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谷氨酰胺转氨酶催化的自组装短肽(I_mK_n)水凝胶表面功能化及其应用

摘要第4-6页
abstract第6-7页
第一章 绪论第11-33页
    1.1 研究背景及意义第11-12页
    1.2 酶催化自组装水凝胶第12-24页
        1.2.1 两亲性肽的自组装与凝胶化第12-16页
        1.2.2 谷氨酰胺转氨酶(TGase)概述第16-18页
        1.2.3 生物酶的催化作用第18-24页
    1.3 生物活性的肽序列RGD(Arg-Gly-Asp)第24-28页
        1.3.1 RGD与整合素第24-26页
        1.3.2 RGD的生物学功能第26-28页
    1.4 多肽水凝胶的应用第28-31页
    1.5 选题依据与主要研究内容第31-33页
第二章 TGase对短肽的催化作用第33-54页
    2.1 引言第33页
    2.2 实验仪器与试剂第33-35页
        2.2.1 实验仪器第33-34页
        2.2.2 实验试剂第34-35页
    2.3 实验步骤与方法第35-38页
        2.3.1 肽分子的设计合成第35-37页
        2.3.2 溶液的配制第37页
        2.3.3 目的分子的检测第37-38页
    2.4 实验结果与讨论第38-52页
        2.4.1 肽分子的设计第38-40页
        2.4.2 基于I_4K_2分子的酶促反应第40-45页
        2.4.3 基于I_3K分子的酶促反应第45-48页
        2.4.4 基于KI_4K分子的酶促反应第48-51页
        2.4.5 酶促成胶机理分析第51-52页
    2.5 小结第52-54页
第三章 功能化凝胶性能表征第54-80页
    3.1 引言第54页
    3.2 实验仪器与试剂第54-55页
        3.2.1 实验仪器第54-55页
        3.2.2 实验试剂第55页
    3.3 实验步骤与方法第55-57页
        3.3.1 自组装体形貌表征第55-56页
        3.3.2 多肽二级结构表征(CD)第56页
        3.3.3 振荡流变学第56-57页
    3.4 实验结果与讨论第57-78页
        3.4.1 酶催化前后自组装体的微观结构第57-67页
        3.4.2 酶催化前后自组装体的二级结构第67-69页
        3.4.3 凝胶性能及成胶动力学第69-75页
        3.4.4 短肽的表面功能化分析第75-78页
    3.5 小结第78-80页
第四章 功能化凝胶的生物相容性第80-93页
    4.1 引言第80页
    4.2 实验仪器与试剂第80-82页
        4.2.1 实验仪器第80-81页
        4.2.2 实验试剂第81-82页
    4.3 实验步骤与方法第82-86页
        4.3.1 细胞的复苏、传代及冻存第82-83页
        4.3.2 MTT实验第83-84页
        4.3.3 乳酸脱氢酶(LDH)释放实验第84页
        4.3.4 Calcein-AM/PI染色第84-85页
        4.3.5 TRITC-Rhalloidin/ DAPI免疫荧光染色第85页
        4.3.6 细胞粘附性能研究第85页
        4.3.7 凝胶的免疫反应实验(ELISA)第85-86页
    4.4 实验结果与讨论第86-92页
        4.4.1 多肽对正常细胞的毒性研究第86-88页
        4.4.2 功能化凝胶对细胞粘附、生长的影响第88-91页
        4.4.3 凝胶的生物相容性第91-92页
    4.5 小结第92-93页
第五章 功能化凝胶在组织工程和药物缓释方面的应用第93-108页
    5.1 引言第93页
    5.2 实验仪器与试剂第93-95页
        5.2.1 实验仪器第93-94页
        5.2.2 实验试剂第94-95页
    5.3 实验步骤与方法第95-98页
        5.3.1 碱性磷酸酶(ALP)活性检测第95页
        5.3.2 考马斯亮蓝测定蛋白总量第95-96页
        5.3.3 逆转录-聚合酶链反应第96-98页
    5.4 实验结果与讨论第98-106页
        5.4.1 基于I_4K_2凝胶在骨组织修复中的应用第98-104页
        5.4.2 基于I_3K凝胶在药物缓释中的应用第104-106页
    5.5 小结第106-108页
结论第108-110页
参考文献第110-120页
附录第120-123页
攻读硕士学位期间取得的学术成果第123-124页
致谢第124页

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