摘要 | 第4-8页 |
Abstract | 第8-12页 |
目录 | 第13-15页 |
1 引言 | 第15-17页 |
2 材料和方法 | 第17-33页 |
2.1 材料 | 第17-20页 |
2.1.1 细胞系来源 | 第17页 |
2.1.2 主要试剂 | 第17-18页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第18-19页 |
2.1.4 常用试剂配制 | 第19-20页 |
2.2 实验方法 | 第20-33页 |
2.2.1 人骨肉瘤细胞系(MG63)的培养 | 第20-22页 |
2.2.2 MTT检测MG63细胞的增殖活力 | 第22-23页 |
2.2.3 双荧光标记流式细胞术检测DAI对MG63细胞凋亡的影响 | 第23-24页 |
2.2.4 TUNEL法检测DAI对MG63细胞凋亡的影响 | 第24-25页 |
2.2.5 实时荧光定量PCR检测DAI对MG63细胞相关基因的表达的影响 | 第25-28页 |
2.2.6 DAI干预骨肉瘤MG63细胞对碱性磷酸酶(ALP)活性的影响 | 第28-29页 |
2.2.7 ELISA法检测DAI对MG63细胞Ⅰ型胶原蛋白表达量的影响 | 第29-30页 |
2.2.8 茜素红染色法观察DAI干预MG63细胞后的钙盐沉积现象 | 第30页 |
2.2.9 划痕实验检测DAI对MG63细胞迁移的影响 | 第30-31页 |
2.2.10 Transwell实验检测DAI对MG63细胞侵袭作用的影响 | 第31页 |
2.2.11 免疫细胞化学(SP)法检测DAI对MG63细胞PTEN、Survivin和MMP-9蛋白表达的影响 | 第31-32页 |
2.2.12 统计学分析 | 第32-33页 |
3 实验结果 | 第33-52页 |
3.1 骨肉瘤细胞MG63的培养 | 第33-34页 |
3.1.1 形态学观察 | 第33页 |
3.1.2 生长曲线描记 | 第33-34页 |
3.2 MTT检测DAI对骨肉瘤细胞MG63增殖活力的影响 | 第34-35页 |
3.3 双荧光标记流式细胞术检测骨肉瘤细胞MG63凋亡情况的结果 | 第35-37页 |
3.4 Tunel检测DAI对骨肉瘤细胞MG63凋亡的影响 | 第37-38页 |
3.5 qPCR检测DAI对MG63细胞Runx2和PPARγ基因表达的影响 | 第38-39页 |
3.5.1 RNA的纯度检测 | 第38页 |
3.5.2 DAI干预骨肉瘤MG63细胞48h后Runx2和PPARγ相对表达量的变化 | 第38-39页 |
3.6 细胞内碱性磷酸酶(ALP)含量的测定结果 | 第39-41页 |
3.7 DAI干预细胞MG63后细胞分泌Ⅰ型胶原蛋白含量测定结果 | 第41-42页 |
3.8 DAI干预细胞MG63细胞后钙盐沉积结果 | 第42-43页 |
3.9 DAI干预细胞MG63细胞后划痕实验的结果 | 第43-46页 |
3.10 Transwell侵袭实验检测DAI对MG63细胞侵袭情况的影响 | 第46-47页 |
3.11 免疫细胞化学检测DAI对MG63细胞迁移、凋亡相关基因MMP-9、PTEN和Survivin蛋白表达的影响 | 第47-52页 |
4 讨论 | 第52-59页 |
4.1 DAI抑制人骨肉瘤MG63细胞的增殖并诱导凋亡 | 第53-54页 |
4.2 低浓度DAI对人骨肉瘤MG63细胞的诱导分化作用 | 第54-56页 |
4.3 DAI抑制人骨肉瘤MG63细胞侵袭迁移及其分子机制 | 第56-59页 |
5 结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-64页 |
综述 | 第64-80页 |
一、大豆异黄酮的功能及主要作用机制 | 第64-68页 |
二、大豆异黄酮的抗肿瘤作用 | 第68-74页 |
三、问题与展望 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-80页 |
中英文缩略词表 | 第80-81页 |
致谢 | 第81-82页 |
个人简历 | 第82页 |