| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-30页 |
| 0 引言 | 第14页 |
| 1 大片段基因组文库的发展 | 第14-22页 |
| ·第一代载体 | 第15-17页 |
| ·第二代载体 | 第17-21页 |
| ·第三代载体 | 第21-22页 |
| 2 大片段基因组文库的构建及鉴定 | 第22-26页 |
| ·高分子量(HMW)DNA的制备 | 第23页 |
| ·载体的制备 | 第23页 |
| ·HMW DNA的部分酶切 | 第23-24页 |
| ·适合大小DNA片段的选择和回收 | 第24-25页 |
| ·连接和转化 | 第25页 |
| ·阳性克隆的挑取和筛选 | 第25页 |
| ·文库的质量鉴定 | 第25-26页 |
| 3 大片段基因组文库的应用:物理图谱的构建 | 第26-28页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第28-30页 |
| 第二章 栉孔扇贝fosmid文库的构建和鉴定 | 第30-47页 |
| 第一节 栉孔扇贝fosmid文库的构建 | 第30-41页 |
| 0 引言 | 第30页 |
| 1 材料与方法 | 第30-36页 |
| ·材料 | 第30页 |
| ·试剂 | 第30-32页 |
| ·仪器 | 第32页 |
| ·方法 | 第32-36页 |
| 2 结果与分析 | 第36-40页 |
| ·高质量DNA的获得 | 第36-37页 |
| ·合适DNA片段的回收与连接 | 第37-38页 |
| ·包装和转导 | 第38-39页 |
| ·克隆的保存 | 第39页 |
| ·超级池和二级池的构建 | 第39-40页 |
| 3 讨论 | 第40-41页 |
| ·栉孔扇贝fosmid文库构建技术体系的建立 | 第40-41页 |
| 第二节 栉孔扇贝fosmid文库的质量鉴定 | 第41-47页 |
| 0 引言 | 第41页 |
| 1 材料与方法 | 第41-42页 |
| ·插入片段大小的检测 | 第41-42页 |
| ·克隆的稳定性检测 | 第42页 |
| ·微卫星与基因的PCR筛选 | 第42页 |
| 2 结果与分析 | 第42-45页 |
| ·Fosmid克隆的限制性酶切分析 | 第42-43页 |
| ·Fosmid文库覆盖率的估算 | 第43页 |
| ·Fosmid克隆的稳定性检测 | 第43页 |
| ·Fosmid文库的筛选 | 第43-45页 |
| 3 讨论 | 第45-47页 |
| ·栉孔扇贝Fosmid文库的质量鉴定 | 第45-47页 |
| 第三章 栉孔扇贝BAC文库的构建和质量鉴定 | 第47-82页 |
| 第一节 栉孔扇贝BAC文库的构建 | 第47-76页 |
| 0 引言 | 第47页 |
| 1 材料与方法 | 第47-65页 |
| ·材料 | 第47-48页 |
| ·试剂及耗材 | 第48-53页 |
| ·仪器 | 第53页 |
| ·方法 | 第53-65页 |
| 2 结果与分析 | 第65-73页 |
| ·琼脂糖包埋法高质量megabase DNA提取 | 第65-67页 |
| ·高分子量DNA部分酶切及最佳酶量的确定 | 第67-69页 |
| ·大片段DNA的二次选择和电洗脱回收 | 第69-70页 |
| ·连接和电转化 | 第70-71页 |
| ·文库的保存 | 第71-72页 |
| ·超级池和二级池的构建 | 第72-73页 |
| 3 讨论 | 第73-76页 |
| ·栉孔扇贝高分子量基因组DNA提取方法的改进 | 第73页 |
| ·高分子量基因组DNA的分离条件优化 | 第73-74页 |
| ·连接与电转化 | 第74-75页 |
| ·限制性内切酶的选择 | 第75-76页 |
| 第二节 栉孔扇贝BAC文库的质量鉴定 | 第76-82页 |
| 0 引言 | 第76页 |
| 1 材料与方法 | 第76-77页 |
| ·插入片段大小的检测 | 第76-77页 |
| ·克隆的稳定性检测 | 第77页 |
| 2 结果分析 | 第77-79页 |
| ·BAC克隆平均插入片段大小及文库覆盖率 | 第77-79页 |
| ·BAC克隆的稳定性 | 第79页 |
| 3 讨论 | 第79-82页 |
| ·栉孔扇贝BAC文库质量鉴定 | 第79-80页 |
| ·栉孔扇贝大片段基因组文库比较分析 | 第80-82页 |
| 第四章 大片段基因组文库的应用:栉孔扇贝遗传图谱与物理图谱的整合初试 | 第82-111页 |
| 第一节 栉孔扇贝遗传连锁的微卫星标记在大片段基因组文库中的筛选和鉴定 | 第82-102页 |
| 0 引言 | 第82页 |
| 1 材料与方法 | 第82-84页 |
| ·试验材料 | 第82页 |
| ·试验方法 | 第82-84页 |
| 2 结果与分析 | 第84-98页 |
| ·超级池、二级池的构建与PCR筛选系统的建立 | 第84-85页 |
| ·微卫星筛选结果 | 第85-98页 |
| 3 讨论 | 第98-102页 |
| ·实验结果对文库质量的反映 | 第98页 |
| ·遗传图谱与物理图谱的整合 | 第98-100页 |
| ·文库筛选与FISH定位 | 第100-102页 |
| 第二节 高通量的基于AFLP的遗传图谱与物理图谱整合的方法尝试 | 第102-111页 |
| 0 引言 | 第102页 |
| 1 材料与方法 | 第102-107页 |
| ·试验材料 | 第102页 |
| ·仪器 | 第102-103页 |
| ·试剂 | 第103页 |
| ·试验方法 | 第103-107页 |
| 2 实验结果 | 第107-109页 |
| 3 讨论 | 第109-111页 |
| ·以AFLP为基础的文库筛选系统 | 第109-110页 |
| ·总结 | 第110-111页 |
| 本论文创新点 | 第111-112页 |
| 参考文献 | 第112-121页 |
| 致谢 | 第121-123页 |
| 个人简历 | 第123页 |
| 发表的学术论文 | 第123-124页 |
| 获得奖励 | 第124页 |
