| 个人简历 | 第3-10页 |
| 本文主要英文缩略词索引 | 第10-12页 |
| 摘要 | 第12-16页 |
| ABSTRACT | 第16-20页 |
| 前言 | 第21-25页 |
| 第一部分 黄精多糖对去卵巢大鼠骨质疏松模型中miRNAs表达的影响 | 第25-41页 |
| 1 实验材料 | 第26-28页 |
| 1.1 实验动物 | 第26-27页 |
| 1.2 时间及地点 | 第27页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第27页 |
| 1.4 药品与试剂 | 第27-28页 |
| 1.5 主要器械与耗材 | 第28页 |
| 2 实验方法 | 第28-29页 |
| 2.1 实验分组与给药 | 第28页 |
| 2.2 去卵巢骨质疏松大鼠模型的建立 | 第28-29页 |
| 3 观察指标 | 第29-32页 |
| 3.1 体重变化情况 | 第29页 |
| 3.2 全身骨密度测量 | 第29页 |
| 3.3 骨生化代谢指标检测 | 第29-30页 |
| 3.3.1 血清样品采集 | 第29页 |
| 3.3.2 血清骨钙素（OC）测定 | 第29页 |
| 3.3.3 血清抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）测定 | 第29-30页 |
| 3.3.4 血清碱性磷酸酶（ALP）测定 | 第30页 |
| 3.3.5 血清钙测定 | 第30页 |
| 3.3.6 血清无机磷测定 | 第30页 |
| 3.4 micro-CT法观察大鼠骨微结构 | 第30-31页 |
| 3.5 micro RNA芯片筛选 | 第31页 |
| 3.6 统计学分析 | 第31-32页 |
| 4 结果 | 第32-36页 |
| 4.1 大鼠体重变化情况 | 第32页 |
| 4.2 大鼠全身骨密度测量 | 第32-33页 |
| 4.3 大鼠骨代谢生化指标检测 | 第33-34页 |
| 4.4 micro-CT法观察大鼠骨微结构 | 第34页 |
| 4.5 microRNA 芯片筛查结果 | 第34-36页 |
| 讨论 | 第36-40页 |
| 1 动物模型评价 | 第36页 |
| 2 黄精多糖对去卵巢骨质疏松大鼠的影响 | 第36-40页 |
| 2.1 黄精多糖对去卵巢骨质疏松大鼠体重的影响 | 第36-37页 |
| 2.2 黄精多糖对去卵巢骨质疏松大鼠骨密度的影响 | 第37页 |
| 2.3 黄精多糖对去卵巢骨质疏松大鼠骨代谢生化指标的影响 | 第37-38页 |
| 2.4 黄精多糖对去卵巢骨质疏松大鼠骨微结构的影响 | 第38页 |
| 2.5 黄精多糖对去卵巢骨质疏松大鼠microRNAs芯片筛查的影响 | 第38-40页 |
| 结论 | 第40-41页 |
| 第二部分 黄精多糖对骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化过程中microRNA表达谱的研究 | 第41-57页 |
| 1 材料 | 第42-44页 |
| 1.1 细胞株 | 第42页 |
| 1.2 主要仪器设备 | 第42页 |
| 1.3 药品与试剂 | 第42-43页 |
| 1.4 主要耗材 | 第43-44页 |
| 1.5 主要试剂配制 | 第44页 |
| 2 方法 | 第44-49页 |
| 2.1 大鼠骨髓间充质干细胞的培养 | 第44-45页 |
| 2.1.1 大鼠骨髓间充质干细胞的复苏和培养 | 第44-45页 |
| 2.1.2 大鼠骨髓间充质干细胞的传代 | 第45页 |
| 2.1.3 大鼠骨髓间充质干细胞的冻存 | 第45页 |
| 2.2 实验分组 | 第45-46页 |
| 2.3 MTT法检测黄精多糖对大鼠骨髓间充质干细胞增殖的影响 | 第46页 |
| 2.4 细胞碱性磷酸酶染色观察 | 第46页 |
| 2.5 细胞茜素红染色观察 | 第46-47页 |
| 2.6 实时荧光定量PCR检测 | 第47-48页 |
| 2.6.1 细胞总RNA提取 | 第47页 |
| 2.6.2 细胞总RNA逆转录为cDNA | 第47-48页 |
| 2.6.3 RT-PCR检测mRNA表达情况 | 第48页 |
| 2.7 miRNA芯片筛查 | 第48页 |
| 2.8 统计学分析 | 第48-49页 |
| 3 结果 | 第49-54页 |
| 3.1 大鼠骨髓间充质干细胞生长状况、形态学观察和质检报告 | 第49页 |
| 3.2 黄精多糖对大鼠骨髓间充质干细胞增殖的作用 | 第49-50页 |
| 3.3 细胞碱性磷酸酶染色结果 | 第50页 |
| 3.4 细胞茜素红染色结果 | 第50-51页 |
| 3.5 黄精多糖对大鼠骨髓间充质干细胞定向分化为成骨细胞相关基因mRNA表达的影响 | 第51-52页 |
| 3.6 黄精多糖对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化中miRNAs芯片筛查的影响 | 第52-54页 |
| 讨论 | 第54-56页 |
| 结论 | 第56-57页 |
| 第三部分 黄精多糖对大鼠骨髓源性巨噬细胞破骨分化过程中microRNA表达谱的研究 | 第57-69页 |
| 1 材料 | 第58-60页 |
| 1.1 主要仪器设备 | 第58-59页 |
| 1.2 药品与试剂 | 第59页 |
| 1.3 主要耗材 | 第59-60页 |
| 1.4 实验动物 | 第60页 |
| 1.5 主要试剂配制 | 第60页 |
| 2 方法 | 第60-62页 |
| 2.1 大鼠骨髓源性巨噬细胞的原代提取 | 第60-61页 |
| 2.2 实验分组 | 第61页 |
| 2.3 破骨细胞TRAP染色 | 第61页 |
| 2.4 总RNA提取 | 第61页 |
| 2.5 miRNA芯片筛查 | 第61-62页 |
| 2.6 统计学分析 | 第62页 |
| 3 结果 | 第62-66页 |
| 3.1 大鼠BMMs生长状况和TRAP染色观察 | 第62-63页 |
| 3.2 黄精多糖对大鼠BMMs细胞破骨分化中miRNAs芯片筛查的影响 | 第63-66页 |
| 讨论 | 第66-68页 |
| 结论 | 第68-69页 |
| 第四部分 miR-1224 调控破骨细胞分化的机制研究 | 第69-79页 |
| 1 材料 | 第71-73页 |
| 1.1 主要仪器设备 | 第71页 |
| 1.2 药品与试剂 | 第71-72页 |
| 1.3 主要耗材 | 第72-73页 |
| 1.4 主要试剂的配制 | 第73页 |
| 2 方法 | 第73-74页 |
| 2.1 大鼠骨髓源性单核巨噬细胞培养及诱导 | 第73页 |
| 2.2 实验分组 | 第73页 |
| 2.3 细胞总蛋白的提取 | 第73-74页 |
| 2.4 Western-blot法检测蛋白表达量 | 第74页 |
| 2.5 统计学分析 | 第74页 |
| 3 结果 | 第74-76页 |
| 3.1 miR-1224 靶基因的预测 | 第74-75页 |
| 3.2 Limd1基于Hippo信号通路对破骨细胞分化的影响 | 第75-76页 |
| 讨论 | 第76-78页 |
| 结论 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-83页 |
| 文献综述 | 第83-91页 |
| 参考文献 | 第89-91页 |
| 致谢 | 第91-92页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第92页 |
