| PREFACE | 第5-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| 英文摘要 | 第9-12页 |
| LIST OF TABLES | 第18-19页 |
| LIST OF FIGURES | 第19-21页 |
| MAJOR ACRONYMS USED | 第21-22页 |
| Chapter 1:Introduction | 第22-32页 |
| 1.1 Introduction | 第22-27页 |
| 1.2 Limitation of Study | 第27页 |
| 1.3 Objectives | 第27-28页 |
| 1.4 Materials and Methods | 第28-30页 |
| 1.5 Organization of the Thesis | 第30-31页 |
| 1.6 Data Analysis | 第31-32页 |
| Chapter 2:Literature Review | 第32-58页 |
| 2.1 Tissue Culture | 第32-35页 |
| 2.2 Adventitious Shoot Regeneration from the Leaf Explants of Pears | 第35-40页 |
| 2.3 Crop Damage by Insect | 第40-41页 |
| 2.4 Importance of Biotech Crops | 第41-43页 |
| 2.5 Different Genes to Control Insects | 第43-46页 |
| 2.6 Genetic Engineering | 第46-58页 |
| 2.6.1 Methods of Gene Transformation | 第47-49页 |
| 2.6.1.1 Direct/Mechanical Methods | 第47-48页 |
| 2.6.1.2 Indirect/Biological Methods | 第48-49页 |
| 2.6.2 Promoters | 第49-50页 |
| 2.6.3 Marker and Reporter Genes | 第50-53页 |
| 2.6.3.1 Commonly Used Selectable Markers | 第51-52页 |
| 2.6.3.2 Commonly Used Reporter Genes | 第52-53页 |
| 2.6.4 Species Barrier Penetration Genes | 第53页 |
| 2.6.5 Polymerage Chain Reaction(PCR) | 第53-56页 |
| 2.6.6 Southern Blotting | 第56-58页 |
| Chapter 3:Experiment on Shoot Proliferation | 第58-66页 |
| 3.1 Introduction | 第58页 |
| 3.2 Materials and Methods | 第58-61页 |
| 3.2.1 Plant Materials | 第58页 |
| 3.2.2 Preparation and Sterilization of Explants,Utensils and Medium | 第58-59页 |
| 3.2.3 Shoot Proliferation and Maintenance | 第59-60页 |
| 3.2.4 Effects of 6-BA on Shoot Proliferation | 第60页 |
| 3.2.5 Treatment and Replications | 第60-61页 |
| 3.2.6 Statistical Analysis | 第61页 |
| 3.3 Results and Discussion | 第61-66页 |
| 3.3.1 Shoot Proliferation and Maintenance | 第61-62页 |
| 3.3.2 Effects of 6-BA on Shoot Proliferation | 第62-66页 |
| Chapter 4:Adventitious Shoot Regeneration from Different Pyrus spp. | 第66-82页 |
| 4.1 Introduction | 第66页 |
| 4.2 Materials and Methods | 第66-70页 |
| 4.2.1 Plant Materials | 第66-67页 |
| 4.2.2 Preparation and Sterilization of Explants,Utensils and Media | 第67页 |
| 4.2.3 Shoot Proliferation | 第67页 |
| 4.2.4 Effect of Hormones on Shoot Regeneration | 第67页 |
| 4.2.5 Adventitious Shoot Regeneration | 第67-69页 |
| 4.2.6 Maximum and Mean Number of Shoots and Regeneration Percentage | 第69页 |
| 4.2.7 Treatment and Replications | 第69页 |
| 4.2.8 Statistical Analysis | 第69-70页 |
| 4.2.9 Definition | 第70页 |
| 4.3 Results and Discussion | 第70-82页 |
| 4.3.1 Shoot Proliferation and Maintenance | 第70页 |
| 4.3.2 Callus Formation | 第70-72页 |
| 4.3.3 Burr Knots and Other Physiological Disorders | 第72页 |
| 4.3.4 Vitrification | 第72-73页 |
| 4.3.5 Direct and Indirect Somatic Embryogenesis | 第73-74页 |
| 4.3.6 Effect of Hormones on Shoot Regeneration | 第74页 |
| 4.3.7 Adventitious Shoot Regeneration | 第74-77页 |
| 4.3.8 Maximum Number of Shoots and Regeneration Rate | 第77-79页 |
| 4.3.9 Leaf Size and Shoot Regeneration | 第79-80页 |
| 4.3.10 Summary | 第80-82页 |
| Chapter 5:Adventitious Shoot Regeneration from the Stem Segments of the Whangkeumbae Pear | 第82-96页 |
| 5.1 Introduction | 第82-83页 |
| 5.2 Materials and Methods | 第83-86页 |
| 5.2.1 Plant Materials | 第83页 |
| 5.2.2 Sterilization | 第83-84页 |
| 5.2.3 Culture | 第84页 |
| 5.2.4 Effect of Explants Types on Shoot Regeneration | 第84页 |
| 5.2.5 Adventitious shoot regeneration | 第84-85页 |
| 5.2.6 Maximum and mean number of shoots and regeneration percentage | 第85页 |
| 5.2.7 Treatments and replications | 第85-86页 |
| 5.2.8 Statistical analysis | 第86页 |
| 5.2.9 Definition | 第86页 |
| 5.3 Results | 第86-90页 |
| 5.3.1 Callus Formation | 第86-87页 |
| 5.3.2 Adventitious Shoot Regeneration | 第87-89页 |
| 5.3.3 Maximum Number of Shoots per Explant and Regeneration Rate | 第89-90页 |
| 5.4 Discussion | 第90-94页 |
| 5.5 Summary | 第94-96页 |
| Chapter 6:Studies on Browning Problem and Polyphenol Contents | 第96-118页 |
| 6.1 Introduction | 第96-97页 |
| 6.2 Material and Methods | 第97-103页 |
| 6.2.1 Plant Materials | 第97页 |
| 6.2.2 Excise of Explants and Sterilization | 第97-98页 |
| 6.2.3 Growing Medium | 第98页 |
| 6.2.4 Use of Phytohormones and Sterilization | 第98-99页 |
| 6.2.5 Use of Ascorbic Acid and Polyvinyl-Pyrrolidone(PVP) and Cold Treatment | 第99页 |
| 6.2.6 Experimental Design | 第99页 |
| 6.2.7 Tissue Culture Conditions | 第99-100页 |
| 6.2.8 Browning Problem | 第100页 |
| 6.2.9 Record Keeping | 第100页 |
| 6.2.10 Extraction and Measurement of Phenols | 第100-101页 |
| 6.2.11 Chemicals Used During Experiment | 第101页 |
| 6.2.12 Methods Used to Measure Water Soluble Polyphenols | 第101-102页 |
| 6.2.13 Methods Used to Measure Water Insoluble Polyphenol | 第102-103页 |
| 6.2.14 Statistical Analysis | 第103页 |
| 6.2.15 Definitions | 第103页 |
| 6.3 Result and Discussions | 第103-118页 |
| 6.3.1 Observation on Browning | 第103-106页 |
| 6.3.2 Liquid Culture to Control Browning | 第106-107页 |
| 6.3.3 Effect of Dark Treatment on Browning | 第107-109页 |
| 6.3.4 Use of Ascorbic Acid to Control Browning | 第109-110页 |
| 6.3.5 Effect of Polyvinyl Pyrrolidone(PVP) on Browning | 第110页 |
| 6.3.6 Cold Treatment to Control Browning | 第110-111页 |
| 6.3.7 Use of Activated Charcoal(AC) | 第111页 |
| 6.3.8 Phenol contents on Shoots | 第111-115页 |
| 6.3.9 Summary | 第115-118页 |
| Chapter 7:Agrobacterium Mediated CpTI Gene Transformation in Some Pear Cultivars(Pyrus spp.) Grown in vitro | 第118-142页 |
| 7.1 Introduction | 第118-120页 |
| 7.2 Material and Methods | 第120-132页 |
| 7.2.1 Plant Materials | 第120-121页 |
| 7.2.2 Sterilization of Media,Utensils and Glassware | 第121页 |
| 7.2.3 Preparation of Antibiotics | 第121-122页 |
| 7.2.4 The Plasmid Vector | 第122页 |
| 7.2.5 Preparation of YEB Media and Culture of Agrobacterium tumefasciens | 第122-123页 |
| 7.2.6 Preparation of Cultural Media | 第123-124页 |
| 7.2.7 Culture of Agrobacterium tumefasciens | 第124页 |
| 7.2.8 Pre-Culture | 第124-125页 |
| 7.2.9 Co-Culture | 第125-126页 |
| 7.2.10 Replications and Bacterial Density | 第126页 |
| 7.2.11 Hormones Used for Shoot Regeneration | 第126页 |
| 7.2.12 Explants Types | 第126页 |
| 7.2.13 Shoot Expression | 第126-127页 |
| 7.2.14 Kanamycine Test | 第127页 |
| 7.2.15 DNA Extraction Protocol | 第127-130页 |
| 7.2.15.1 Preparation of Buffer Solutions,Chemicals and Reagents | 第127-129页 |
| 7.2.15.2 Procedure Used to Extract DNA | 第129-130页 |
| 7.2.15.3 Procedure to Purify DNA | 第130页 |
| 7.2.16 DNA Purity Test | 第130-131页 |
| 7.2.17 Measurement of Concentration of DNA | 第131页 |
| 7.2.18 PCR Reaction Mixture and Thermocycle | 第131-132页 |
| 7.2.19 Gel Electrophoresis | 第132页 |
| 7.2.20 PCR Analysis | 第132页 |
| 7.3 Result and Discussions | 第132-142页 |
| 7.3.1 Shoot Regeneration | 第132-134页 |
| 7.3.2 Kanamycin Test | 第134-135页 |
| 7.3.3 DNA Extraction | 第135-136页 |
| 7.3.4 Transgenic Cultivars | 第136-142页 |
| Chapter 8:Major Problems Encountered | 第142-146页 |
| 8.1 Browning Problem | 第142页 |
| 8.2 Bacterial Infection | 第142-143页 |
| 8.3 Fungal Infection | 第143页 |
| 8.4 Insect Infestation | 第143-144页 |
| 8.5 Vitrification | 第144页 |
| 8.6 Difficulties in Shoot Proliferation | 第144页 |
| 8.7 Difficulties to Regenerate Adventitious Shoots | 第144-145页 |
| 8.8 Difficulties to Control the Growth of A.tumefasciens | 第145页 |
| 8.9 Effect of CEF on Shoot Regeneration | 第145页 |
| 8.10 Cease of Growth of A.tumefasciens | 第145页 |
| 8.11 Physiological Disorders | 第145-146页 |
| Chapter 9:Conclusion and Future Research | 第146-148页 |
| 9.1 Conclusion | 第146-147页 |
| 9.2 Future Research | 第147-148页 |
| REFERENCES | 第148-166页 |
| ANNEXES | 第166-174页 |
| Annex-Ⅰ:Some of the Insect Pasts,Mites and Nematode of Pear with Their Zoological Names | 第166-168页 |
| Armex-Ⅱ:Different Strains of Agrobacterium tumefaciens used in Genetic Transformation of Various Fruit Species | 第168-169页 |
| Annex-Ⅲ:Transgenic Fruit Plants with Improved Horticultural Traits Developed via Agrobacterium-mediated Gene Transformation | 第169-171页 |
| Annex-Ⅳ:List of Major Apparatus Needed for Tissue Culture | 第171-172页 |
| Annex-Ⅴ:MS Medium Used During Experiment(Stock Solution) | 第172-173页 |
| Annex-Ⅵ:Phytohormones and Other Chemicals Used During Experiment and Their Preparation Procedure(Stock Solution) | 第173-174页 |
| ACKNOWLEDGEMENTS | 第174-175页 |
