| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 文献综述 | 第10-21页 |
| 1.1 玉米转基因的研究现状 | 第10-14页 |
| 1.1.1 玉米遗传转化的受体系统 | 第10-11页 |
| 1.1.2 玉米遗传转化的方法 | 第11-14页 |
| 1.2 草甘膦毒性机理与研究进展 | 第14-16页 |
| 1.2.1 草甘膦毒性机理 | 第14页 |
| 1.2.2 抗草甘膦转基因玉米研究进展 | 第14-15页 |
| 1.2.3 epsps基因 | 第15-16页 |
| 1.3 转基因植株的PCR检测技术 | 第16-19页 |
| 1.3.1 定量PCR技术 | 第16页 |
| 1.3.2 Southern杂交技术 | 第16-17页 |
| 1.3.3 Northern杂交技术 | 第17页 |
| 1.3.4 染色体步移技术研究 | 第17-19页 |
| 1.4 研究的目的及意义 | 第19-21页 |
| 2 实验材料与方法 | 第21-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-23页 |
| 2.1.1 玉米材料 | 第21页 |
| 2.1.2 菌株、质粒 | 第21页 |
| 2.1.3 酶、试剂和药品 | 第21-22页 |
| 2.1.4 培养基 | 第22-23页 |
| 2.2 农杆菌浸染法转化玉米幼胚 | 第23-30页 |
| 2.2.1 植物表达载体转化农杆菌 | 第23-26页 |
| 2.2.2 农杆菌介导玉米幼胚的转化 | 第26-29页 |
| 2.2.3 转基因植株的分子检测 | 第29-30页 |
| 2.4 T-DNA侧翼序列的分离 | 第30-36页 |
| 2.4.1 转基因株系的田间筛选、检测 | 第30页 |
| 2.4.2 侧翼序列的扩增 | 第30-35页 |
| 2.4.3 扩增序列的验证 | 第35-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-49页 |
| 3.1 表达载体菌液检测 | 第36-37页 |
| 3.2 草甘膦筛选浓度的确定 | 第37-39页 |
| 3.2.1 草甘膦除草剂对幼胚筛选浓度的确定 | 第37-38页 |
| 3.2.2 缓适期草甘膦除草剂对幼胚筛选浓度的确定 | 第38-39页 |
| 3.3 草甘膦除草剂抗性愈伤分化的影响 | 第39-40页 |
| 3.4 光照强度对抗性愈伤分化的影响 | 第40-41页 |
| 3.5 再生植株的检测 | 第41-42页 |
| 3.6 T-DNA侧翼序列的分离 | 第42-47页 |
| 3.6.1 转基因株系的田间筛选、鉴定 | 第42-45页 |
| 3.6.2 TAIL-PCR扩增T-DNA侧翼序列 | 第45-47页 |
| 3.7 扩增序列同玉米基因组比对分析 | 第47页 |
| 3.8 插入位点的验证 | 第47-49页 |
| 4 讨论 | 第49-56页 |
| 4.1 草甘膦对幼胚筛选浓度的确定 | 第49-51页 |
| 4.2 草甘膦除草剂对愈伤分化的影响 | 第51页 |
| 4.3 光照强度对抗性愈伤分化的影响 | 第51-53页 |
| 4.4 使用TAIL-PCR扩增T-DNA侧翼序列 | 第53页 |
| 4.5 插入位点分析 | 第53-56页 |
| 参考文献 | 第56-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
