| 中文摘要 | 第8-9页 |
| 英文摘要 | 第9页 |
| 文献综述 | 第10-20页 |
| 1 真核样丝氨酸/苏氨酸激酶的研究进展 | 第10-14页 |
| 1.1 真核样丝氨酸/苏氨酸激酶的发现 | 第10页 |
| 1.2 eSTK的结构特征 | 第10-11页 |
| 1.3 eSTK在细菌中的调节作用 | 第11-14页 |
| 2 化脓隐秘杆菌的研究进展 | 第14-17页 |
| 2.1 化脓隐秘杆菌的危害 | 第14-15页 |
| 2.2 化脓隐秘杆菌的毒力因子 | 第15-16页 |
| 2.3 化脓隐秘杆菌的耐药性 | 第16-17页 |
| 3 同源重组技术在基因敲除中的应用 | 第17-19页 |
| 4 本研究目的与意义 | 第19-20页 |
| 第一章 化脓隐秘杆菌stk基因缺失株的构建 | 第20-38页 |
| 1.1 材料 | 第20-22页 |
| 1.1.1 菌株和质粒 | 第20-21页 |
| 1.1.2 试剂 | 第21页 |
| 1.1.3 仪器设备 | 第21-22页 |
| 1.2 方法 | 第22-32页 |
| 1.2.1 主要溶剂和培养基的配制 | 第22-24页 |
| 1.2.2 化脓隐秘杆菌临床分离菌株BM-H06-3甘油菌的复苏 | 第24页 |
| 1.2.3 化脓隐秘杆菌临床分离菌株BM-H06-3全基因组DNA的提取 | 第24-25页 |
| 1.2.4 试验中所用引物的设计和合成 | 第25页 |
| 1.2.5 stk基因上下游同源臂L、R和卡那抗性基因Kan~r的PCR扩增反应 | 第25-26页 |
| 1.2.6 stk上下游同源臂序列和卡那抗性基因序列PCR扩增产物的纯化回收 | 第26-27页 |
| 1.2.7 重组质粒pBlue::stk的构建 | 第27-30页 |
| 1.2.8 化脓隐秘杆菌stk缺失菌株△stk的构建及筛选鉴定 | 第30-32页 |
| 1.3 结果与分析 | 第32-35页 |
| 1.3.1 化脓隐秘杆菌临床分离菌株BM-H06-3全基因DNA的提取结果 | 第32页 |
| 1.3.2 stk基因上下游同源臂L、R和卡那抗性基因Kan~r的PCR扩增结果 | 第32-33页 |
| 1.3.3 重组质粒pBlue::stk的构建及鉴定结果 | 第33-34页 |
| 1.3.4 PCR扩增反应筛选疑似△stk菌株的结果 | 第34页 |
| 1.3.5 组合引物PCR扩增鉴定结果 | 第34-35页 |
| 1.4 讨论 | 第35-37页 |
| 1.4.1 关于化脓隐秘杆菌中stk基因的选定 | 第35-36页 |
| 1.4.2 stk缺失菌株构建的讨论 | 第36-37页 |
| 1.5 小结 | 第37-38页 |
| 第二章 stk基因对化脓隐秘杆菌耐药性与毒力的影响 | 第38-48页 |
| 2.1 材料 | 第38-40页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第38页 |
| 2.1.2 试剂 | 第38-39页 |
| 2.1.3 试验动物 | 第39页 |
| 2.1.4 试验中所用抗生素 | 第39页 |
| 2.1.5 仪器设备 | 第39-40页 |
| 2.2 方法 | 第40-42页 |
| 2.2.1 主要溶剂和培养基的配制 | 第40页 |
| 2.2.2 甘油菌的复苏 | 第40页 |
| 2.2.3 生长曲线的绘制 | 第40页 |
| 2.2.4 溶血活性试验 | 第40-41页 |
| 2.2.5 药物敏感性试验 | 第41页 |
| 2.2.6 小鼠存活率试验 | 第41-42页 |
| 2.3 结果与分析 | 第42-45页 |
| 2.3.1 生长曲线绘制结果 | 第42-43页 |
| 2.3.2 溶血活性的比较 | 第43页 |
| 2.3.3 药物敏感试验 | 第43-44页 |
| 2.3.4 小鼠存活率试验 | 第44-45页 |
| 2.4 讨论 | 第45-47页 |
| 2.4.1 stk缺失对化脓隐秘杆菌生长速率的影响 | 第45-46页 |
| 2.4.2 stk缺失对化脓隐秘杆菌耐药性的影响 | 第46页 |
| 2.4.3 stk缺失对化脓隐秘杆菌毒力的影响 | 第46-47页 |
| 2.5 小结 | 第47-48页 |
| 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 攻读硕士学位期间发表的文章 | 第57页 |
