摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-11页 |
第1章 引言 | 第11-14页 |
第2章 材料与方法 | 第14-27页 |
·实验材料 | 第14-16页 |
·实验动物 | 第14页 |
·主要试剂 | 第14-15页 |
·主要仪器 | 第15-16页 |
·实验方法 | 第16-17页 |
·器材的灭菌、去RNA酶处理 | 第16页 |
·相关液体的配制 | 第16-17页 |
第1部分 NRG-1基因转染EPCs | 第17-23页 |
·大鼠EPCs的分离、扩增培养及鉴定 | 第17-18页 |
·PGC-FU-NRG-1-GFP慢病毒表达载体的构建 | 第18-19页 |
·实验分组 | 第19-21页 |
·Western blot法检测转染EPC及EPC中NRG-1蛋白的表达 | 第21-23页 |
第二部分 转染后EPCs条件培养液对心肌细胞的影响 | 第23-26页 |
·乳鼠CMs培养及鉴定 | 第23页 |
·实验分组 | 第23-24页 |
·心肌细胞增殖及凋亡的检测 | 第24-25页 |
·RT-QPCR检测相关基因Tgf、ANP、BNP、CRP的表达 | 第25-26页 |
·统计学处理 | 第26-27页 |
第3章 结果 | 第27-30页 |
·大鼠EPCs生长特点及鉴定结果 | 第27页 |
·PGC-FU-NRG-1-GFP慢病毒表达载体的鉴定结果 | 第27页 |
·PGC-FU-NRG-1-GFP慢病毒表达载体转染EPC的结果 | 第27页 |
·RT—PCR检测转染EPC72小时后NRG-1 mRNA的表达及Westernblot检测蛋白的表达 | 第27-28页 |
·乳鼠CMs生长特点及鉴定结果 | 第28页 |
·Hoechst33342/PI、Annexin Ⅴ-PI、MTT检测EPC及转染EPC上清液干预心肌细胞增值及凋亡结果 | 第28-29页 |
·AnnexinⅤ-FITC/PI双染检测EPC调节培养液抑制心肌细胞凋亡结果 | 第28页 |
·Hoechst33342/PI双染检测EPC条件培养液抑制心肌细胞凋亡结果 | 第28-29页 |
·MTT检测细胞的增殖 | 第29页 |
·qRT--PCR观察EPC及转染EPC上清液干预心肌细胞24小时后Tgf、Crp、ANP、BNPmRNA的表达变化及Western blot检测蛋白的表达 | 第29-30页 |
第4章 讨论 | 第30-34页 |
第5章 结论 | 第34-35页 |
致谢 | 第35-36页 |
参考文献 | 第36-40页 |
附录 实验图片 | 第40-53页 |
综述 | 第53-60页 |
参考文献 | 第58-60页 |