| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 中英文缩写词对照表 | 第11-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-19页 |
| 1.1 结核病与结核分枝杆菌研究进展 | 第12-14页 |
| 1.1.1 结核病与结核分枝杆菌 | 第12-13页 |
| 1.1.2 结核病治疗与结核分枝杆菌耐药 | 第13-14页 |
| 1.2 大环内酯类抗生素研究进展及耐药机制 | 第14-16页 |
| 1.2.1 大环内酯类抗生素杀菌机制 | 第14-15页 |
| 1.2.2 红霉素和阿奇霉素 | 第15页 |
| 1.2.3 大环内酯类抗生素耐药性及机制 | 第15-16页 |
| 1.3 蚯蚓血红蛋白研究进展 | 第16-19页 |
| 1.3.1 蚯蚓血红蛋白的分布 | 第16-17页 |
| 1.3.2 蚯蚓血红蛋白的鉴别 | 第17-19页 |
| 第二章 耻垢分枝杆菌msmeg_6212基因敲除及其功能鉴定 | 第19-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-23页 |
| 2.1.1 实验器材 | 第20-21页 |
| 2.1.2 实验主要试剂及配制方法 | 第21-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-29页 |
| 2.2.1 耻垢分枝杆菌的培养 | 第23页 |
| 2.2.2 基因敲除 | 第23-27页 |
| 2.2.2.1 pYUB1471载体构建 | 第23页 |
| 2.2.2.2 克隆目的基因 | 第23-24页 |
| 2.2.2.3 构建重组敲除载体 | 第24-25页 |
| 2.2.2.4 噬菌体体外包装和转导 | 第25页 |
| 2.2.2.5 同源重组介导的基因敲除 | 第25页 |
| 2.2.2.6 敲除菌株的验证 | 第25-27页 |
| 2.2.3 msmeg_6212回补和过表达菌株的制备 | 第27-28页 |
| 2.2.3.1 Mycobacterium smegmatis mc~2155基因组的制备方法 | 第27页 |
| 2.2.3.2 回补和过表达载体构建 | 第27-28页 |
| 2.2.3.3 电击法转化 | 第28页 |
| 2.2.4 H_2O_2胁迫实验 | 第28页 |
| 2.2.5 生长曲线测定 | 第28页 |
| 2.2.6 红霉素/阿奇霉素致死剂量药物胁迫实验 | 第28-29页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第29-34页 |
| 2.3.1 基因敲除结果 | 第29-30页 |
| 2.3.2 生长曲线测定结果 | 第30-31页 |
| 2.3.3 H_2O_2胁迫实验 | 第31页 |
| 2.3.4 最小抑菌浓度(MIC)的测定 | 第31页 |
| 2.3.5 敲除msmeg_6212增加耻垢分枝杆菌对大环内酯类药物的抗性 | 第31-32页 |
| 2.3.6 过表达msmeg_6212增加大环内酯类药物的敏感 | 第32-34页 |
| 2.4 小结 | 第34-35页 |
| 第三章 耻垢分枝杆菌蚯蚓血红样蛋白MSMEG_6212和MSMEG_3312之间关系 | 第35-45页 |
| 3.1 实验材料 | 第35-36页 |
| 3.1.1 实验仪器 | 第35-36页 |
| 3.1.2 实验试剂及主要试剂配制方法 | 第36页 |
| 3.2 实验方法 | 第36-39页 |
| 3.2.1 药谱实验--最小抑菌浓度(MIC)的测定 | 第36-37页 |
| 3.2.2 qRT-PCR PCR观察基因表达水平 | 第37-38页 |
| 3.2.3 Unmarked菌株制备 | 第38-39页 |
| 3.3 实验结果 | 第39-44页 |
| 3.3.1 药谱筛选 | 第39-41页 |
| 3.3.2 qRT-PCR观察基因表达水平 | 第41-42页 |
| 3.3.3 蛋白系统进化分析 | 第42-44页 |
| 3.4 小结 | 第44-45页 |
| 第四章 总结及讨论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| 致谢 | 第51页 |
