| 中文摘要 | 第12-14页 |
| Abstract | 第14-16页 |
| 前言 | 第17-41页 |
| 1.1 糖尿病的危害 | 第17-18页 |
| 1.2 2型糖尿病的发病机制 | 第18-21页 |
| 1.2.1 遗传因素 | 第18-19页 |
| 1.2.1.1 HLA基因 | 第18-19页 |
| 1.2.1.2 UCPs基因 | 第19页 |
| 1.2.1.3 IRS-1 基因 | 第19页 |
| 1.2.2 环境因素 | 第19-21页 |
| 1.2.2.1 饮食 | 第20页 |
| 1.2.2.2 肥胖 | 第20-21页 |
| 1.2.2.3 运动 | 第21页 |
| 1.3 氧化应激与糖尿病 | 第21-31页 |
| 1.3.1 氧化应激标志物的种类及其检测方法 | 第22-24页 |
| 1.3.2 氧化应激对胰岛 β 细胞功能的影响 | 第24-31页 |
| 1.3.2.1 ROS直接引起 β 细胞损伤 | 第25页 |
| 1.3.2.2 氧化应激通过核转录因子(nuclear transcription factor-κB, NF-κB)通路引起 β 细胞损伤 | 第25-26页 |
| 1.3.2.3 氧化应激影响 β 细胞胰岛素的合成和分泌 | 第26-28页 |
| 1.3.2.4 氧化应激与胰岛素抵抗 | 第28-31页 |
| 1.4 糖尿病的防治 | 第31-39页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第39-41页 |
| 2 材料与方法 | 第41-60页 |
| 2.1 材料 | 第41-44页 |
| 2.1.1 桑叶多糖MLP | 第41页 |
| 2.1.2 试验动物与饲料 | 第41页 |
| 2.1.3 细胞 | 第41页 |
| 2.1.4 试剂 | 第41-42页 |
| 2.1.5 引物 | 第42页 |
| 2.1.6 相关溶液及配制 | 第42-44页 |
| 2.1.7 仪器 | 第44页 |
| 2.2 方法 | 第44-60页 |
| 2.2.1 2 型糖尿病大鼠机体组织氧化应激水平的测定 | 第44-48页 |
| 2.2.1.1 2 型糖尿病动物模型的制备 | 第44-45页 |
| 2.2.1.2 实验设计与分组 | 第45页 |
| 2.2.1.3 大鼠血液样品的采集 | 第45页 |
| 2.2.1.4 大鼠胰腺组织样品的采集 | 第45页 |
| 2.2.1.5 大鼠肝脏组织样品的采集 | 第45-46页 |
| 2.2.1.6 大鼠肌肉组织的采集 | 第46页 |
| 2.2.1.7 大鼠血液相关指标的检测 | 第46页 |
| 2.2.1.8 大鼠胰腺组织相关指标的检测 | 第46页 |
| 2.2.1.9 大鼠肝脏组织相关指标的检测 | 第46页 |
| 2.2.1.9 大鼠肌肉组织相关指标的检测 | 第46-47页 |
| 2.2.1.10大鼠胰腺组织HE染色及形态观察 | 第47页 |
| 2.2.1.11大鼠肝脏组织HE染色及形态观察 | 第47页 |
| 2.2.1.12大鼠肌肉组织HE染色及形态观察 | 第47页 |
| 2.2.1.13大鼠肌肉组织葡萄糖转运子 4(GLUT4)的转位观察 | 第47-48页 |
| 2.2.2 INS-1 细胞培养 | 第48-49页 |
| 2.2.2.1 INS-1 细胞复苏 | 第48页 |
| 2.2.2.2 INS-1 细胞传代 | 第48页 |
| 2.2.2.3 细胞冻存 | 第48-49页 |
| 2.2.3 含药血清对INS-1 细胞功能的影响 | 第49-50页 |
| 2.2.3.1 含药血清的制备 | 第49页 |
| 2.2.3.2 含药血清对INS-1 细胞毒性研究 | 第49页 |
| 2.2.3.3 含药血清对高糖培养INS-1 细胞活力的影响 | 第49页 |
| 2.2.3.4 含药血清对高糖培养INS-1 细胞葡萄糖刺激的胰岛素分泌能力的影响 | 第49-50页 |
| 2.2.4 含药血清对高糖培养INS-1 细胞氧化应激的影响 | 第50-51页 |
| 2.2.4.1 含药血清对高糖培养INS-1 细胞ROS含量的影响 | 第50页 |
| 2.2.4.2 含药血清对高糖培养INS-1 细胞中MDA含量的影响 | 第50页 |
| 2.2.4.3 含药血清对高糖培养INS-1 细胞中 8-OHd G含量的影响 | 第50-51页 |
| 2.2.4.4 含药血清对高糖培养INS-1 细胞中抗氧化酶活性的影响 | 第51页 |
| 2.2.5 含药血清对高糖培养INS-1 细胞凋亡的影响 | 第51-57页 |
| 2.2.5.1 含药血清对高糖培养INS-1 细胞形态结构的影响 | 第51页 |
| 2.2.5.2 Hoechst 33342检测含药血清对高糖培养INS-1 细胞凋亡的影响 | 第51-52页 |
| 2.2.5.3 含药血清对高糖培养INS-1 细胞线粒体膜电位的影响 | 第52页 |
| 2.2.5.4 免疫荧光检测含药血清对高糖培养INS-1 细胞Cyt-c蛋白表达的影响 | 第52-53页 |
| 2.2.5.5 Western-blot检测含药血清对高糖培养INS-1 细胞Cyt-c蛋白表达的影响 | 第53-54页 |
| 2.2.5.6 RT-PCR检测含药血清对高糖培养INS-1 细胞Cyt-c基因表达的影响 | 第54-57页 |
| 2.2.6 含药血清对高糖培养INS-1 细胞线粒体能量代谢的影响 | 第57-58页 |
| 2.2.6.1 含药血清对高糖培养INS-1 细胞ATP合成的影响 | 第57页 |
| 2.2.6.2 含药血清对高糖培养INS-1 细胞线粒体呼吸链的影响 | 第57页 |
| 2.2.6.3 免疫荧光检测含药血清对高糖培养INS-1 细胞UCP-2 蛋白表达的影响 | 第57-58页 |
| 2.2.6.4 Western-blot检测含药血清对高糖培养INS-1 细胞UCP-2 蛋白表达的影响 | 第58页 |
| 2.2.6.5 RT-PCR检测含药血清对高糖培养INS-1 细胞UCP-2 基因表达的影响 | 第58页 |
| 2.2.7 含药血清对高糖培养INS-1 细胞胰岛素合成和分泌的影响 | 第58-60页 |
| 2.2.7.1 免疫荧光法含药血清对高糖培养INS-1 细胞内insulin、PDX-1 蛋白表达影响 | 第58页 |
| 2.2.7.2 Western-blot检测免疫荧光检测含药血清对高糖培养INS-1 细胞内insulin、PDX-1 蛋白表达影响 | 第58-59页 |
| 2.2.7.3 RT-PCR检测含药血清对高糖培养INS-1 细胞内insulin、PDX-1 基因表达影响 | 第59页 |
| 2.2.7.4 含药血清对高糖培养INS-1 细胞内Ca2+浓度的影响 | 第59-60页 |
| 3 结果与分析 | 第60-92页 |
| 3.1 桑叶多糖MLP对糖尿病大鼠机体组织氧化应激的改善作用研究 | 第60-68页 |
| 3.1.1 桑叶多糖MLP对糖尿病大鼠机体组织氧化应激损伤的影响 | 第60-61页 |
| 3.1.2 桑叶多糖MLP对糖尿病大鼠机体组织形态结构的影响 | 第61-64页 |
| 3.1.2.1 桑叶多糖MLP对糖尿病大鼠胰岛形态结构的影响 | 第61-62页 |
| 3.1.2.2 桑叶多糖MLP对糖尿病大鼠肝脏形态结构的影响 | 第62-63页 |
| 3.1.2.3 桑叶多糖MLP对糖尿病大鼠肌肉形态结构的影响 | 第63-64页 |
| 3.1.3 桑叶多糖MLP对糖尿病大鼠机体组织功能的影响 | 第64-67页 |
| 3.1.3.1 桑叶多糖MLP对糖尿病大鼠胰岛素分泌的影响 | 第64-65页 |
| 3.1.3.2 桑叶多糖 MLP 对糖尿病大鼠肝脏中糖原合成酶活性的影响 | 第65-66页 |
| 3.1.3.3 桑叶多糖MLP对糖尿病大鼠肌肉中葡萄糖转运蛋白 4(GLUT-4)的影响 | 第66-67页 |
| 3.1.4 桑叶多糖MLP对糖尿病大鼠机体组织中抗氧化酶活性的影响 | 第67-68页 |
| 3.2 含药血清对 INS-1 细胞毒性作用研究 | 第68-72页 |
| 3.2.1 正常空白血清对INS-1 细胞毒性作用研究 | 第68-69页 |
| 3.2.2 含NAC血清对INS-1 细胞毒性作用研究 | 第69-70页 |
| 3.2.3 含MLP血清对INS-1 细胞毒性作用研究 | 第70-72页 |
| 3.3 MLP对高糖培养INS-1 细胞功能的作用研究 | 第72-74页 |
| 3.3.1 MLP对高糖培养INS-1 细胞活力的影响 | 第72-73页 |
| 3.3.2 MLP对高糖培养INS-1 细胞葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS)的影响 | 第73页 |
| 3.3.3 MLP对高糖培养INS-1 细胞 48h内葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS)动态的影响 | 第73-74页 |
| 3.4 MLP对高糖培养INS-1 细胞氧化应激的影响 | 第74-80页 |
| 3.4.1 MLP对高糖培养INS-1 细胞形态结构的影响 | 第74-75页 |
| 3.4.2 MLP对高糖培养INS-1 细胞中ROS含量的影响 | 第75-77页 |
| 3.4.3 MLP对高糖培养INS-1 细胞中MDA含量的影响 | 第77-78页 |
| 3.4.4 MLP对高糖培养INS-1 细胞中 8-OHd G含量的影响 | 第78页 |
| 3.4.5 MLP对高糖培养INS-1 细胞中抗氧化酶活性的影响 | 第78-80页 |
| 3.5 MLP对高糖培养INS-1 细胞线粒体能量代谢的影响 | 第80-82页 |
| 3.5.1 MLP对高糖培养INS-1 细胞ATP含量的影响 | 第80页 |
| 3.5.2 MLP对高糖培养INS-1 细胞线粒体呼吸链复合酶活性的影响 | 第80-81页 |
| 3.5.3 MLP对高糖培养INS-1 细胞线粒体UCP-2 表达的影响 | 第81-82页 |
| 3.6 MLP对高糖培养INS-1 细胞凋亡的影响 | 第82-87页 |
| 3.6.1 MLP对高糖培养INS-1 细胞凋亡的影响 | 第82-83页 |
| 3.6.2 MLP对高糖培养INS-1 细胞线粒体膜电位的影响 | 第83-85页 |
| 3.6.3 MLP对高糖培养INS-1 细胞中细胞色素c (Cyt-c)表达的影响 | 第85-87页 |
| 3.7 MLP对高糖培养INS-1 细胞胰岛素合成和分泌机制的影响 | 第87-92页 |
| 3.7.1 MLP对高糖培养INS-1 细胞胰岛素表达的影响 | 第87-89页 |
| 3.7.2 MLP对高糖培养INS-1 细胞PDX-1 表达的影响 | 第89-91页 |
| 3.7.3 MLP对高糖培养INS-1 细胞中Ca2+浓度的影响 | 第91-92页 |
| 4 讨论 | 第92-98页 |
| 4.1 桑叶多糖MLP对2型糖尿病大鼠机体组织氧化应激的影响 | 第92-93页 |
| 4.2 含桑叶多糖MLP大鼠血清的制备 | 第93-94页 |
| 4.3 桑叶多糖MLP对体外高糖培养INS-1 的抗氧化作用研究 | 第94-98页 |
| 4.3.1 桑叶多糖MLP对线粒体氧化应激的影响 | 第94-95页 |
| 4.3.2 桑叶多糖MLP对线粒体氧化应激诱导的细胞凋亡影响 | 第95-96页 |
| 4.3.3 桑叶多糖MLP对胰岛素分泌的影响 | 第96-98页 |
| 5 结论 | 第98-99页 |
| 参考文献 | 第99-115页 |
| 致谢 | 第115-116页 |
| 攻读学位期间发表的论文及获奖情况 | 第116-117页 |
