| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-23页 |
| 1 植物雄性不育概述 | 第9-12页 |
| 1.1 植物雄性不育的概念 | 第9-10页 |
| 1.2 植物雄性不育的类型 | 第10页 |
| 1.3 植物CMS的来源 | 第10-12页 |
| 1.3.1 自然突变 | 第10页 |
| 1.3.2 种间杂交 | 第10-11页 |
| 1.3.3 理化诱导 | 第11页 |
| 1.3.4 原生质体融合 | 第11页 |
| 1.3.5 基因工程 | 第11-12页 |
| 1.4 植物细胞质雄性不育细胞学形态及败育特征 | 第12页 |
| 2 植物CMS与能量代谢 | 第12-15页 |
| 2.1 植物CMS与呼吸代谢途径 | 第13页 |
| 2.2 植物CMS与ATP酶活性 | 第13-14页 |
| 2.3 植物CMS与ATP含量 | 第14-15页 |
| 3 植物CMS的分子机制 | 第15-18页 |
| 3.1 线粒体DNA与CMS的关系 | 第15-16页 |
| 3.2 RNA编辑与CMS的关系 | 第16页 |
| 3.3 蛋白质翻译与CMS的关系 | 第16-17页 |
| 3.4 orf25基因研究现状 | 第17页 |
| 3.5 atp9基因研究现状 | 第17-18页 |
| 4 RNA干扰技术研究进展 | 第18-21页 |
| 4.1 RNA干扰的特点 | 第18-19页 |
| 4.2 RNAi技术应用 | 第19-21页 |
| 4.2.1 RNAi技术在植物营养价值改良上的应用 | 第19-20页 |
| 4.2.2 RNAi技术在植物病虫害防治研究上的应用 | 第20页 |
| 4.2.3 RNAi技术在植物雄性不育研究上的应用 | 第20-21页 |
| 5 研究目的与意义 | 第21-23页 |
| 第二章 生殖生长期烟草orf25基因和atp9基因的相对表达量和ATP酶活性分析 | 第23-31页 |
| 1 实验材料 | 第23-24页 |
| 1.1 植物材料 | 第23页 |
| 1.2 主要实验试剂 | 第23页 |
| 1.3 引物设计 | 第23-24页 |
| 1.4 主要仪器设备 | 第24页 |
| 2 方法 | 第24-25页 |
| 2.1 烟草总RNA的提取 | 第24页 |
| 2.2 RNA的纯化及cDNA第一链合成 | 第24页 |
| 2.3 RT-PCR反应 | 第24页 |
| 2.4 ATP酶活性测定 | 第24-25页 |
| 3 结果与分析 | 第25-29页 |
| 3.1 orf25基因的相对表达量分析 | 第25-26页 |
| 3.2 atp9基因的相对表达量分析 | 第26-27页 |
| 3.3 ATP酶活性分析 | 第27页 |
| 3.4 orf25基因相对表达量与ATP酶活性的相关性分析 | 第27-28页 |
| 3.5 atp9基因相对表达量与ATP酶活性的相关性分析 | 第28-29页 |
| 4 小结与讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 生殖生长期转基因烟草orf25基因和atp9基因的相对表达量、ATP酶活性及ATP含量分析 | 第31-49页 |
| 1 材料 | 第31-32页 |
| 1.1 植物材料 | 第31页 |
| 1.2 主要试验试剂 | 第31页 |
| 1.3 引物设计 | 第31页 |
| 1.4 主要仪器设备 | 第31-32页 |
| 2 方法 | 第32-33页 |
| 2.1 烟草总RNA的提取 | 第32页 |
| 2.2 RNA的纯化及cDNA第一链合成 | 第32页 |
| 2.3 RT-PCR反应 | 第32页 |
| 2.4 ATP酶活性的测定 | 第32页 |
| 2.5 ATP含量的测定 | 第32页 |
| 2.6 烟株形态特征的测量 | 第32页 |
| 2.7 花粉活力的测定 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-45页 |
| 3.1 生殖生长期转基因烟草orf25基因相对表达量、ATP酶活性及ATP含量分析 | 第33-37页 |
| 3.1.1 orf25基因的相对表达量分析 | 第33-34页 |
| 3.1.2 ATP酶活性分析 | 第34-35页 |
| 3.1.3 ATP含量分析 | 第35-36页 |
| 3.1.4 ATP酶活性和ATP含量的相关性分析 | 第36-37页 |
| 3.2 生殖生长期转基因烟草atp9基因的相对表达量、ATP酶活性及ATP含量分析 | 第37-40页 |
| 3.2.1 atp9基因的相对表达量分析 | 第37-38页 |
| 3.2.2 ATP酶活性分析 | 第38页 |
| 3.2.3 ATP含量分析 | 第38-39页 |
| 3.2.4 ATP酶活性与ATP含量的相关性分析 | 第39-40页 |
| 3.3 转基因烟草的形态特征及花粉活力 | 第40-45页 |
| 3.3.1 转基因烟草的表型特征 | 第40-42页 |
| 3.3.2 转基因烟草形态指标分析 | 第42-43页 |
| 3.3.3 转RNAi-orf25烟草及对照植株花粉活力分析 | 第43-44页 |
| 3.3.4 转RNAi-atp9烟草及对照植株花粉活力分析 | 第44-45页 |
| 4 小结与讨论 | 第45-49页 |
| 4.1 RNA干扰对转基因烟草形态的影响 | 第45-46页 |
| 4.2 atp9基因RNA干扰载体转化烟草的基因沉默效果 | 第46-47页 |
| 4.2.1 atp9基因RNA干扰对转基因烟草ATP酶活性和ATP含量影响 | 第46页 |
| 4.2.2 atp9基因RNA干扰对转基因烟草花粉活力及育性的影响 | 第46-47页 |
| 4.3 orf25基因RNA干扰载体转化烟草的基因沉默效果 | 第47-49页 |
| 4.3.1 orf25基因RNA干扰对转基因烟草ATP酶活性和ATP含量影响 | 第47页 |
| 4.3.2 orf25基因RNA干扰对转基因烟草花粉活力的影响 | 第47-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第60页 |
