摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-14页 |
第一章 绪论 | 第14-27页 |
·小菜蛾概况 | 第14-15页 |
·小菜蛾的抗药性研究进展 | 第15-16页 |
·小菜蛾抗药性发生现状 | 第15页 |
·小菜蛾抗药性适合度研究 | 第15-16页 |
·Bt毒素的研究进展 | 第16-18页 |
·Bt毒素 | 第16-17页 |
·Bt毒素的分类 | 第17页 |
·Bt毒素的作用机理 | 第17-18页 |
·昆虫对Bt抗性研究概况 | 第18-24页 |
·昆虫对Bt的抗性现状 | 第18-19页 |
·昆虫对Bt的抗性机制 | 第19-20页 |
·Bt毒素受体的研究进展 | 第20-24页 |
·昆虫杆状病毒表达系统的研究 | 第24-26页 |
·昆虫杆状病毒表达系统 | 第24页 |
·杆状病毒(Baculovirus) | 第24页 |
·昆虫杆状病毒表达系统的发展及其优点 | 第24-25页 |
·昆虫杆状病表达系统的影响因素 | 第25-26页 |
·研究目的和意义 | 第26-27页 |
第二章 小菜蛾的室内饲养及汰选 | 第27-34页 |
·实验材料 | 第27-28页 |
·供试昆虫 | 第27页 |
·供试蔬菜 | 第27页 |
·供试药剂 | 第27-28页 |
·主要仪器和材料 | 第28页 |
·实验方法 | 第28-29页 |
·小菜蛾的饲养 | 第28页 |
·小菜蛾的室内汰选 | 第28页 |
·小菜蛾的生物测定 | 第28-29页 |
·小菜蛾抗敏互交及蛹4℃处理对产卵量的影响 | 第29页 |
·小菜蛾卵的尺寸随产卵时间的变化 | 第29页 |
·数据处理 | 第29页 |
·结果与分析 | 第29-32页 |
·Cry1Ac毒素对小菜蛾的抗性汰选 | 第29-30页 |
·4℃处理的蛹对产卵量的影响 | 第30页 |
·抗性小菜蛾Cry1AcR与敏感小菜蛾SS杂交对产卵量的影响 | 第30-31页 |
·小菜蛾卵的尺寸随产卵时间的变化 | 第31-32页 |
·小结与讨论 | 第32-34页 |
第三章 抗Bt毒素Cry1Ac小菜蛾适合度研究 | 第34-40页 |
·实验材料 | 第34页 |
·供试昆虫 | 第34页 |
·仪器和材料 | 第34页 |
·实验方法 | 第34-35页 |
·成虫繁殖力观察 | 第34-35页 |
·卵期观察 | 第35页 |
·幼虫历期观察 | 第35页 |
·蛹期观察 | 第35页 |
·成虫寿命观察 | 第35页 |
·抗性和敏感小菜蛾种群的生命表组建 | 第35页 |
·结果与分析 | 第35-39页 |
·小菜蛾抗性、敏感种群的生物学特性 | 第35-36页 |
·小菜蛾抗性、敏感种群生命表 | 第36-38页 |
·小菜蛾抗性、敏感种群生命参数和相对适合度 | 第38-39页 |
·小结与讨论 | 第39-40页 |
第四章 小菜蛾抗性和敏感种群类钙粘蛋白的克隆及序列分析 | 第40-54页 |
·实验材料 | 第40-41页 |
·供试小菜蛾 | 第40页 |
·载体与菌株 | 第40页 |
·主要试剂 | 第40-41页 |
·主要仪器 | 第41页 |
·试验方法 | 第41-44页 |
·小菜蛾SS、Cry1AcR 的中肠总RNA提取 | 第41页 |
·合成cDNA | 第41页 |
·小菜蛾SS、Cry1AcR的类钙粘蛋白基因(CAD) PCR | 第41-42页 |
·CAD DNA 的纯化回收 | 第42页 |
·CAD 的连接 | 第42页 |
·转化与细菌培养 | 第42页 |
·提取质粒DNA | 第42-43页 |
·质粒DNA 的检测 | 第43页 |
·测序以及CAD 序列分析 | 第43-44页 |
·结果与分析 | 第44-52页 |
·小菜蛾SS、Cry1AcR的中肠总RNA提取 | 第44页 |
·合成的cDNA 的引物检测 | 第44-45页 |
·小菜蛾SS、Cry1Ac 的CAD的PCR扩增 | 第45页 |
·CAD 的质粒酶切及PCR 检测 | 第45-46页 |
·小菜蛾CAD 序列结果分析 | 第46-52页 |
·小结与讨论 | 第52-54页 |
第五章 小菜蛾类钙粘蛋白的表达 | 第54-60页 |
·实验材料 | 第54-55页 |
·材料 | 第54页 |
·试剂 | 第54页 |
·仪器 | 第54-55页 |
·实验方法 | 第55-57页 |
·双酶切目的质粒(pCR-XL-TOPO /CAD)和载体质粒(pFastBacHTb) | 第55页 |
·目的片段的胶回收 | 第55页 |
·目的基因与表达载体的连接 | 第55页 |
·将连接产物转化至TOP10 | 第55页 |
·质粒DNA 的提取 | 第55-56页 |
·双酶切及PCR 检测 | 第56页 |
·转化至感受态细胞 DH10Bac | 第56页 |
·提取杆粒Bac/ CAD-pFastBacHTb | 第56页 |
·杆粒的检测 | 第56页 |
·转染与蛋白表达 | 第56-57页 |
·重组蛋白的SDS-PAGE检测 | 第57页 |
·实验结果 | 第57-59页 |
·CAD-pFastBacHTb质粒检测 | 第57-58页 |
·Bac/ CAD-pFastBacHTb杆粒DNA的鉴定 | 第58页 |
·表达蛋白的SDS-PAGE检测 | 第58-59页 |
·小结与讨论 | 第59-60页 |
第六章 全文结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-67页 |
附录 | 第67-72页 |
致谢 | 第72-73页 |
作者简历 | 第73页 |