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p38MAPK基因沉默对唇裂术后瘢痕增生影响的实验研究

摘要第2-4页
Abstract第4-5页
引言第9-10页
第一部分 兔唇创口愈合过程中不同时间的瘢痕变化第10-19页
    材料与方法第10-14页
        1 实验动物、试剂、仪器、耗材第10-11页
        2 兔上唇唇裂术后瘢痕模型的建立第11-12页
        3 不同时间瘢痕模型的大体观察及瘢痕体积的测定第12页
        4 不同时间兔上唇瘢痕组织中α-SMA的免疫组化染色及MFB细胞计数第12-13页
        5 不同时间瘢痕组织中α-SMA含量的Western Blot检测第13-14页
    结果第14-17页
        1 兔上唇唇裂术后瘢痕模型的建立第14页
        2 不同时间瘢痕模型的大体观察及瘢痕体积的测定第14-15页
        3 不同时间瘢痕组织中α -SMA的免疫组化染色及MFB细胞计数第15-16页
        4 不同时间瘢痕组织中α-SMA含量的Western Blot检测第16-17页
    讨论第17-19页
第二部分 筛选P38MAPK基因沉默最有效SHRNA序列,构建P38MAPK基因沉默腺病毒载体第19-36页
    材料与方法第19-24页
        1 实验动物、试剂、仪器、耗材第19-20页
        2 pDC316-ZsGreen-ShRNA-MAPK14腺病毒载体构建第20-21页
        3 pDC316-ZsGreen-shRNA-MAPK14腺病毒病毒包装第21-22页
        4 兔皮肤成纤维细胞分离培养第22-23页
        5 Real time PCR检测腺病毒感染目的细胞后MAPK14的干扰效率第23-24页
    结果第24-33页
        1 pDC316-ZsGreen-shRNA-MAPK14腺病毒载体构建第24-27页
        2 pDC316-ZsGreen-shRNA-MAPK14腺病毒病毒包装第27-31页
        3 兔皮肤成纤维细胞分离培养第31页
        4 定量PCR检测腺病毒感染目的细胞后MAPK14的干扰效率第31-33页
    讨论第33-36页
第三部分 P38MAPK基因沉默腺病毒转染对兔唇裂术后瘢痕影响的体内试验第36-46页
    材料与方法第36-40页
        1 实验动物、试剂、仪器、耗材第36-37页
        2 兔上唇瘢痕组织局部阴性腺病毒注射预实验第37页
        3 天狼猩红染色检测不同时间基因转染后瘢痕组织中colⅠ、colⅢ表达变化第37-38页
        4 免疫组织化学染色检测不同时间基因转染后瘢痕组织中colⅠ、colⅢ、MMP1、TIMP1表达变化第38页
        5 Western blot检测不同时间基因转染后瘢痕组织中colⅠ、colⅢ、MMP1、TIMP1的蛋白表达变化第38-39页
        6 Real-time PCR检测不同时间基因转染后瘢痕组织中colⅠ、colⅢ、MMP1、TIMP1的mRNA表达变化第39-40页
    结果第40-44页
        1 兔上唇瘢痕组织局部阴性腺病毒注射转染效果比较第40页
        2 不同时间腺病毒转染后瘢痕组织colⅠ、colⅢ表达变化第40-41页
        3 不同时间腺病毒转染后瘢痕组织中colⅠ、colⅢ、MMP1、TIMP1表达变化第41-42页
        4 不同时间腺病毒转染后瘢痕组织中colⅠ、colⅢ、MMP1、TIMP1的蛋白表达变化第42-44页
        5 不同时间腺病毒转染后colⅠ、colⅢ、MMP1、TIMP1的mRNA表达变化第44页
    讨论第44-46页
第四部分 P38MAPK基因沉默腺病毒体内转染后,P38MAPK与SMAD信号CROSS-TALK的检测第46-50页
    材料与方法第46-48页
        1 实验动物、试剂、仪器、耗材第46页
        2 Western Blot检测术后1周注射靶基因沉默腺病毒后瘢痕组织中Smad2、Smad3、p-Smad2、p-Smad3、p38MAPK及p-p38MAPK的蛋白表达变化第46-47页
        3 Real-time PCR检测术后1周注射靶基因沉默腺病毒后瘢痕组织中Smad2、Smad3及p38MAPK的mRNA表达变化第47-48页
    结果第48-49页
        1 术后1周注射靶基因沉默腺病毒后Smad2、Smad3、p-Smad2、p-Smad3、p38MAPK及p-p38MAPK在瘢痕组织中的蛋白表达变化第48-49页
        2 术后1周注射靶基因沉默腺病毒后Smad2、Smad3及p38MAPK在瘢痕组织中的mRNA表达变化第49页
    讨论第49-50页
结论第50-52页
参考文献第52-57页
综述 增生性瘢痕的病理生理学和治疗的研究进展第57-72页
    综述参考文献第66-72页
临床病例第72-79页
攻读学位期间的研究成果第79-80页
缩略词表第80-82页
致谢第82-83页

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