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植物雌激素大豆苷元对人骨肉瘤MG63细胞凋亡、分化和生物学性状的影响

摘要第4-8页
Abstract第8-12页
目录第13-15页
1 引言第15-17页
2 材料和方法第17-33页
    2.1 材料第17-20页
        2.1.1 细胞系来源第17页
        2.1.2 主要试剂第17-18页
        2.1.3 主要仪器设备第18-19页
        2.1.4 常用试剂配制第19-20页
    2.2 实验方法第20-33页
        2.2.1 人骨肉瘤细胞系(MG63)的培养第20-22页
        2.2.2 MTT检测MG63细胞的增殖活力第22-23页
        2.2.3 双荧光标记流式细胞术检测DAI对MG63细胞凋亡的影响第23-24页
        2.2.4 TUNEL法检测DAI对MG63细胞凋亡的影响第24-25页
        2.2.5 实时荧光定量PCR检测DAI对MG63细胞相关基因的表达的影响第25-28页
        2.2.6 DAI干预骨肉瘤MG63细胞对碱性磷酸酶(ALP)活性的影响第28-29页
        2.2.7 ELISA法检测DAI对MG63细胞Ⅰ型胶原蛋白表达量的影响第29-30页
        2.2.8 茜素红染色法观察DAI干预MG63细胞后的钙盐沉积现象第30页
        2.2.9 划痕实验检测DAI对MG63细胞迁移的影响第30-31页
        2.2.10 Transwell实验检测DAI对MG63细胞侵袭作用的影响第31页
        2.2.11 免疫细胞化学(SP)法检测DAI对MG63细胞PTEN、Survivin和MMP-9蛋白表达的影响第31-32页
        2.2.12 统计学分析第32-33页
3 实验结果第33-52页
    3.1 骨肉瘤细胞MG63的培养第33-34页
        3.1.1 形态学观察第33页
        3.1.2 生长曲线描记第33-34页
    3.2 MTT检测DAI对骨肉瘤细胞MG63增殖活力的影响第34-35页
    3.3 双荧光标记流式细胞术检测骨肉瘤细胞MG63凋亡情况的结果第35-37页
    3.4 Tunel检测DAI对骨肉瘤细胞MG63凋亡的影响第37-38页
    3.5 qPCR检测DAI对MG63细胞Runx2和PPARγ基因表达的影响第38-39页
        3.5.1 RNA的纯度检测第38页
        3.5.2 DAI干预骨肉瘤MG63细胞48h后Runx2和PPARγ相对表达量的变化第38-39页
    3.6 细胞内碱性磷酸酶(ALP)含量的测定结果第39-41页
    3.7 DAI干预细胞MG63后细胞分泌Ⅰ型胶原蛋白含量测定结果第41-42页
    3.8 DAI干预细胞MG63细胞后钙盐沉积结果第42-43页
    3.9 DAI干预细胞MG63细胞后划痕实验的结果第43-46页
    3.10 Transwell侵袭实验检测DAI对MG63细胞侵袭情况的影响第46-47页
    3.11 免疫细胞化学检测DAI对MG63细胞迁移、凋亡相关基因MMP-9、PTEN和Survivin蛋白表达的影响第47-52页
4 讨论第52-59页
    4.1 DAI抑制人骨肉瘤MG63细胞的增殖并诱导凋亡第53-54页
    4.2 低浓度DAI对人骨肉瘤MG63细胞的诱导分化作用第54-56页
    4.3 DAI抑制人骨肉瘤MG63细胞侵袭迁移及其分子机制第56-59页
5 结论第59-60页
参考文献第60-64页
综述第64-80页
    一、大豆异黄酮的功能及主要作用机制第64-68页
    二、大豆异黄酮的抗肿瘤作用第68-74页
    三、问题与展望第74-75页
    参考文献第75-80页
中英文缩略词表第80-81页
致谢第81-82页
个人简历第82页

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