| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 缩略词表 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| 1 铜离子和铁离子对花粉萌发和花粉管伸长影响的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.1 铜离子和铁离子在植物中的作用 | 第13页 |
| 1.2 铜离子对花粉萌发和花粉管伸长的影响 | 第13-14页 |
| 1.3 铁离子对花粉萌发和花粉管伸长的影响 | 第14页 |
| 2 重金属转运蛋白的研究进展 | 第14-21页 |
| 2.1 YSL蛋白家族的研究进展 | 第15-18页 |
| 2.2 COPT蛋白家族的研究进展 | 第18-21页 |
| 3. 研究目的 | 第21-23页 |
| 第二章 铁离子和铜离子对花粉萌发和花粉管伸长的影响 | 第23-31页 |
| 1 材料与方法 | 第23-24页 |
| 1.1 试验材料 | 第23-24页 |
| 1.2 试验方法 | 第24页 |
| 1.2.1 处理 | 第24页 |
| 1.2.2 培养方法 | 第24页 |
| 1.2.3 花粉萌发和花粉管伸长的观察 | 第24页 |
| 1.2.4 数据处理 | 第24页 |
| 2 结果与分析 | 第24-28页 |
| 3 讨论 | 第28-31页 |
| 第三章 PbrYSL4基因的克隆和功能验证 | 第31-59页 |
| 1 材料与方法 | 第32-43页 |
| 1.1 试验材料 | 第32页 |
| 1.2 菌株和载体以及主要化学试剂 | 第32页 |
| 1.3 生物信息学分析 | 第32-33页 |
| 1.3.1 序列收集和梨YSL蛋白家族的鉴定 | 第32页 |
| 1.3.2 序列和系统发育分析 | 第32-33页 |
| 1.3.3 多序列比对和跨膜结构域分析 | 第33页 |
| 1.3.4 染色体定位和基因结构分析 | 第33页 |
| 1.3.5 基因扩张模式分析 | 第33页 |
| 1.4 总RNA的提取 | 第33-34页 |
| 1.5 半定量RT-PCR和qRT-PCR | 第34-35页 |
| 1.6 载体构建 | 第35-41页 |
| 1.6.1 大肠杆菌感受态DH5α的制备 | 第35-36页 |
| 1.6.2 PbrYSL4基因的克隆 | 第36-37页 |
| 1.6.3 质粒小量以及大量提取 | 第37-39页 |
| 1.6.3.1 质粒小量提取方法 | 第37-38页 |
| 1.6.3.2 质粒大量提取的方法 | 第38-39页 |
| 1.6.4 亚细胞定位载体的构建 | 第39-40页 |
| 1.6.5 酵母表达载体的构建 | 第40-41页 |
| 1.7 亚细胞定位 | 第41-42页 |
| 1.8 酵母快速转化法 | 第42-43页 |
| 1.9 酵母功能互补 | 第43页 |
| 2 结果与分析 | 第43-56页 |
| 2.1 YSL蛋白家族生物信息学分析 | 第43-49页 |
| 2.1.1 序列的收集和梨YSL蛋白家族鉴定 | 第43-44页 |
| 2.1.2 梨YSL家族的基因复制 | 第44-48页 |
| 2.1.3 YSL基因家族的进化分析 | 第48-49页 |
| 2.2 PbrYSL基因在不同组织中的表达模式 | 第49-50页 |
| 2.3 铁离子对PbrYSLs表达的影响 | 第50-52页 |
| 2.4 PbrYSL4的亚细胞定位和酵母功能互补分析 | 第52-56页 |
| 3 讨论 | 第56-59页 |
| 第四章 PbrCOPT1和PbrCOPT2的克隆和功能验证 | 第59-77页 |
| 1 材料与方法 | 第60-66页 |
| 1.1 试验材料 | 第60页 |
| 1.2 菌株和载体以及主要化学试剂 | 第60页 |
| 1.3 生物信息学分析 | 第60页 |
| 1.4 总RNA的提取 | 第60页 |
| 1.5 PbrCOPT1和PbrCOPT2基因的qRT-PCR分析 | 第60-61页 |
| 1.6 载体构建 | 第61-64页 |
| 1.6.1 大肠杆菌感受态DH5α的制备 | 第61页 |
| 1.6.2 PbrCOPT1和PbrCOPT2基因的克隆 | 第61-62页 |
| 1.6.3 质粒小量提取 | 第62-63页 |
| 1.6.4 亚细胞定位载体的构建 | 第63-64页 |
| 1.6.5 酵母表达载体的构建 | 第64页 |
| 1.7 亚细胞定位 | 第64-65页 |
| 1.7.1 农杆菌感受态的制备 | 第64-65页 |
| 1.7.2 农杆菌感受态的转化 | 第65页 |
| 1.7.3 农杆菌侵染洋葱表皮 | 第65页 |
| 1.8 酵母快速转化法 | 第65页 |
| 1.9 酵母功能互补 | 第65-66页 |
| 2 结果与分析 | 第66-76页 |
| 2.1 序列分析 | 第66-70页 |
| 2.2 PbrCOPT1和PbrCOPT2基因全长cDNA的克隆 | 第70-71页 |
| 2.3 PbrCOPT1和PbrCOPT2基因在花粉中的表达分析 | 第71-73页 |
| 2.4 PbrCOPT1和PbrCOPT2的亚细胞定位 | 第73-74页 |
| 2.5 PbrCOPT1和PbrCOPT2的酵母功能验证 | 第74-76页 |
| 3 讨论 | 第76-77页 |
| 全文结论与创新点 | 第77-79页 |
| 一、全文结论 | 第77页 |
| 二、创新点 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-89页 |
| 附录 | 第89-93页 |
| 在校期间发表论文情况 | 第93-95页 |
| 致谢 | 第95页 |
