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陆地棉开花相关基因GhSPL3和GhLFY的克隆与分析

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-13页
第一章 文献综述第13-21页
   ·植物的开花调控途径第13-16页
     ·光周期途径作用机理及相关基因第13-14页
     ·春化途径作用机理及相关基因第14-15页
     ·赤霉素途径作用机理及相关基因第15页
     ·自主途径作用机理及相关基因第15-16页
   ·microRNA 对开花的调控第16-17页
     ·miR156 和转录因子 SPL 家族第16-17页
     ·miR172、miR159/139 等 microRNA 与开花调控第17页
   ·开花途径整合因子第17-18页
   ·植物的转基因技术第18-19页
   ·染色质免疫共沉淀技术第19-20页
   ·本研究的目的和意义第20-21页
第二章 GhSPL3 基因的克隆及表达分析第21-32页
   ·材料第21-22页
     ·实验材料第21页
     ·载体及菌种第21页
     ·酶与试剂第21页
     ·培养基和渗透缓冲液第21-22页
   ·方法第22-26页
     ·电子克隆第22页
     ·RNA 的提取及 cDNA 的合成第22-23页
       ·RNA 的提取第22-23页
       ·cDNA 的制备第23页
     ·基因的克隆第23-25页
     ·序列分析第25页
     ·时空表达模式分析第25-26页
     ·亚细胞定位分析第26页
   ·结果与分析第26-30页
     ·RNA 提取及 cDNA 合成第26-27页
     ·基因的克隆及进化树分析第27-28页
     ·时空表达模式第28-30页
     ·亚细胞定位结果第30页
   ·结论与讨论第30-32页
第三章 GhLFY 基因的克隆及序列分析第32-50页
   ·材料第32页
   ·方法第32-36页
     ·本地 blast第32页
     ·DNA 的提取第32页
     ·RNA 的提取及 cDNA 的合成第32页
     ·RACE 技术第32-33页
     ·基因克隆第33-34页
     ·序列分析第34页
     ·时空表达模式分析第34页
     ·亚细胞定位分析第34页
     ·表达载体的构建及拟南芥的转化第34-36页
   ·结果与分析第36-49页
     ·DNA 提取第36页
     ·RNA 提取及 cDNA 的合成第36页
     ·基因全长的获得第36-40页
     ·GhLFY 氨基酸序列与其他物种 LFY 同源基因的比较第40-41页
     ·进化树构建和分析第41-42页
     ·基因的表达模式研究第42-43页
     ·亚细胞定位结果第43页
     ·表达载体的构建第43页
     ·转基因后代分子鉴定第43-44页
     ·转化野生型拟南芥表型第44-48页
     ·转化拟南芥 lfy 突变体拟南芥表型第48-49页
   ·结论与讨论第49-50页
第四章 GhLFY 与上游转录因子 GhSOC1 的相互作用分析第50-62页
   ·材料第50页
     ·实验材料第50页
     ·试剂第50页
     ·仪器设备第50页
   ·方法第50-54页
     ·染色体步移第50-52页
     ·GhSOC1 蛋白单克隆抗体的制备路线第52页
     ·染色质免疫共沉淀第52-54页
     ·PCR 分析第54页
   ·结果与分析第54-60页
     ·GhLFY 基因上游调控序列的克隆及分析第54-56页
     ·GhSOC1 与 GhLFY 表达模式比较第56-57页
     ·GhSOC1 蛋白抗体及检测结果第57-59页
     ·PCR 结果分析第59-60页
   ·结论与讨论第60-62页
第五章 展望第62-63页
参考文献第63-68页
附录第68-74页
英文缩略表第74-75页
致谢第75-76页
作者简介第76页

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