摘要 | 第5-9页 |
Abstract | 第9-12页 |
英文缩略词索引 | 第18-20页 |
引言 | 第20-26页 |
第一章 抗p90/CIP2A自身抗体在乳腺癌免疫诊断中的价值 | 第26-60页 |
前言 | 第26-28页 |
技术路线 | 第28-29页 |
1 材料 | 第29-34页 |
1.1 临床样本 | 第29页 |
1.2 主要仪器设备及相关材料 | 第29-30页 |
1.3 主要试剂 | 第30-31页 |
1.4 常用试剂的配制 | 第31-34页 |
2 方法 | 第34-46页 |
2.1 纯化GST-p90/CIP2A融合蛋白 | 第34-38页 |
2.2 提纯p90/CIP2A蛋白 | 第38-39页 |
2.3 酶联免疫吸附实验 | 第39-40页 |
2.4 间接免疫荧光实验 | 第40-41页 |
2.5 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第41-42页 |
2.6 转膜 | 第42页 |
2.7 Western blotting | 第42-43页 |
2.8 免疫组织化学实验 | 第43-46页 |
2.9 统计学分析 | 第46页 |
3 结果 | 第46-54页 |
3.1 GST-p90/CIP2A融合蛋白的诱导表达 | 第46-47页 |
3.2 GST-p90/CIP2A融合蛋白的纯化 | 第47页 |
3.3 GST-p90/CIP2A蛋白的提纯 | 第47-48页 |
3.4 Bradford法测定GST-p90/CIP2A蛋白浓度 | 第48-49页 |
3.5 抗p90/CIP2A自身抗体在乳腺癌血清中阳性率的测定 | 第49-50页 |
3.6 应用ROC曲线评价抗p90/CIP2A自身抗体对乳腺癌的诊断价值 | 第50-52页 |
3.7 p90/CIP2A蛋白在HEp-2 细胞中的表达位点 | 第52-53页 |
3.8 p90/CIP2A蛋白在乳腺癌组织中表达的检测 | 第53-54页 |
4 讨论 | 第54-59页 |
4.1 抗p90/CIP2A自身抗体在乳腺癌血清中阳性率的测定 | 第54-57页 |
4.2 p90/CIP2A蛋白在HEp-2 细胞中的表达位点 | 第57-58页 |
4.3 p90/CIP2A蛋白在乳腺癌组织中表达水平的检测 | 第58-59页 |
小结 | 第59-60页 |
第二章 p90/CIP2A调控乳腺癌细胞增殖和凋亡的作用 | 第60-90页 |
前言 | 第60-63页 |
技术路线 | 第63-64页 |
1 材料 | 第64-69页 |
1.1 细胞株的选择 | 第64页 |
1.2 慢病毒载体系统 | 第64-66页 |
1.3 主要仪器设备及相关实验材料 | 第66-67页 |
1.4 主要试剂 | 第67-68页 |
1.5 常用试剂的配制 | 第68-69页 |
2 方法 | 第69-79页 |
2.1 慢病毒介导的细胞转染 | 第69-72页 |
2.2 细胞计数 | 第72页 |
2.3 细胞的传代培养 | 第72-73页 |
2.4 细胞的冻存与复苏 | 第73-74页 |
2.5 SDS-PAGE电泳 | 第74页 |
2.6 转膜 | 第74页 |
2.7 Western blotting | 第74-75页 |
2.8 细胞增殖实验 | 第75-76页 |
2.9 克隆形成实验 | 第76页 |
2.10 免疫荧光实验 | 第76-77页 |
2.11 细胞凋亡的检测 | 第77-78页 |
2.12 统计学分析 | 第78-79页 |
3 结果 | 第79-85页 |
3.1 p90/CIP2A在不同乳腺癌细胞系中的表达 | 第79页 |
3.2 RNA干涉抑制p90/CIP2A在乳腺癌细胞中稳定表达模型的建立 | 第79-80页 |
3.3 p90/CIP2A蛋白在乳腺癌细胞中表达的荧光定位 | 第80页 |
3.4 沉默p90/CIP2A的表达抑制乳腺癌细胞的增殖和克隆形成 | 第80-83页 |
3.5 p90/CIP2A的缺失促进由紫杉醇诱导乳腺癌细胞的凋亡作用 | 第83-84页 |
3.6 抑制p90/CIP2A的表达下调c-Myc和ERK1/2 磷酸化 | 第84-85页 |
4 讨论 | 第85-90页 |
4.1 沉默p90/CIP2A的表达抑制乳腺癌细胞的增殖和克隆形成 | 第85-86页 |
4.2 p90/CIP2A的缺失促进由紫杉醇诱导乳腺癌细胞的凋亡作用 | 第86-88页 |
4.3 抑制p90/CIP2A的表达下调c-Myc和ERK1/2 磷酸化 | 第88-90页 |
小结 | 第90页 |
本研究的创新点与不足之处 | 第90-91页 |
下一步研究计划 | 第91-92页 |
参考文献 | 第92-101页 |
综述 | 第101-109页 |
参考文献 | 第107-109页 |
个人简历、在学期间发表的学术论文及参与科研项目 | 第109-110页 |
致谢 | 第110页 |