| 摘要 | 第6-8页 |
| abstract | 第8-9页 |
| 第一章 引言 | 第14-22页 |
| 1.1 棉铃虫简介 | 第14-15页 |
| 1.1.1 棉铃虫的发生、分布与危害 | 第14页 |
| 1.1.2 棉田棉铃虫防治用药情况 | 第14-15页 |
| 1.2 乙基多杀菌素研究进展 | 第15-18页 |
| 1.2.1 乙基多杀菌素的理化性质 | 第15-16页 |
| 1.2.2 乙基多杀菌素的作用机制 | 第16-17页 |
| 1.2.3 乙基多杀菌素国内外应用及前景 | 第17-18页 |
| 1.3 昆虫烟碱型乙酰胆碱受体研究进展 | 第18-21页 |
| 1.3.1 烟碱型乙酰胆碱受体的结构和功能 | 第18-20页 |
| 1.3.2 烟碱型乙酰胆碱受体的多样性 | 第20页 |
| 1.3.3 烟碱型乙酰胆碱受体的体外表达 | 第20-21页 |
| 1.4 研究思路 | 第21-22页 |
| 1.4.1 立题依据 | 第21页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第21-22页 |
| 第二章 nAchRs α7 亚基克隆及乙基多杀菌素毒力测定 | 第22-36页 |
| 2.1 材料和方法 | 第22-28页 |
| 2.1.1 供试昆虫 | 第22页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第22页 |
| 2.1.3 主要试剂及试剂盒 | 第22-23页 |
| 2.1.4 培养基及常用溶液 | 第23页 |
| 2.1.5 棉铃虫RNA提取 | 第23-24页 |
| 2.1.6 第一链cDNA合成 | 第24页 |
| 2.1.7 5’RACE模板cDNA合成 | 第24页 |
| 2.1.8 3’RACE模板cDNA合成 | 第24-25页 |
| 2.1.9 引物设计与合成 | 第25页 |
| 2.1.10 PCR扩增 | 第25页 |
| 2.1.11 PCR产物纯化 | 第25-26页 |
| 2.1.12 连接 | 第26页 |
| 2.1.13 转化反应 | 第26页 |
| 2.1.14 涂板 | 第26页 |
| 2.1.15 阳性克隆鉴定 | 第26-27页 |
| 2.1.16 序列测定 | 第27页 |
| 2.1.17 乙基多杀菌素毒力测定 | 第27页 |
| 2.1.18 序列分析及数据处理 | 第27-28页 |
| 2.2 结果与分析 | 第28-34页 |
| 2.2.1 棉铃虫幼虫头部RNA的提取 | 第28页 |
| 2.2.2 nAchRs α7 亚基基因全长cDNA序列的获得 | 第28-29页 |
| 2.2.3 nAchRs α7 亚基序列分析 | 第29-31页 |
| 2.2.4 进化树分析 | 第31-32页 |
| 2.2.5 昆虫nAchRs α5、α6、α7 亚基序列分析 | 第32-34页 |
| 2.2.6 毒力测定结果 | 第34页 |
| 2.3 讨论 | 第34-36页 |
| 第三章 棉铃虫nAchRs α7 亚基mRNA表达量分析 | 第36-42页 |
| 3.1 材料与方法 | 第36-39页 |
| 3.1.1 供试昆虫 | 第36页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第36页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第36页 |
| 3.1.4 引物设计 | 第36-37页 |
| 3.1.5 样品采集 | 第37页 |
| 3.1.6 不同组织RNA提取 | 第37页 |
| 3.1.7 第一链cDNA的合成 | 第37-38页 |
| 3.1.8 荧光定量PCR | 第38页 |
| 3.1.9 数据处理与作图 | 第38-39页 |
| 3.2 结果与分析 | 第39-41页 |
| 3.2.1 棉铃虫nAchRs α7 亚基基因在不同龄期的相对表达量 | 第39页 |
| 3.2.2 棉铃虫nAchRs α7 亚基基因在不同组织的相对表达量 | 第39-40页 |
| 3.2.3 棉铃虫经乙基多杀菌素处理后nAchRs α7 亚基基因的相对表达量 | 第40-41页 |
| 3.3 讨论 | 第41-42页 |
| 第四章 棉铃虫nAchRs α7 亚基RNAi研究 | 第42-48页 |
| 4.1 材料与方法 | 第43-44页 |
| 4.1.1 供试昆虫 | 第43页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第43页 |
| 4.1.3 siRNA合成 | 第43页 |
| 4.1.4 siRNA注射 | 第43页 |
| 4.1.5 qRT-PCR检测干扰效率 | 第43-44页 |
| 4.1.6 生物测定 | 第44页 |
| 4.2 结果与分析 | 第44-46页 |
| 4.2.1 干扰效率分析 | 第44-45页 |
| 4.2.2 RNAi对棉铃虫生长发育的影响 | 第45页 |
| 4.2.3 敏感度测定 | 第45-46页 |
| 4.3 讨论 | 第46-48页 |
| 第五章 nAchRs α7 亚基的异源表达与功能研究 | 第48-57页 |
| 5.1 材料与方法 | 第48-53页 |
| 5.1.1 主要试剂和试剂盒 | 第48页 |
| 5.1.2 主要仪器 | 第48页 |
| 5.1.3 相关试剂的配制 | 第48-49页 |
| 5.1.4 引物设计 | 第49-50页 |
| 5.1.5 载体构建 | 第50-51页 |
| 5.1.6 异源表达与电生理实验 | 第51-53页 |
| 5.2 结果与分析 | 第53-55页 |
| 5.3 讨论 | 第55-57页 |
| 第六章 全文总结 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 作者简历 | 第65页 |
