| 缩写词表 | 第6-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一章 绪论 | 第11-31页 |
| 1.1 Reteplase的研究进展 | 第12-13页 |
| 1.2 Reteplase的性质 | 第13-16页 |
| 1.2.1 Reteplase的结构 | 第13-15页 |
| 1.2.2 Reteplase作用机理 | 第15-16页 |
| 1.3 Reteplase的表达 | 第16-19页 |
| 1.3.1 表达体系 | 第16-17页 |
| 1.3.2 表达形式 | 第17-19页 |
| 1.4 Reteplase的变性机理 | 第19-20页 |
| 1.5 Reteplase的复性研究进展 | 第20-25页 |
| 1.5.1 蛋白质体外复性机理 | 第20-21页 |
| 1.5.2 二硫键在蛋白质正确折叠中的作用 | 第21-23页 |
| 1.5.3 蛋白质复性方法 | 第23-25页 |
| 1.6 本论文的立题依据与研究内容 | 第25-27页 |
| 参考文献 | 第27-31页 |
| 第二章 包涵体的制备及纯化方法的研究 | 第31-41页 |
| 2.1 导言 | 第31页 |
| 2.2 材料与方法 | 第31-34页 |
| 2.2.1 菌种 | 第31页 |
| 2.2.2 主要仪器 | 第31页 |
| 2.2.3 试剂 | 第31-32页 |
| 2.2.4 培养基 | 第32-33页 |
| 2.2.5 摇瓶培养 | 第33页 |
| 2.2.6 发酵罐培养 | 第33页 |
| 2.2.7 包涵体的提取 | 第33页 |
| 2.2.8 包涵体的纯化 | 第33-34页 |
| 2.2.9 其他检测方法 | 第34页 |
| 2.3 实验结果 | 第34-38页 |
| 2.3.1 IPTG浓度对蛋白表达的影响 | 第34-35页 |
| 2.3.2 诱导时间的确定 | 第35页 |
| 2.3.3 葡萄糖浓度对目的蛋白表达率的影响 | 第35-36页 |
| 2.3.4 诱导后培养温度的影响 | 第36-37页 |
| 2.3.5 包涵体的纯化方法 | 第37-38页 |
| 2.4 讨论 | 第38-39页 |
| 2.5 小结 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-41页 |
| 第三章 Reteplase变性复性条件优化的研究 | 第41-50页 |
| 3.1 导言 | 第41页 |
| 3.2 材料与方法 | 第41-43页 |
| 3.2.1 仪器 | 第41页 |
| 3.2.2 试剂 | 第41-42页 |
| 3.2.3 包涵体的溶解 | 第42页 |
| 3.2.4 蛋白质的复性 | 第42页 |
| 3.2.5 复性蛋白的活性测定 | 第42-43页 |
| 3.3 实验结果 | 第43-47页 |
| 3.3.1 不同变性剂对Reteplase包涵体溶解效果的影响 | 第43-44页 |
| 3.3.2 不同还原剂对Reteplase包涵体溶解效果的影响 | 第44页 |
| 3.3.3 不同稀释浓度对Reteplase复性效果的影响 | 第44-45页 |
| 3.3.4 不同复性时间对Reteplase复性效果的影响 | 第45-46页 |
| 3.3.5 不同复性温度对Reteplase复性效果的影响 | 第46-47页 |
| 3.4 讨论 | 第47-48页 |
| 3.5 小结 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-50页 |
| 第四章 Reteplase的分离纯化与性质研究 | 第50-65页 |
| 4.1 导言 | 第50页 |
| 4.2 材料与方法 | 第50-54页 |
| 4.2.1 菌株 | 第50页 |
| 4.2.2 试剂 | 第50-51页 |
| 4.2.3 主要仪器 | 第51页 |
| 4.2.4 rETI生化性质的测定 | 第51-52页 |
| 4.2.5 rETI亲和树脂的制备 | 第52页 |
| 4.2.6 复性Reteplase的透析 | 第52页 |
| 4.2.7 ETI亲和层析纯化Reteplase | 第52页 |
| 4.2.8 纯化Reteplase的纯度测定 | 第52-53页 |
| 4.2.9 纯化Reteplase的活性测定 | 第53页 |
| 4.2.10 氨基酸组成分析 | 第53页 |
| 4.2.11 N-末端氨基酸分析 | 第53-54页 |
| 4.2.12 C-末端氨基酸分析 | 第54页 |
| 4.2.13等电点(pI)的测定 | 第54页 |
| 4.3 结果 | 第54-62页 |
| 4.3.1 rETI相对分子量 | 第54-55页 |
| 4.3.2 rETI抑制活性的测定 | 第55-57页 |
| 4.3.3 Reteplase纯度的电泳检测 | 第57-58页 |
| 4.3.4 纯化Reteplase的活性检测 | 第58-59页 |
| 4.3.5 氨基酸组成分析 | 第59-61页 |
| 4.3.6 N-末端氨基酸序列分析 | 第61页 |
| 4.3.7 C-末端氨基酸序列分析 | 第61页 |
| 4.3.8 pI值测定 | 第61-62页 |
| 4.4 讨论 | 第62-63页 |
| 4.5 小结 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 硕士在读期间发表的论文 | 第66-67页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第67页 |
