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雷帕霉素对腹膜纤维化的抑制作用及其机制研究

致谢第5-6页
中文摘要第6-10页
Abstract第10-14页
缩略对照词表第15-21页
第一部分第21-52页
    1. 研究背景第21-24页
    2. 实验目的第24-25页
    3. 实验方法和材料第25-40页
        3.1 研究对象第25页
        3.2 主要试剂第25-26页
        3.3 主要仪器设备和耗材第26-28页
        3.4 动物分组及建模第28-30页
        3.5术后取材第30-31页
        3.6 腹壁组织石蜡切片的制备第31页
        3.7 苏木素—伊红(HE)染色第31页
        3.8 免疫组化检测腹壁组织中α-SMA及TGF-β1表达第31-32页
        3.9 Western blotting检测腹壁组织中α-SMA及TGF-β1表达第32-36页
        3.10 RT-PCR检测腹壁组织中α-SMA及TGF-β1表达第36-39页
        3.11 计方法第39-40页
    4. 实验结果第40-49页
        4.1 雷帕处理组大鼠的雷帕霉素浓度第40页
        4.2 各组大鼠腹膜功能的变化第40页
        4.3 各组大鼠腹壁组织HE染色第40-41页
        4.4 各组大鼠腹壁组织免疫组化中α-SMA的表达第41页
        4.5 各组大鼠腹壁组织免疫组化中TGF-β1的表达第41-42页
        4.6 各组大鼠腹膜组织中α-SMA和TGF-β1蛋白及mRNA的表达第42-49页
    5 讨论第49-51页
    6 小结第51-52页
第二部分第52-76页
    1.研究背景第52-55页
    2. 实验目的第55-56页
    3. 实验方法和材料第56-65页
        3.1 研究对象第56页
        3.2 主要试剂及仪器(除以下外,余同第一部分)第56-57页
        3.3 腹膜间皮细胞的培养方法:第57-58页
        3.4 腹膜间皮细胞的鉴定第58-59页
        3.5 细胞实验分组第59页
        3.6 细胞高糖处理及雷帕霉素干预第59页
        3.7 雷帕霉素对腹膜间皮细胞细胞毒实验第59-60页
        3.8 细胞裂解及蛋白提取第60-61页
        3.9 Western blotting检测(同第一部分)第61页
        3.10 RT-PCR(基本同第一部分)第61-62页
        3.11 细胞划痕试验(wound healing)第62-63页
        3.12 Transwell检测第63-64页
        3.13 统计方法第64-65页
    4. 实验结果第65-73页
        4.1 细胞的鉴定结果第65页
        4.2 雷帕霉素对腹膜间皮细胞活性的影响第65页
        4.3 雷帕霉素对高糖处理后腹膜间皮细胞的α-SMA及E-cadherin蛋白水平的影响第65页
        4.4 雷帕霉素对高糖处理后腹膜间皮细胞的α-SMA、Fibronectin、Collagen Ⅰ的mRNA水平的影响第65-66页
        4.5 细胞划痕实验结果第66页
        4.6 Transwell实验结果第66-73页
    5 讨论第73-75页
    6 小结第75-76页
第三部分第76-97页
    1.研究背景第76-79页
    2. 实验目的第79-80页
    3. 实验方法和材料第80-86页
        3.1 研究对象第80页
        3.2 主要试剂及仪器(除以下外,余同第一部分)第80-81页
        3.3 细胞实验分组第81页
        3.4 细胞高糖处理及雷帕霉素干预第81页
        3.5 PuH down 实骆栓测 GTP- RhoA、GTP-Racl、GTP-Cdc4蛋白的表达第81-82页
        3.6 Western blotting检测(同第一部分)第82-83页
        3.7 细胞免疫荧光检测细胞骨架的变化第83-85页
        3.8 统计方法第85-86页
    4. 实验结果第86-92页
        4.1 高糖激活PI3K/Akt/mTOR通路第86页
        4.2 雷帕霉素抑制高糖激活的RhoA、Rac1及Cdc42第86页
        4.3 雷帕霉素对高糖导致的细胞骨架改变的影响第86-92页
    5. 讨论第92-96页
    6 小结第96-97页
结论第97-98页
参考文献第98-106页
综述一 Rho GTPases与细胞迁移第106-120页
    参考文献第115-120页
综述二 CAPD相关性腹膜义生物标记物第120-132页
    参考文献第126-132页
个人简介第132-133页

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