| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-36页 |
| 1.1 哺乳动物雄性生殖生物学研究概况 | 第14-20页 |
| 1.1.1 睾丸组织结构及功能 | 第14-15页 |
| 1.1.2 精子发生与生精上皮周期 | 第15-16页 |
| 1.1.3 雄性生殖细胞发育 | 第16-17页 |
| 1.1.4 精原干细胞 | 第17-20页 |
| 1.2 Hnrnpk基因结构及功能研究概况 | 第20-31页 |
| 1.2.1 Hnrnpk蛋白结构 | 第21-22页 |
| 1.2.2 Hnrnpk的表达及调控 | 第22-23页 |
| 1.2.3 Hnrnpk的翻译后修饰 | 第23-24页 |
| 1.2.4 Hnrnpk的生物学功能 | 第24-29页 |
| 1.2.5 Hnrnpk与生殖发育 | 第29-31页 |
| 1.2.6 展望 | 第31页 |
| 1.3 精子发生过程中DNA甲基化的研究概况 | 第31-34页 |
| 1.3.1 精子发生过程中DNA甲基化酶的研究概况 | 第33页 |
| 1.3.2 精子发生过程中DNA甲基化酶调控的研究概况 | 第33-34页 |
| 1.4 研究的目的与意义 | 第34-36页 |
| 第二章 Hnrnpk基因的克隆及表达研究 | 第36-63页 |
| 2.1 前言 | 第36页 |
| 2.2 材料与方法 | 第36-48页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第36-37页 |
| 2.2.2 主要实验仪器 | 第37-38页 |
| 2.2.3 主要化学药品及试剂 | 第38页 |
| 2.2.4 主要溶液配方 | 第38-40页 |
| 2.2.5 猪Hnrnpk基因的克隆 | 第40-42页 |
| 2.2.6 实时荧光定量PCR | 第42-43页 |
| 2.2.7 Western blotting分析 | 第43-45页 |
| 2.2.8 免疫组织荧光分析 | 第45-46页 |
| 2.2.9 载体构建 | 第46-47页 |
| 2.2.10 细胞培养 | 第47-48页 |
| 2.2.11 质粒转染 | 第48页 |
| 2.3 结果与分析 | 第48-60页 |
| 2.3.1 总RNA的提取和检测结果 | 第48-49页 |
| 2.3.2 猪Hnrnpk基因的克隆和序列分析 | 第49-54页 |
| 2.3.3 猪Hnrnpk基因及其缺失体的亚细胞定位 | 第54-55页 |
| 2.3.4 猪Hnrnpk基因的时空表达分析 | 第55-56页 |
| 2.3.5 Hnrnpk在不同发育阶段猪睾丸组织中的表达及定位 | 第56-57页 |
| 2.3.6 Hnrnpk在不同发育阶段大鼠睾丸组织中的表达及定位 | 第57-60页 |
| 2.4 讨论 | 第60-63页 |
| 第三章 Hnrnpk基因对小鼠精原细胞增殖与生存的调节作用 | 第63-85页 |
| 3.1 前言 | 第63页 |
| 3.2 材料与方法 | 第63-70页 |
| 3.2.1 材料 | 第63-64页 |
| 3.2.2 主要方法 | 第64-66页 |
| 3.2.3 转录组测序 | 第66-70页 |
| 3.3 结果与分析 | 第70-79页 |
| 3.3.1 Hnrnpk在GC-1spg和C18-4 中的表达 | 第70页 |
| 3.3.2 siRNA- Hnrnpk干扰效率检测 | 第70页 |
| 3.3.3 siRNA-Hnrnpk干扰后对GC-1spg细胞表型的影响 | 第70-72页 |
| 3.3.4 siRNA- Hnrnpk干扰后对GC-1spg细胞增殖影响 | 第72-73页 |
| 3.3.5 siRNA- Hnrnpk干扰后对GC-1spg细胞凋亡的影响 | 第73页 |
| 3.3.6 siRNA- Hnrnpk干扰后细胞增殖分化凋亡相关基因检测 | 第73-74页 |
| 3.3.7 转录组测序 | 第74-79页 |
| 3.4 讨论 | 第79-85页 |
| 第四章 雄性大鼠睾丸发育过程中Dnmts的表达研究 | 第85-95页 |
| 4.1 前言 | 第85页 |
| 4.2 材料与方法 | 第85-88页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第85页 |
| 4.2.2 主要溶液配方 | 第85-86页 |
| 4.2.3 miRNA29 inhibitor及探针合成 | 第86页 |
| 4.2.4 主要方法 | 第86-88页 |
| 4.3 结果与分析 | 第88-93页 |
| 4.3.1 Dnmts在大鼠不同发育时期睾丸组织中mRNA水平的表达 | 第88-89页 |
| 4.3.2 Dnmts在大鼠不同发育时期睾丸组织中蛋白水平的表达 | 第89页 |
| 4.3.3 免疫组化检测Dnmts在不同发育时期大鼠睾丸组织中的表达 | 第89-91页 |
| 4.3.4 miR29 在不同发育时期大鼠睾丸组织中的表达 | 第91-92页 |
| 4.3.5 miRNA29 inhibitor转染GC-1spg细胞 | 第92-93页 |
| 4.4 讨论 | 第93-95页 |
| 结论 | 第95-96页 |
| 创新点 | 第96-97页 |
| 下一步研究工作 | 第97-98页 |
| 参考文献 | 第98-114页 |
| 附录 | 第114-130页 |
| 致谢 | 第130-131页 |
| 作者简介 | 第131页 |
