摘要 | 第2-3页 |
abstract | 第3页 |
引言 | 第6-7页 |
材料和方法 | 第7-14页 |
1 实验材料 | 第7-8页 |
1.1 实验细胞 | 第7页 |
1.2 实验试剂 | 第7页 |
1.3 实验仪器 | 第7-8页 |
2 细胞培养 | 第8-9页 |
2.1 兔软骨细胞的分离与培养 | 第8页 |
2.2 软骨细胞鉴定 | 第8页 |
2.3 机械牵张力加载细胞模型建立 | 第8-9页 |
3 目的基因检测 | 第9-11页 |
3.1 提取各组细胞总RNA | 第9页 |
3.2 反转录合成cDNA | 第9-10页 |
3.3 RT-PCR反应 | 第10-11页 |
4 Western Blot检测软骨细胞中caspase-12蛋白表达量 | 第11-13页 |
4.1 提取各组细胞蛋白 | 第11页 |
4.2 制备SDS-PAGE凝胶 | 第11-12页 |
4.3 上样和电泳 | 第12页 |
4.4 转膜及检测 | 第12-13页 |
5 ROS含量检测 | 第13页 |
6 细胞凋亡检测 | 第13页 |
7 统计学分析 | 第13-14页 |
实验结果 | 第14-21页 |
1 正常软骨细胞形态学观察 | 第14-16页 |
2 Ⅱ型胶原免疫组化染色鉴定软骨细胞 | 第16页 |
3 受力后软骨细胞在光镜下的形态学改变 | 第16-17页 |
4 Bax、Bcl-2 和caspase-12 基因相对表达量检测结果 | 第17-19页 |
5 Caspase-12 蛋白表达检测情况 | 第19页 |
6 ROS含量检测结果 | 第19页 |
7 软骨细胞凋亡率检测情况 | 第19-21页 |
讨论 | 第21-23页 |
结论 | 第23-24页 |
参考文献 | 第24-26页 |
综述 | 第26-40页 |
综述参考文献 | 第34-40页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第40-41页 |
致谢 | 第41-42页 |