摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一章 绪论 | 第9-17页 |
1.1 蜜环菌 | 第9-12页 |
1.1.1 蜜环菌简介 | 第9页 |
1.1.2 蜜环菌的生物学特性 | 第9-10页 |
1.1.3 蜜环菌的主要成分 | 第10-11页 |
1.1.4 蜜环菌生物活性的研究 | 第11-12页 |
1.2 神经性炎症简介 | 第12-15页 |
1.2.1 神经性炎症及发病机制 | 第12-13页 |
1.2.2 MPTP诱导的PD动物模型 | 第13页 |
1.2.3 PD病程中的小胶质细胞与神经炎症 | 第13-14页 |
1.2.4 脂多糖与小胶质细胞 | 第14页 |
1.2.5 NF-κB信号通路与炎症 | 第14-15页 |
1.3 本课题的研究意义 | 第15-16页 |
1.4 本课题研究内容 | 第16-17页 |
第二章 Hex-AM在MPTP诱导PD小鼠模型中的抗炎作用 | 第17-25页 |
2.1 前言 | 第17页 |
2.2 实验材料 | 第17-18页 |
2.2.1 实验动物 | 第17页 |
2.2.2 试剂 | 第17页 |
2.2.3 仪器与耗材 | 第17-18页 |
2.3 实验方法 | 第18-20页 |
2.3.1 帕金森小鼠模型制备 | 第18页 |
2.3.2 行为学检测 | 第18页 |
2.3.3 组织处理与灌注 | 第18页 |
2.3.4 免疫组织化学 | 第18-19页 |
2.3.5 RNA提取及实时荧光定量PCR | 第19页 |
2.3.6 蛋白免疫印记 | 第19-20页 |
2.4 结果与分析 | 第20-23页 |
2.4.1 Hex-AM对小鼠PD模型的一般情况影响 | 第20页 |
2.4.2 Hex-AM对小鼠PD模型的行为学影响 | 第20-21页 |
2.4.3 Hex-AM对黑质中多巴胺能神经元的影响 | 第21-22页 |
2.4.4 Hex-AM对小胶质细胞活性的影响 | 第22-23页 |
2.4.5 Hex-AM对一氧化氮合酶活性的影响 | 第23页 |
2.5 本章小结 | 第23-25页 |
第三章 Hex-AM抗炎活性组分的筛选 | 第25-37页 |
3.1 前言 | 第25页 |
3.2 实验材料 | 第25-26页 |
3.2.1 菌粉与细胞 | 第25页 |
3.2.2 试剂 | 第25-26页 |
3.2.3 仪器与耗材 | 第26页 |
3.3 实验方法 | 第26-31页 |
3.3.1 主要药品与溶液的配制 | 第26-27页 |
3.3.2 BV-2 细胞培养 | 第27页 |
3.3.3 MTT法检测组分对细胞存活率的影响 | 第27-28页 |
3.3.4 Griess法检测提取物对LPS诱导细胞分泌的NO的影响 | 第28页 |
3.3.5 薄层色谱分析 | 第28页 |
3.3.6 硅胶柱层析分离 | 第28-29页 |
3.3.7 分析型液相对组分分析 | 第29-30页 |
3.3.8 Fr.3, Fr.5, Fr.6 的进一步手填硅胶柱纯化 | 第30-31页 |
3.3.9 统计学方法 | 第31页 |
3.4 实验结果与分析 | 第31-36页 |
3.4.1 Hex-AM薄层层析分析 | 第31-32页 |
3.4.2 Hex-AM的硅胶柱层析分离 | 第32页 |
3.4.3 Fr.1-Fr.6 和剩余相对BV-2 细胞活力及其对LPS诱导细胞分泌NO的影响 | 第32-34页 |
3.4.4 Fr.3, Fr.5, Fr.6 的HPLC分析 | 第34页 |
3.4.5. Fr.3,Fr.5,Fr.6 硅胶柱纯化及HPLC分析 | 第34-35页 |
3.4.6 Fr.3-1、Fr.5-1 和Fr.6-1 对BV2细胞活力及其对LPS诱导细胞分泌NO的影响 | 第35-36页 |
3.5 本章小结 | 第36-37页 |
第四章 Fr.5-1 的成分分析和抗炎机制探究 | 第37-49页 |
4.1 前言 | 第37页 |
4.2 实验材料 | 第37-38页 |
4.2.1 试剂 | 第37页 |
4.2.2 仪器与耗材 | 第37-38页 |
4.3 实验方法 | 第38-42页 |
4.3.1 GC-MS分析 | 第38页 |
4.3.2 Fr.5-1 的LC-MS分析并进行标品比较 | 第38页 |
4.3.3 制备型高效液相法分离Fr.5-1 | 第38-39页 |
4.3.4 MTT法检测制备型液相分得的组分对细胞的毒性 | 第39页 |
4.3.5 Griess法检测制备型液相分得的组分对LPS诱导细胞分泌NO的影响 | 第39页 |
4.3.6 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测炎症因子相关基因表达情况 | 第39-40页 |
4.3.7 酶联免疫法检测炎症因子TNF-α, IL-1β 和IL-6 | 第40页 |
4.3.8 免疫印迹法检测活性组分对神经性炎症相关信号通路的调控 | 第40-41页 |
4.3.9 统计学方法 | 第41-42页 |
4.4 实验结果与分析 | 第42-47页 |
4.4.1 Fr.5-1 的GC-MS分析 | 第42页 |
4.4.2 Fr.5-1 的LC-MS分析结果 | 第42-43页 |
4.4.3 HPLC内外标法比对Fr.5-1 与大豆黄素 | 第43-44页 |
4.4.4 Fr.5-1 的制备型液相分离 | 第44页 |
4.4.5 制备型液相分离Fr.5-1 的4个组分对BV2细胞活力及其对LPS诱导细胞分泌NO的影响 | 第44-45页 |
4.4.6 Fr.5-1 对LPS诱导BV-2 细胞分泌炎症因子转录水平的影响 | 第45-46页 |
4.4.7 Fr.5-1 对LPS诱导BV-2 细胞所分泌炎症因子的影响 | 第46-47页 |
4.4.8 Fr.5-1 对神经性炎症过程中NF-κB信号通路中相关蛋白表达的影响 | 第47页 |
4.5 本章小结 | 第47-49页 |
结论和展望 | 第49-50页 |
主要结论 | 第49页 |
展望与不足 | 第49-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-54页 |
附录 1:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第54-55页 |
附录 2:全文中英文缩略表 | 第55页 |
附录 3: 分离组分的HPLC结果分析 | 第55-57页 |