致谢 | 第5-6页 |
中文摘要 | 第6-10页 |
Abstract | 第10-14页 |
缩略对照词表 | 第15-21页 |
第一部分 | 第21-52页 |
1. 研究背景 | 第21-24页 |
2. 实验目的 | 第24-25页 |
3. 实验方法和材料 | 第25-40页 |
3.1 研究对象 | 第25页 |
3.2 主要试剂 | 第25-26页 |
3.3 主要仪器设备和耗材 | 第26-28页 |
3.4 动物分组及建模 | 第28-30页 |
3.5术后取材 | 第30-31页 |
3.6 腹壁组织石蜡切片的制备 | 第31页 |
3.7 苏木素—伊红(HE)染色 | 第31页 |
3.8 免疫组化检测腹壁组织中α-SMA及TGF-β1表达 | 第31-32页 |
3.9 Western blotting检测腹壁组织中α-SMA及TGF-β1表达 | 第32-36页 |
3.10 RT-PCR检测腹壁组织中α-SMA及TGF-β1表达 | 第36-39页 |
3.11 计方法 | 第39-40页 |
4. 实验结果 | 第40-49页 |
4.1 雷帕处理组大鼠的雷帕霉素浓度 | 第40页 |
4.2 各组大鼠腹膜功能的变化 | 第40页 |
4.3 各组大鼠腹壁组织HE染色 | 第40-41页 |
4.4 各组大鼠腹壁组织免疫组化中α-SMA的表达 | 第41页 |
4.5 各组大鼠腹壁组织免疫组化中TGF-β1的表达 | 第41-42页 |
4.6 各组大鼠腹膜组织中α-SMA和TGF-β1蛋白及mRNA的表达 | 第42-49页 |
5 讨论 | 第49-51页 |
6 小结 | 第51-52页 |
第二部分 | 第52-76页 |
1.研究背景 | 第52-55页 |
2. 实验目的 | 第55-56页 |
3. 实验方法和材料 | 第56-65页 |
3.1 研究对象 | 第56页 |
3.2 主要试剂及仪器(除以下外,余同第一部分) | 第56-57页 |
3.3 腹膜间皮细胞的培养方法: | 第57-58页 |
3.4 腹膜间皮细胞的鉴定 | 第58-59页 |
3.5 细胞实验分组 | 第59页 |
3.6 细胞高糖处理及雷帕霉素干预 | 第59页 |
3.7 雷帕霉素对腹膜间皮细胞细胞毒实验 | 第59-60页 |
3.8 细胞裂解及蛋白提取 | 第60-61页 |
3.9 Western blotting检测(同第一部分) | 第61页 |
3.10 RT-PCR(基本同第一部分) | 第61-62页 |
3.11 细胞划痕试验(wound healing) | 第62-63页 |
3.12 Transwell检测 | 第63-64页 |
3.13 统计方法 | 第64-65页 |
4. 实验结果 | 第65-73页 |
4.1 细胞的鉴定结果 | 第65页 |
4.2 雷帕霉素对腹膜间皮细胞活性的影响 | 第65页 |
4.3 雷帕霉素对高糖处理后腹膜间皮细胞的α-SMA及E-cadherin蛋白水平的影响 | 第65页 |
4.4 雷帕霉素对高糖处理后腹膜间皮细胞的α-SMA、Fibronectin、Collagen Ⅰ的mRNA水平的影响 | 第65-66页 |
4.5 细胞划痕实验结果 | 第66页 |
4.6 Transwell实验结果 | 第66-73页 |
5 讨论 | 第73-75页 |
6 小结 | 第75-76页 |
第三部分 | 第76-97页 |
1.研究背景 | 第76-79页 |
2. 实验目的 | 第79-80页 |
3. 实验方法和材料 | 第80-86页 |
3.1 研究对象 | 第80页 |
3.2 主要试剂及仪器(除以下外,余同第一部分) | 第80-81页 |
3.3 细胞实验分组 | 第81页 |
3.4 细胞高糖处理及雷帕霉素干预 | 第81页 |
3.5 PuH down 实骆栓测 GTP- RhoA、GTP-Racl、GTP-Cdc4蛋白的表达 | 第81-82页 |
3.6 Western blotting检测(同第一部分) | 第82-83页 |
3.7 细胞免疫荧光检测细胞骨架的变化 | 第83-85页 |
3.8 统计方法 | 第85-86页 |
4. 实验结果 | 第86-92页 |
4.1 高糖激活PI3K/Akt/mTOR通路 | 第86页 |
4.2 雷帕霉素抑制高糖激活的RhoA、Rac1及Cdc42 | 第86页 |
4.3 雷帕霉素对高糖导致的细胞骨架改变的影响 | 第86-92页 |
5. 讨论 | 第92-96页 |
6 小结 | 第96-97页 |
结论 | 第97-98页 |
参考文献 | 第98-106页 |
综述一 Rho GTPases与细胞迁移 | 第106-120页 |
参考文献 | 第115-120页 |
综述二 CAPD相关性腹膜义生物标记物 | 第120-132页 |
参考文献 | 第126-132页 |
个人简介 | 第132-133页 |