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小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的分子机制研究

摘要第1-7页
Abstract第7-14页
第一章 绪论第14-27页
   ·小菜蛾概况第14-15页
   ·小菜蛾的抗药性研究进展第15-16页
     ·小菜蛾抗药性发生现状第15页
     ·小菜蛾抗药性适合度研究第15-16页
   ·Bt毒素的研究进展第16-18页
     ·Bt毒素第16-17页
     ·Bt毒素的分类第17页
     ·Bt毒素的作用机理第17-18页
   ·昆虫对Bt抗性研究概况第18-24页
     ·昆虫对Bt的抗性现状第18-19页
     ·昆虫对Bt的抗性机制第19-20页
     ·Bt毒素受体的研究进展第20-24页
   ·昆虫杆状病毒表达系统的研究第24-26页
     ·昆虫杆状病毒表达系统第24页
     ·杆状病毒(Baculovirus)第24页
     ·昆虫杆状病毒表达系统的发展及其优点第24-25页
     ·昆虫杆状病表达系统的影响因素第25-26页
   ·研究目的和意义第26-27页
第二章 小菜蛾的室内饲养及汰选第27-34页
   ·实验材料第27-28页
     ·供试昆虫第27页
     ·供试蔬菜第27页
     ·供试药剂第27-28页
     ·主要仪器和材料第28页
   ·实验方法第28-29页
     ·小菜蛾的饲养第28页
     ·小菜蛾的室内汰选第28页
     ·小菜蛾的生物测定第28-29页
     ·小菜蛾抗敏互交及蛹4℃处理对产卵量的影响第29页
     ·小菜蛾卵的尺寸随产卵时间的变化第29页
     ·数据处理第29页
   ·结果与分析第29-32页
     ·Cry1Ac毒素对小菜蛾的抗性汰选第29-30页
     ·4℃处理的蛹对产卵量的影响第30页
     ·抗性小菜蛾Cry1AcR与敏感小菜蛾SS杂交对产卵量的影响第30-31页
     ·小菜蛾卵的尺寸随产卵时间的变化第31-32页
   ·小结与讨论第32-34页
第三章 抗Bt毒素Cry1Ac小菜蛾适合度研究第34-40页
   ·实验材料第34页
     ·供试昆虫第34页
     ·仪器和材料第34页
   ·实验方法第34-35页
     ·成虫繁殖力观察第34-35页
     ·卵期观察第35页
     ·幼虫历期观察第35页
     ·蛹期观察第35页
     ·成虫寿命观察第35页
     ·抗性和敏感小菜蛾种群的生命表组建第35页
   ·结果与分析第35-39页
     ·小菜蛾抗性、敏感种群的生物学特性第35-36页
     ·小菜蛾抗性、敏感种群生命表第36-38页
     ·小菜蛾抗性、敏感种群生命参数和相对适合度第38-39页
   ·小结与讨论第39-40页
第四章 小菜蛾抗性和敏感种群类钙粘蛋白的克隆及序列分析第40-54页
   ·实验材料第40-41页
     ·供试小菜蛾第40页
     ·载体与菌株第40页
     ·主要试剂第40-41页
     ·主要仪器第41页
   ·试验方法第41-44页
     ·小菜蛾SS、Cry1AcR 的中肠总RNA提取第41页
     ·合成cDNA第41页
     ·小菜蛾SS、Cry1AcR的类钙粘蛋白基因(CAD) PCR第41-42页
     ·CAD DNA 的纯化回收第42页
     ·CAD 的连接第42页
     ·转化与细菌培养第42页
     ·提取质粒DNA第42-43页
     ·质粒DNA 的检测第43页
     ·测序以及CAD 序列分析第43-44页
   ·结果与分析第44-52页
     ·小菜蛾SS、Cry1AcR的中肠总RNA提取第44页
     ·合成的cDNA 的引物检测第44-45页
     ·小菜蛾SS、Cry1Ac 的CAD的PCR扩增第45页
     ·CAD 的质粒酶切及PCR 检测第45-46页
     ·小菜蛾CAD 序列结果分析第46-52页
   ·小结与讨论第52-54页
第五章 小菜蛾类钙粘蛋白的表达第54-60页
   ·实验材料第54-55页
     ·材料第54页
     ·试剂第54页
     ·仪器第54-55页
   ·实验方法第55-57页
     ·双酶切目的质粒(pCR-XL-TOPO /CAD)和载体质粒(pFastBacHTb)第55页
     ·目的片段的胶回收第55页
     ·目的基因与表达载体的连接第55页
     ·将连接产物转化至TOP10第55页
     ·质粒DNA 的提取第55-56页
     ·双酶切及PCR 检测第56页
     ·转化至感受态细胞 DH10Bac第56页
     ·提取杆粒Bac/ CAD-pFastBacHTb第56页
     ·杆粒的检测第56页
     ·转染与蛋白表达第56-57页
     ·重组蛋白的SDS-PAGE检测第57页
   ·实验结果第57-59页
     ·CAD-pFastBacHTb质粒检测第57-58页
     ·Bac/ CAD-pFastBacHTb杆粒DNA的鉴定第58页
     ·表达蛋白的SDS-PAGE检测第58-59页
   ·小结与讨论第59-60页
第六章 全文结论第60-61页
参考文献第61-67页
附录第67-72页
致谢第72-73页
作者简历第73页

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