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原沉默子及染色质重构蛋白对基因沉默和异染色质结构的作用

内容提要第4-6页
中文摘要第6-9页
Abstract第9-11页
英文缩略词第12-17页
前言第17-19页
第1章 绪论第19-32页
    1.1 酿酒酵母的基因沉默第19-27页
        1.1.1 酿酒酵母基因沉默的区域第19-21页
        1.1.2 基因沉默的相关蛋白第21-22页
        1.1.3 基因沉默的机制第22-24页
        1.1.4 基因沉默的形成,维持,遗传第24-27页
    1.2 酿酒酵母的原沉默子第27-29页
        1.2.1 酿酒酵母的沉默子第27-28页
        1.2.2 原沉默子ORC结合位点第28页
        1.2.3 原沉默子Abf1p结合位点第28-29页
        1.2.4 原沉默子Rap1p结合位点第29页
    1.3 染色质重构因子第29-32页
        1.3.1 染色质重构因子Fun30蛋白第30页
        1.3.2 染色质重构因子IswI蛋白第30-32页
第2章 不同原沉默子基因沉默作用的表型第32-48页
    2.1 方法第33-37页
        2.1.1 LiAc法转化酵母第33页
        2.1.2 玻璃珠法提取基因组DNA第33-34页
        2.1.3 Southern blotting第34页
        2.1.4 基因沉默表型分析法第34-35页
        2.1.5 质粒的构建第35页
        2.1.6 酵母菌种的构建以及Southern blot法鉴定第35-37页
    2.2 结果第37-44页
        2.2.1 Southern blotting法鉴定酵母菌株第37-38页
        2.2.2 PCR法鉴定酵母菌株第38-39页
        2.2.3 不同原沉默子对基因沉默的起到不同的作用第39-41页
        2.2.4 原沉默子拷贝数对基因沉默的影响第41-43页
        2.2.5 原沉默子位置对基因沉默的影响第43-44页
    2.3 讨论第44-48页
第3章 原沉默子对沉默染色质结构的影响第48-63页
    3.1 方法第50-52页
        3.1.1 DNA拓扑结构分析法第50-51页
        3.1.2 MNase降解实验第51-52页
    3.2 结果第52-61页
        3.2.1 不同原沉默子对染色质紧密程度有不同的影响第52-53页
        3.2.2 Abf1拷贝数对染色质紧密程度的影响第53-54页
        3.2.3 Rap1位置对染色质紧密程度的影响第54-56页
        3.2.4 不同原沉默子对异染色质稳定性的影响第56-57页
        3.2.5 不同原沉默子对染色质核小体分布的影响第57-61页
    3.3 讨论第61-63页
第4章 染色质重构因子对基因沉默及染色质结构的作用第63-77页
    4.1 材料和方法第63-65页
        4.1.1 菌株第63-64页
        4.1.2 试剂第64页
        4.1.3 方法第64-65页
    4.2 结果第65-74页
        4.2.1 Fun30和IswI对HML区域基因沉默影响第65-66页
        4.2.2 高度负超螺旋的异染色质需要Fun30作用而不需要IswI第66-68页
        4.2.3 Fun30蛋白有助于染色质形成特定结构第68-70页
        4.2.4 IswI对异染色质的形成没有影响第70页
        4.2.5 IswI和Fun30对异染色质的形成没有影响第70-71页
        4.2.6 Fun30对沉默化染色质结构没有影响第71页
        4.2.7 Fun30对沉默化染色质组蛋白修饰没有影响第71-72页
        4.2.8 沉默异染色质结构的形成需要Fun30蛋白第72-73页
        4.2.9 IswI对异染色质结构起维持稳定作用第73-74页
    4.3 讨论第74-77页
参考文献第77-97页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第97-98页
致谢第98页

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