| 摘要 | 第5-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第1章 绪论 | 第13-26页 |
| 1.1 引言 | 第13页 |
| 1.2 端粒酶的研究现状 | 第13-17页 |
| 1.2.1 端粒酶的发现 | 第14页 |
| 1.2.2 端粒酶的发展 | 第14-15页 |
| 1.2.3 端粒酶逆转录酶TERT | 第15页 |
| 1.2.4 端粒酶RNA亚基TER | 第15-16页 |
| 1.2.5 端粒酶TERT-TER复合体 | 第16页 |
| 1.2.6 人端粒酶的研究 | 第16-17页 |
| 1.3 人端粒酶RNA的研究现状 | 第17-20页 |
| 1.3.1 人端粒酶RNA的结构特点 | 第17-19页 |
| 1.3.2 人端粒酶RNA的结构与作用 | 第19页 |
| 1.3.3 人端粒酶RNA的结构与功能的研究意义 | 第19-20页 |
| 1.4 人端粒酶RNA研究的现存问题 | 第20-21页 |
| 1.4.1 人端粒酶RNA结构研究中的问题 | 第20页 |
| 1.4.2 改进方法 | 第20-21页 |
| 1.5 SHAPE化学法的应用 | 第21-24页 |
| 1.5.1 SHAPE化学法的机理 | 第21-22页 |
| 1.5.2 亲电子物质选择与应用 | 第22-23页 |
| 1.5.3 SHAPE实验的数据分析 | 第23-24页 |
| 1.6 文章主要内容及创新点 | 第24-26页 |
| 1.6.1 主要内容 | 第24-25页 |
| 1.6.2 创新点 | 第25-26页 |
| 第2章 人端粒酶RNA基因模板的设计与体外扩增 | 第26-36页 |
| 2.1 实验仪器与材料 | 第26-28页 |
| 2.1.1 实验仪器与设备 | 第26-27页 |
| 2.1.2 实验材料与试剂 | 第27-28页 |
| 2.1.3 常用试剂配置 | 第28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-31页 |
| 2.2.1 含hTER基因的质粒设计与质粒抽提 | 第28-29页 |
| 2.2.2 PCR体系与条件的初步设计 | 第29-31页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第31-34页 |
| 2.3.1 含hTER基因的质粒设计与质粒抽提 | 第31-32页 |
| 2.3.2 PCR体系与条件的初步设计结果 | 第32-34页 |
| 2.4 本章小结 | 第34-36页 |
| 第3章 hTER的体外转录与纯化 | 第36-45页 |
| 3.1 实验仪器与材料 | 第36-38页 |
| 3.1.1 实验仪器与设备 | 第36-37页 |
| 3.1.2 实验材料与试剂 | 第37-38页 |
| 3.1.3 常用试剂配制 | 第38页 |
| 3.2 实验方法 | 第38-41页 |
| 3.2.1 hTER-Shape DNA模板制备 | 第38-40页 |
| 3.2.2 体外转录体系 | 第40页 |
| 3.2.3 RNA的纯化 | 第40-41页 |
| 3.3 结果和讨论 | 第41-44页 |
| 3.3.1 hTER-Shape DNA模板的制备结果 | 第41-43页 |
| 3.3.2 体外转录与RNA纯化的结果 | 第43-44页 |
| 3.4 本章小结 | 第44-45页 |
| 第4章 hTER的SHAPE实验 | 第45-57页 |
| 4.1 实验仪器与材料 | 第45-48页 |
| 4.1.1 实验仪器与设备 | 第45-46页 |
| 4.1.2 实验材料与试剂 | 第46-47页 |
| 4.1.3 常用试剂配制 | 第47-48页 |
| 4.2 实验方法 | 第48-51页 |
| 4.2.1 逆转录酶测试实验 | 第48页 |
| 4.2.2 RNA反转录条件的摸索与优化 | 第48-49页 |
| 4.2.3 RNA的复性 | 第49页 |
| 4.2.4 RNA的化学修饰 | 第49-50页 |
| 4.2.5 RNA的测序 | 第50页 |
| 4.2.6 SHAPE化学法综合实验 | 第50-51页 |
| 4.3 结果和讨论 | 第51-56页 |
| 4.3.1 逆转录酶测试实验 | 第51-52页 |
| 4.3.2 RNA反转录条件的摸索与优化 | 第52-53页 |
| 4.3.3 RNA的复性 | 第53页 |
| 4.3.4 RNA的化学修饰 | 第53-54页 |
| 4.3.5 RNA的测序 | 第54-55页 |
| 4.3.6 SHAPE化学法综合实验结果 | 第55-56页 |
| 4.4 本章小结 | 第56-57页 |
| 第5章 hTER二级结构的解析 | 第57-64页 |
| 5.1 实验方法 | 第57-58页 |
| 5.1.1 原始数据的输入 | 第57页 |
| 5.1.2 基线调整 | 第57-58页 |
| 5.1.3 泳动变位 | 第58页 |
| 5.1.4 信号延迟校正 | 第58页 |
| 5.1.5 配对和整合处理 | 第58页 |
| 5.2 结果和讨论 | 第58-63页 |
| 5.2.1 ShapeFinder软件处理结果 | 第58-59页 |
| 5.2.2 hTER全长自由度柱形图 | 第59-60页 |
| 5.2.3 hTER核心结构域的分析 | 第60-61页 |
| 5.2.4 hTER C R4/CR5结构域的分析 | 第61页 |
| 5.2.5 hTER Sca RNA结构域的分析 | 第61-63页 |
| 5.3 本章小结 | 第63-64页 |
| 第6章 全文总结与展望 | 第64-66页 |
| 6.1 总结 | 第64-65页 |
| 6.2 展望 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-70页 |
| 附录一：hTER的序列和SHAPE分析数据表 | 第70-76页 |
| 附录二：发表文章 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77页 |