3 仪器和耗材 | 第30-31页 |
| 2 方法 | 第31-36页 |
| 2.1 CD4+T细胞分离和培养 | 第31页 |
| 2.2 miScript miRNA array | 第31-32页 |
| 2.3 共培养CD4+T细胞和HCV-或HCV+ Huh7肝细胞 | 第32-33页 |
| 2.4 流式细胞术检测 | 第33页 |
| 2.5 实时定量RT-PCR检测miR-181a和DUSP6 | 第33-35页 |
| 2.6 纯化CD4+T转化miR-181a precursors | 第35-36页 |
| 2.7 阻断DUSP6 | 第36页 |
| 2.8 统计学处理 | 第36页 |
| 3 结果 | 第36-46页 |
| 3.1 HCV感染者CD4+T细胞miRNA变化 | 第36-37页 |
| 3.2 HCV感染下调CD4+T细胞miR-181a表达 | 第37-39页 |
| 3.3 DUSP6在HCV感染的CD4+T细胞上表达增高 | 第39-40页 |
| 3.4 miR-181a抑制DUSP6来调节CD4+T细胞反应 | 第40-44页 |
| 3.5 抑制DUSP6能促进T细胞功能和增殖 | 第44-46页 |
| 4 讨论 | 第46-49页 |
| 实验二 ΔNp63-miR-181a-SIRT1信号通路调节HCV感染患者CD4+T细胞衰老机制 | 第49-82页 |
| 1 材料 | 第49-51页 |
| 1.1 外周血来源 | 第49页 |
| 1.2 试剂 | 第49-51页 |
| 1.3 仪器和耗材 | 第51页 |
| 2 方法 | 第51-59页 |
| 2.1 CD4+T细胞分离和培养 | 第51-52页 |
| 2.2 流式细胞术检测CD4+T细胞 | 第52页 |
| 2.3 Western Blot检测 ΔNp63在CD4+T细胞上表达 | 第52-53页 |
| 2.4 转染p63 si RNA或者SIRT1 si RNA或者mi181a precursors及其阴性对照 | 第53页 |
| 2.5 Flow-FISH法检测CD4+T细胞端粒长度 | 第53页 |
| 2.6 PCR-ELISA法检测端粒酶活性 | 第53-57页 |
| 2.7 Senescence β-Galactosidase（SA-β-gal）染色 | 第57-58页 |
| 2.8 流式检测细胞周期 | 第58页 |
| 2.9 统计学处理 | 第58-59页 |
| 3 结果 | 第59-77页 |
| 3.1 HCV感染者CD4+T细胞比健康对照者更衰老 | 第59-61页 |
| 3.2 抗衰老蛋白SIRT1在HCV感染者CD4+T细胞上升高 | 第61-65页 |
| 3.3 miR-181a抑制SIRT1在CD4+T细胞上的表达 | 第65-70页 |
| 3.4 ΔNp63抑制miR-181a在CD4+T细胞上的表达 | 第70-75页 |
| 3.5 ΔNp63-miR-181a-SIRT1通路在健康人CD4+T细胞上的表达 | 第75-77页 |
| 4 讨论 | 第77-82页 |
| 小结 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-98页 |
| 个人简历和研究成果 | 第98-101页 |
| 致谢 | 第101-102页 |
