摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
前言 | 第12-14页 |
1 实验材料 | 第14-17页 |
1.1 主要仪器 | 第14页 |
1.2 主要试剂 | 第14-15页 |
1.3 即用型试剂盒 | 第15页 |
1.4 实验所需细胞株 | 第15页 |
1.5 主要试剂的配制 | 第15-17页 |
2 实验方法 | 第17-41页 |
2.1 CISH重组过表达质粒的构建 | 第17-22页 |
2.2 CISH重组过表达质粒的扩增 | 第22-24页 |
2.3 CISH重组过表达质粒转染肝细胞LO2 | 第24-25页 |
2.4 细胞培养 | 第25-28页 |
2.5 CISH siRNA序列的筛选 | 第28-33页 |
2.6 CISH siRNA( | 第33-34页 |
2.7 实时荧光定量PCR检测CISH基因的表达 | 第34-38页 |
2.8 Western Blot法检测CISH蛋白的变化 | 第38-39页 |
2.9 ELISA法检测炎症因子TNF-α、IL-1β的水平 | 第39-40页 |
2.10 Western Blot法检测信号分子STAT5a的变化 | 第40-41页 |
2.11 统计学方法 | 第41页 |
3 实验结果 | 第41-53页 |
3.1 成功构建CISH重组过表达质粒 | 第41-45页 |
3.2 CISH重组过表达质粒转染肝细胞LO2后CISH基因在mRNA水平的检测 | 第45-46页 |
3.3 CISH重组过表达质粒转染肝细胞LO2后CISH基因在蛋白水平的检测 | 第46页 |
3.4 CISH siRNA( | 第46-48页 |
3.5 肝细胞LO2中CISH上、下调后肝细胞分泌炎症因子的检测 | 第48-51页 |
3.6 肝细胞LO2中CISH上、下调后信号分子STAT5a表达的检测 | 第51-53页 |
4 讨论 | 第53-55页 |
5 结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-58页 |
文献综述 | 第58-72页 |
参考文献 | 第66-72页 |
附录 | 第72-74页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第74-75页 |
致谢 | 第75页 |