| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 前言 | 第9-20页 |
| 1 SOD研究进展 | 第9-13页 |
| ·SOD的发现与功能 | 第9-10页 |
| ·SOD的种类 | 第10页 |
| ·SOD的分布 | 第10页 |
| ·微生物SOD的分布 | 第10-11页 |
| ·SOD的分子结构 | 第11-12页 |
| ·SOD的高级结构 | 第12页 |
| ·SOD的应用 | 第12-13页 |
| 2 荧光分析法在蛋白质研究中的应用 | 第13-17页 |
| ·荧光分析法 | 第14页 |
| ·荧光光谱的测量原理 | 第14-15页 |
| ·荧光的激发光谱和发射光谱 | 第15页 |
| ·荧光强度与溶液浓度的关系 | 第15-16页 |
| ·蛋白质的内源荧光 | 第16-17页 |
| ·蛋白质的外源荧光 | 第17页 |
| ·利用蛋白质的荧光发射光谱研究蛋白质分子构象 | 第17页 |
| 3 本研究的立题依据与研究意义 | 第17-19页 |
| 课题总技术路线 | 第19-20页 |
| 第一章 枯草芽孢杆菌ATCC 9372超氧化物歧化酶基因原核表达载体的构建 | 第20-35页 |
| 1 材料与方法 | 第20-28页 |
| ·菌株 | 第20页 |
| ·质粒 | 第20-21页 |
| ·主要试剂及溶液 | 第21-22页 |
| ·主要仪器 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-28页 |
| 2 实验结果与分析 | 第28-33页 |
| ·Bacillus subtilis ATCC 9372基因组提取结果 | 第28-29页 |
| ·SOD基因的PCR扩增结果 | 第29-30页 |
| ·pET28a-SOD重组质粒的鉴定 | 第30页 |
| ·SOD基因的测序结果与分析 | 第30-33页 |
| 3 小结与讨论 | 第33-35页 |
| 第二章 超氧化物歧化酶融合蛋白的表达及纯化 | 第35-46页 |
| 1 材料与方法 | 第35-41页 |
| ·菌株 | 第35页 |
| ·质粒 | 第35页 |
| ·主要试剂及配制 | 第35-37页 |
| ·主要仪器 | 第37-38页 |
| ·实验方法 | 第38-41页 |
| 2. 实验结果与分析 | 第41-44页 |
| ·SOD融合蛋白的诱导表达结果 | 第41-42页 |
| ·SOD融合蛋白的纯化结果 | 第42-44页 |
| ·SOD融合蛋白类型的鉴定 | 第44页 |
| 3 小结与讨论 | 第44-46页 |
| 第三章 超氧化物歧化酶融合蛋白的性质研究 | 第46-61页 |
| 1 材料与方法 | 第46-51页 |
| ·SOD融合蛋白 | 第46页 |
| ·主要试剂及配制 | 第46-48页 |
| ·主要仪器 | 第48页 |
| ·实验方法 | 第48-51页 |
| 2 实验结果与分析 | 第51-58页 |
| ·SOD酶学性质研究 | 第51-53页 |
| ·荧光光谱分析SOD的分子构象变化 | 第53-58页 |
| 3 小结与讨论 | 第58-61页 |
| 第四章 Glu167对酶活与结构稳定性的贡献 | 第61-74页 |
| 1 材料与方法 | 第61-65页 |
| ·pET28a-SOD重组质粒与Mn-SOD融合蛋白 | 第61页 |
| ·主要试剂及配制 | 第61页 |
| ·主要仪器 | 第61页 |
| ·实验方法 | 第61-65页 |
| 2 实验结果与分析 | 第65-71页 |
| ·SOD[E167A]基因的合成与pET28a-SOD[E167A]重组质粒的鉴定 | 第65-67页 |
| ·SOD[E167A]融合蛋白的表达和纯化 | 第67-69页 |
| ·SOD[E167A]融合蛋白的酶活与荧光光谱分析 | 第69-70页 |
| ·SOD[E167A]融合蛋白的热稳定性分析 | 第70-71页 |
| ·SOD[E167A]的结构稳定性分析 | 第71页 |
| 3 小结与讨论 | 第71-74页 |
| 结论与建议 | 第74-76页 |
| 1 结论 | 第74-75页 |
| 2 建议 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-82页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
