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半乳糖凝集素-4截短片段的表达纯化及与配体相互作用的研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
中英文对照及英文缩写词表第8-13页
第一章 前言第13-31页
    1.1 半乳糖凝集素家族(Galectins)概述第13-24页
        1.1.1 凝集素第13页
        1.1.2 半乳糖凝集素的结构与分类第13-16页
        1.1.3 半乳糖凝集素的表达与分布第16-17页
        1.1.4 半乳糖凝集素的生理功能第17-22页
        1.1.5 半乳糖凝集素:解读糖分子信息的“专业读码器”第22-24页
    1.2 半乳糖凝集素-4 的研究进展第24-29页
        1.2.1 半乳糖凝集素-4 的结构特点第24-27页
        1.2.2 半乳糖凝集素-4 与配体的亲和第27页
        1.2.3 半乳糖凝集素-4 的表达分布与生物学功能第27-29页
    1.3 选题依据和研究意义第29-31页
第二章 半乳糖凝集素-4 截短片段表达载体的构建第31-42页
    2.1 材料、试剂与仪器第31-34页
        2.1.1 实验材料第31页
        2.1.2 实验试剂及其配置第31-33页
        2.1.3 实验仪器第33-34页
    2.2 实验方法第34-38页
        2.2.1 引物设计第34页
        2.2.2 聚合酶链式反应第34-35页
        2.2.3 TA克隆半乳糖凝集素-4第35-36页
        2.2.4 目的基因与载体的限制性双酶切第36页
        2.2.5 目的基因与载体质粒的连接第36-37页
        2.2.6 制备感受态E.coli DH5α第37页
        2.2.7 转化验证第37页
        2.2.8 菌落PCR检验阳性克隆第37-38页
        2.2.9 双酶切验证重组质粒第38页
        2.2.10 测序及质粒保存第38页
    2.3 实验结果第38-41页
        2.3.1 扩增目的片段第38-39页
        2.3.2 目的基因与载体的限制性双酶切第39页
        2.3.3 菌落PCR验证阳性克隆第39-40页
        2.3.4 双酶切验证重组质粒第40-41页
        2.3.5 测序结果第41页
    2.4 讨论第41-42页
第三章 半乳糖凝集素-4 截短片段的表达纯化及稳定性活性检测第42-55页
    3.1 材料、试剂与仪器第42-46页
        3.1.1 实验材料第42页
        3.1.2 实验试剂及其配制第42-45页
        3.1.3 实验仪器第45-46页
    3.2 实验方法第46-50页
        3.2.1 初步诱导表达目的蛋白第46页
        3.2.2 大量纯化目的蛋白第46-48页
        3.2.3 半乳糖凝集素-4 诱导鸡红细胞凝集第48页
        3.2.4 差异扫描荧光法检测Galectin419-323 稳定性第48-50页
    3.3 实验结果第50-53页
        3.3.1 初步诱导表达目的蛋白第50页
        3.3.2 大量纯化目的蛋白第50-51页
        3.3.3 半乳糖凝集素-4 诱导鸡红细胞凝集第51-53页
        3.3.4 差异扫描荧光法检测Galectin419-323 稳定性第53页
    3.4 讨论第53-55页
第四章 半乳糖凝集素-4 截短片段与配体的相互作用第55-69页
    4.1 材料、试剂与仪器第55-57页
        4.1.1 实验材料第55页
        4.1.2 实验试剂及配制第55-57页
        4.1.3 实验仪器第57页
    4.2 实验方法第57-60页
        4.2.1 鸡红细胞凝集的阻抑第57页
        4.2.2 差异扫描荧光法检测半乳糖凝集素-4 的糖配体第57-58页
        4.2.3 半乳糖凝集素-4 与去唾液酸胎球蛋白的Pull-Down试验第58-59页
        4.2.4 免疫共沉淀法检测HT29细胞中Galectin419-323 的配体第59-60页
    4.3 实验结果第60-67页
        4.3.1 多糖阻抑半乳糖凝集素-4 凝集鸡血红细胞第60-61页
        4.3.2 差异扫描荧光法筛选糖配体第61-64页
        4.3.3 半乳糖凝集素-4 与去唾液酸胎球蛋白的Pull-Down试验第64-65页
        4.3.4 Galectin419-323 与HT29细胞蛋白的免疫共沉淀第65-67页
    4.4 讨论第67-69页
总结第69-70页
参考文献第70-79页
致谢第79-80页
在读期间公开发表论文及著作情况第80页

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