摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 序言 | 第9-14页 |
1.1 研究背景 | 第9-12页 |
1.1.1 剪接变异体的成因 | 第9-10页 |
1.1.2 选择性剪接与疾病 | 第10页 |
1.1.3 白细胞介素 7(IL-7) | 第10-11页 |
1.1.4 白细胞介素7剪接变异体 | 第11-12页 |
1.2 研究思路 | 第12-14页 |
第二章 剪接变异体蛋白rhIL-7δ4/5 的原核表达、纯化以及鉴定 | 第14-40页 |
2.1 前言 | 第14页 |
2.2 主要试剂材料 | 第14-23页 |
2.2.1 细菌菌种 | 第14页 |
2.2.2 质粒载体 | 第14页 |
2.2.3 分子生物学试剂 | 第14-15页 |
2.2.4 引物设计与合成 | 第15页 |
2.2.5 相关仪器 | 第15-16页 |
2.2.6 主要溶液配制 | 第16-23页 |
2.3 实验方法 | 第23-33页 |
2.3.1 感受态DH5α 及BL21的制备 | 第23-24页 |
2.3.2 重组表达质粒的构建 | 第24-26页 |
2.3.3 rhIL-7δ4/5 蛋白诱导表达条件的优化、可溶性鉴定 | 第26-27页 |
2.3.4 rhIL-7δ4/5 蛋白变性与复性 | 第27-29页 |
2.3.5 rhIL-7δ4/5 蛋白的纯化 | 第29-30页 |
2.3.6 rhIL-7δ4/5 蛋白Western-blot鉴定 | 第30-33页 |
2.4 实验结果 | 第33-37页 |
2.4.1 成功构建重组表达质粒 | 第33-34页 |
2.4.2 rhIL-7δ4/5 蛋白诱导表达条件优化、可溶性分析 | 第34-36页 |
2.4.3 rhIL-7δ4/5 蛋白的复性及纯化 | 第36-37页 |
2.4.4 Western-blot鉴定rhIL-7δ4/5 蛋白 | 第37页 |
2.5 讨论 | 第37-40页 |
第三章 rhIL-7δ4/5 蛋白对肺成纤维细胞株MRC-5 的影响 | 第40-55页 |
3.1 前言 | 第40-41页 |
3.2 实验材料 | 第41-44页 |
3.2.1 细胞株 | 第41页 |
3.2.2 主要试剂 | 第41页 |
3.2.3 主要仪器设备 | 第41页 |
3.2.4 主要溶液配制 | 第41-44页 |
3.3 实验方法 | 第44-49页 |
3.3.1 MRC-5 细胞培养方法 | 第44-45页 |
3.3.2 TGF-β1 对MRC-5 增殖及collagenI蛋白、α-SMA蛋白表达的影响 | 第45-48页 |
3.3.3 rhIL-7δ4/5 蛋白对MRC-5 增殖及collagenI蛋白、α-SMA蛋白的影响 | 第48-49页 |
3.4 实验结果 | 第49-53页 |
3.4.1 MTT法检测细胞增殖率 | 第49-50页 |
3.4.2 Western Blot检测collagenI蛋白、α-SMA蛋白的表达 | 第50-53页 |
3.5 讨论 | 第53-55页 |
全文总结 | 第55-56页 |
研究展望 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-64页 |
攻读学位期间发表的论文 | 第64-65页 |
附录1 英文缩写语中文对照 | 第65-67页 |
致谢 | 第67-68页 |