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拟南芥基因RTP1和RTP2负调控植物对寄生疫霉菌的抗性

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-8页
第一章 文献综述第12-32页
    1.1 植物病原卵菌第12-17页
        1.1.1 卵菌病害第12-14页
        1.1.2 卵菌与真菌的区别第14-15页
        1.1.3 卵菌研究概况第15-17页
    1.2 植物防御系统第17-22页
        1.2.1 组成型抗性第17-18页
        1.2.2 诱导抗病性第18-22页
    1.3 植物激素在抗病反应中的作用第22-26页
        1.3.1 水杨酸信号通路第22-24页
        1.3.2 茉莉酸信号通路第24页
        1.3.3 一氧化氮第24-25页
        1.3.4 其他激素第25-26页
    1.4 植物-病原互作体系第26-30页
        1.4.1 植物-病毒亲和互作第27页
        1.4.2 植物-细菌亲和互作第27-28页
        1.4.3 植物-真菌亲和互作第28-29页
        1.4.4 拟南芥-卵菌亲和互作第29-30页
    1.5 研究目的和意义第30-32页
第二章 RTP1负调控拟南芥对寄生疫霉菌的抗性第32-62页
    2.1 试验材料第32-33页
        2.1.1 植物材料第32页
        2.1.2 菌株材料第32页
        2.1.3 质粒载体第32-33页
        2.1.4 试剂与仪器第33页
    2.2 试验方法第33-40页
        2.2.1 拟南芥培养第33页
        2.2.2 植物表达载体构建第33-35页
        2.2.3 农杆菌转化第35-36页
        2.2.4 拟南芥转化及筛选第36页
        2.2.5 拟南芥基因组DNA的提取第36页
        2.2.6 拟南芥叶片RNA的提取第36-37页
        2.2.7 反转录PCR及实时定量PCR第37页
        2.2.8 Western blot检测转化子中蛋白表达第37-38页
        2.2.9 Northern blot检测转化子中siRNA的表达第38页
        2.2.10 病原菌培养及接种方法第38-40页
        2.2.11 组织染色第40页
        2.2.12 植物瞬时表达第40页
    2.3 结果与分析第40-58页
        2.3.1 rtp1突变体的鉴定第40-43页
        2.3.2 rtp1-1对寄生疫霉菌根部侵染抗性分析第43-44页
        2.3.3 RTP1基因表达时空特异性第44-45页
        2.3.4 RTP1对寄生疫霉菌侵染的响应第45页
        2.3.5 RTP1编码内质网定位的蛋白第45-47页
        2.3.6 RTP1互补、过表达转化子的筛选及鉴定第47-48页
        2.3.7 RTP1基因沉默转化子的筛选及鉴定第48页
        2.3.8 RTP1负调控植物对寄生疫霉菌的抗性第48-49页
        2.3.9 rtp1-1以局部的细胞死亡抑制疫霉菌侵染第49-51页
        2.3.10 rtp1-1植物中活性氧水平分析第51-52页
        2.3.11 rtp1-1受疫霉菌侵染后PR1反应更快第52-53页
        2.3.12 rtp1-1对丁香假单胞菌抗性增强第53-56页
        2.3.13 rtp1-1对拟南芥白粉菌的抗性增强第56-57页
        2.3.14 rtp1-1对番茄灰霉病菌的抗性测试第57-58页
    2.4 讨论第58-62页
        2.4.1 RTP1属于MtN21家族成员第58-59页
        2.4.2 rtp1-1表现了对活体寄生型病原菌的广谱抗性第59-60页
        2.4.3 RTP1负调控活性氧迸发和细胞坏死第60-62页
第三章 RTP2参与寄生疫霉菌抗性调控第62-84页
    3.1 试验材料第62页
        3.1.1 植物材料第62页
        3.1.2 菌株材料第62页
        3.1.3 质粒载体第62页
        3.1.4 试剂与仪器第62页
    3.2 试验方法第62-66页
        3.2.1 植物培养与接种第62页
        3.2.2 Southern杂交第62-63页
        3.2.3 TAIL-PCR第63页
        3.2.4 植物表达载体构建第63-64页
        3.2.5 农杆菌转化第64页
        3.2.6 拟南芥转化及转化子鉴定第64页
        3.2.7 氮源处理第64-65页
        3.2.8 拟南芥RNA提取第65页
        3.2.9 反转录PCR及实时定量PCR第65页
        3.2.10 植物组织染色第65页
        3.2.11 蛋白定位研究第65-66页
    3.3 结果与分析第66-80页
        3.3.1 rtp2突变体的鉴定第66-67页
        3.3.2 rtp2失活基因的鉴定第67-69页
        3.3.3 RTP2编码一个细胞膜蛋白第69-70页
        3.3.4 RTP2基因表达模式第70页
        3.3.5 T-DNA插入突变体的鉴定第70-72页
        3.3.6 RTP2转基因植物的筛选与鉴定第72-73页
        3.3.7 rtp2呈现对丁香假单胞菌的抗性第73-75页
        3.3.8 rtp2对番茄灰霉菌的反应第75-76页
        3.3.9 氮源缺乏影响RTP2表达第76-79页
        3.3.10 一氧化氮参与寄生疫霉菌抗性反应第79-80页
    3.4 讨论第80-84页
第四章 结论与展望第84-86页
    4.1 结论第84页
    4.2 创新点第84-85页
    4.3 研究展望第85-86页
参考文献第86-100页
致谢第100-102页
作者简介第102页

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