| 中文摘要 | 第8-14页 |
| 英文摘要 | 第14-19页 |
| 缩略词中英文对照 | 第20-21页 |
| 前言 | 第21-24页 |
| 第一章 食管癌组织microRNA差异表达谱的筛选 | 第24-40页 |
| 1 材料与方法 | 第24-27页 |
| 2 结果 | 第27-38页 |
| 2.1 样本信息 | 第27-28页 |
| 2.2 组织样本总RNA质量控制 | 第28页 |
| 2.3 芯片中差异表达的miRNA识别 | 第28-30页 |
| 2.4 荧光定量RT-PCR验证芯片结果 | 第30-34页 |
| 2.5 差异表达miRNA与食管癌发病风险的关系研究 | 第34-36页 |
| 2.6 环境因素与候选miRNA表达水平的关联性研究 | 第36-38页 |
| 3 讨论 | 第38-39页 |
| 本章小结 | 第39-40页 |
| 第二章 miR-183调控食管癌发生发展的机制研究 | 第40-67页 |
| 第一节 miR-183在食管癌细胞EC9706中功能研究 | 第40-47页 |
| 1 材料与方法 | 第40-43页 |
| 2 结果 | 第43-45页 |
| 2.1 miR-183 mimic、inhibitor转染食管癌细胞EC9706的转染效率 | 第43页 |
| 2.2 miR-183抑制食管癌细胞EC9706的凋亡 | 第43-44页 |
| 2.3 miR-183促进食管癌细胞EC9706的增殖 | 第44页 |
| 2.4 miR-183改变食管癌细胞EC9706的周期分布 | 第44-45页 |
| 2.5 Transwell侵袭能力检测 | 第45页 |
| 3 讨论 | 第45-47页 |
| 第二节 miR-183在食管癌细胞EC9706中靶基因的识别与验证 | 第47-66页 |
| 1 材料与方法 | 第47-52页 |
| 2 结果 | 第52-64页 |
| 2.1 miRNA表达谱芯片样品质检 | 第53页 |
| 2.2 miRNA表达谱芯片筛选差异表达mRNA | 第53-56页 |
| 2.3 GO与KEGG分析 | 第56-58页 |
| 2.4 芯片数据的累积分布函数分析 | 第58-59页 |
| 2.5 miR-183在蛋白水平调控PDCD4 | 第59-60页 |
| 2.6 双荧光素酶报告基因 | 第60-62页 |
| 2.7 miR-183与PDCD4 mRNA在食管组织中的相关性分析 | 第62页 |
| 2.8 PDCD4重组质粒鉴定 | 第62-64页 |
| 2.9 PDCD4 restore后细胞凋亡检测 | 第64页 |
| 3.讨论 | 第64-66页 |
| 本韋小结 | 第66-67页 |
| 第三章 miR-218调控食管癌发生发展的机制研究 | 第67-95页 |
| 第一节 miR-218 CpG岛甲基化状态检测 | 第67-80页 |
| 1 材料与方法 | 第67-72页 |
| 2 结果 | 第72-78页 |
| 2.1 miR-218启动子区CpG岛分析 | 第72-73页 |
| 2.2 亚硫酸盐测序 | 第73-74页 |
| 2.3 巢式甲基化特异性PCR | 第74-75页 |
| 2.4 miR-218与宿主基因SLIT2、SLIT3相关表达水平 | 第75-76页 |
| 2.5 不同浓度5-Aza-CdR处理不同时间对食管癌细胞增殖活力影响 | 第76-77页 |
| 2.6 5-Aza-CdR处理食管癌细胞后miR-218的表达水平 | 第77页 |
| 2.7 miR-218在食管癌组织中甲基化状态对miR-218表达水平的影响 | 第77-78页 |
| 3 讨论 | 第78-80页 |
| 第二节 miR-218在食管癌细胞EC109中功能研究 | 第80-85页 |
| 1 材料与方法 | 第80页 |
| 2 结果 | 第80-83页 |
| 2.1 miR-218mimic转染食管癌细胞EC109的转染效率 | 第80-81页 |
| 2.2 miR-218对食管癌细胞EC109凋亡的影响 | 第81页 |
| 2.3 miR-218抑制食管癌细胞EC109的增殖 | 第81-82页 |
| 2.4 miR-218诱导食管癌细胞EC109G1期阻滞 | 第82页 |
| 2.5 Transwell侵袭能力检测 | 第82-83页 |
| 3 讨论 | 第83-85页 |
| 第三节 miR-218在食管癌细胞EC109中靶基因的识别与验证 | 第85-94页 |
| 1 材料与方法 | 第85-86页 |
| 2 结果 | 第86-92页 |
| 2.1 miR-218靶基因生物信息学方法预测 | 第87页 |
| 2.2 miR-218在mRNA和蛋白水平下调ROBO1的表达 | 第87-88页 |
| 2.3 双荧光素酶报告基因 | 第88-89页 |
| 2.4 miR-218与ROBO1 mRNA在食管组织中的相关性分析 | 第89-90页 |
| 2.5 ROBO1重组质粒鉴定 | 第90-91页 |
| 2.6 ROBO1 restore后细胞增殖检测 | 第91-92页 |
| 3 讨论 | 第92-94页 |
| 本章小结 | 第94-95页 |
| 第四章 miR-183和miR-218在食管癌筛检中的诊断价值 | 第95-102页 |
| 1 材料与方法 | 第95-97页 |
| 2 结果 | 第97-99页 |
| 2.1 人群信息 | 第97-98页 |
| 2.2 内参的选择 | 第98页 |
| 2.3 血浆中miR-183、miR-218表达水平分析 | 第98-99页 |
| 2.4 血浆中miR-183、miR-218表达水平与食管癌发病风险分析 | 第99页 |
| 2.5 ROC检测候选miRNA的敏感性和特异性 | 第99页 |
| 3 讨论 | 第99-101页 |
| 本章小结 | 第101-102页 |
| 总结 | 第102-103页 |
| 参考文献 | 第103-109页 |
| 综述 | 第109-119页 |
| 参考文献 | 第115-119页 |
| 作者简介 | 第119-121页 |
| 致谢 | 第121页 |
