前言 | 第1-12页 |
摘要 | 第12-14页 |
Abstract | 第14-17页 |
第一章 刺参对温度胁迫调节机理的研究进展 | 第17-31页 |
·温度对刺参生理生态学特征的影响 | 第17-20页 |
·温度对刺参生长发育的影响 | 第17-18页 |
·温度对刺参能量代谢的影响 | 第18-19页 |
·温度对刺参摄食消化的影响 | 第19页 |
·温度对刺参免疫机能的影响 | 第19-20页 |
·水生动物抗逆性的分子生物学研究进展 | 第20-24页 |
·热休克蛋白 | 第21-23页 |
·抗冻蛋白 | 第23页 |
·盐度调节基因 | 第23-24页 |
·抑制性消减杂交技术(SSH)在水生生物抗逆基因筛选中的应用 | 第24-29页 |
·抑制性消减杂交技术原理及步骤 | 第25-26页 |
·抑制性消减杂交技术的优缺点 | 第26-27页 |
·抑制性消减杂交技术的应用 | 第27-29页 |
·本研究的目的意义及研究思路 | 第29-30页 |
·研究目的及意义 | 第29页 |
·研究思路 | 第29-30页 |
·本章小结 | 第30-31页 |
第二章 高温胁迫下刺参体壁消减cDNA文库的构建 | 第31-46页 |
·前言 | 第31-32页 |
·材料与方法 | 第32-40页 |
·样品采集 | 第32页 |
·刺参体壁总RNA的提取 | 第32-33页 |
·m RNA纯化 | 第33页 |
·消减杂交 | 第33-40页 |
·消减文库效率检测 | 第40页 |
·消减文库的构建 | 第40页 |
·结果与分析 | 第40-43页 |
·不同处理组总RNA及质量评价 | 第40-41页 |
·cDNA合成及酶切纯化 | 第41-42页 |
·抑制性PCR检测 | 第42-43页 |
·消减杂交效果验证 | 第43页 |
·讨论 | 第43-45页 |
·本章小结 | 第45-46页 |
第三章 高温胁迫下刺参体壁消减cDNA文库的筛选与鉴定 | 第46-60页 |
·前言 | 第46页 |
·材料与方法 | 第46-50页 |
·PCR鉴定消减文库克隆插入片段情况 | 第46-47页 |
·斑点杂交筛选 | 第47-48页 |
·序列测定及功能分析 | 第48页 |
·温度刺激条件下刺参体壁中基因表达差异 | 第48-50页 |
·实验结果 | 第50-56页 |
·差减cDNA文库容量及插入片段大小 | 第50-51页 |
·斑点杂交 | 第51-52页 |
·差减cDNA片段序列的测定及分析 | 第52-54页 |
·基因功能注释 | 第54-55页 |
·实时定量PCR检测差异表达基因转录水平变化 | 第55-56页 |
·讨论 | 第56-59页 |
·本章小结 | 第59-60页 |
第四章 刺参热休克蛋白90 基因的克隆、鉴定与表达分析 | 第60-76页 |
·前言 | 第60页 |
·材料与方法 | 第60-66页 |
·实验动物的驯养及样品采集 | 第60-61页 |
·实验相关引物信息 | 第61-62页 |
·刺参总RNA的提取 | 第62页 |
·5’-RACE 和3’-RACE cDNA合成 | 第62-64页 |
·3’-RACE扩增 | 第64页 |
·5’-RACE扩增 | 第64-65页 |
·ApHsp90 序列同源性比对、遗传进化树分析及空间结构预测 | 第65页 |
·Aphsp90 基因在刺参不同组织的时空表达 | 第65-66页 |
·数据分析 | 第66页 |
·实验结果 | 第66-73页 |
·刺参Aphsp90 全长cDNA克隆及序列分析 | 第66-68页 |
·ApHsp90 序列同源性分析 | 第68-69页 |
·刺参ApHsp90 结构预测 | 第69-70页 |
·刺参ApHsp90 进化分析 | 第70-71页 |
·不同温度条件下Aphsp90 基因在刺参不同组织的表达分析 | 第71-72页 |
·Aphsp90 基因不同刺激时间表达分析 | 第72-73页 |
·讨论 | 第73-75页 |
·本章小结 | 第75-76页 |
第五章 刺参热休克蛋白26 基因的克隆、鉴定与表达分析 | 第76-88页 |
·前言 | 第76-77页 |
·材料与方法 | 第77-80页 |
·实验动物的驯养及样品采集 | 第77页 |
·实验相关引物信息 | 第77-78页 |
·刺参总RNA的提取 | 第78页 |
·5’-RACE 和3’-RACE cDNA合成 | 第78页 |
·3’-RACE扩增 | 第78页 |
·5’-RACE扩增 | 第78-79页 |
·ApHsp26 序列同源性比对、遗传进化树分析及空间结构预测 | 第79页 |
·Aphsp26 基因在刺参不同组织的时空表达 | 第79页 |
·数据分析 | 第79-80页 |
·实验结果 | 第80-85页 |
·刺参Aphsp26 全长cDNA克隆及序列分析 | 第80-81页 |
·刺参ApHsp26 序列同源性分析 | 第81-82页 |
·刺参ApHsp26 结构预测 | 第82-83页 |
·刺参ApHsp26 进化分析 | 第83页 |
·不同温度条件下Aphsp26 基因在刺参不同组织的表达分析 | 第83-84页 |
·Aphsp26 基因不同刺激时间表达分析 | 第84-85页 |
·讨论 | 第85-87页 |
·本章小结 | 第87-88页 |
第六章 不同刺参群体生长及热休克蛋白基因表达差异 | 第88-100页 |
·前言 | 第88-89页 |
·材料与方法 | 第89-92页 |
·实验动物的驯养及样品采集 | 第89-90页 |
·高温刺激对不同群体刺参幼体生长发育的影响 | 第90页 |
·不同群体刺参幼参生长性能测定 | 第90页 |
·不同群体高温耐受性的对比 | 第90页 |
·不同选择群体热刺激后Aphsp90 和Aphsp26 表达量的差异 | 第90-91页 |
·数据分析 | 第91-92页 |
·实验结果 | 第92-97页 |
·不同群体刺参幼体温度胁迫条件下生长率、存活率分析 | 第92-93页 |
·不同群体刺参幼体温度胁迫条件下生长曲线比较 | 第93-94页 |
·不同群体刺参幼参生长性状的比较 | 第94页 |
·不同群体幼参耐温性能差异 | 第94-95页 |
·高温刺激下不同群体幼参 Aphsp90 及 Aphsp26 表达量差异 | 第95-97页 |
·讨论 | 第97-99页 |
·本章小结 | 第99-100页 |
第七章 总结与展望 | 第100-103页 |
·研究总结 | 第100-101页 |
·创新性 | 第101页 |
·存在的问题 | 第101页 |
·研究展望 | 第101-103页 |
参考文献 | 第103-117页 |
博士期间撰写及发表文章情况 | 第117-118页 |
致谢 | 第118-119页 |