| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-28页 |
| 第一章 硫在植物代谢水平中的作用 | 第14-18页 |
| 1 硫在植物体内的运输 | 第14-15页 |
| 2 硫与植物激素之间的关系 | 第15-16页 |
| 3 硫与植物抗逆性的关系 | 第16-18页 |
| 第二章 SAC蛋白及激素的研究进展 | 第18-26页 |
| 1 SAC蛋白的研究进展 | 第19-21页 |
| 2 硫代谢相关植物激素 | 第21-25页 |
| 2.1 茉莉酸 | 第22-23页 |
| 2.2 水杨酸 | 第23-24页 |
| 2.3 脱落酸 | 第24-25页 |
| 3 激素间相互作用 | 第25-26页 |
| 第三章 本课题研究目的及意义 | 第26-27页 |
| 技术路线 | 第27-28页 |
| 第二部分 研究内容 | 第28-71页 |
| 第一章 SAC转基因植株的鉴定与生理分析 | 第28-54页 |
| 1 前言 | 第28-29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-42页 |
| 2.1 酶与生化试剂 | 第29页 |
| 2.2 菌株与载体 | 第29-30页 |
| 2.3 方法 | 第30-35页 |
| 2.3.1 提取质粒 | 第30-31页 |
| 2.3.2 感受态细胞的制备 | 第31页 |
| 2.3.3 双酶切质粒(pHND-GFP-SAC)和(His9-YRY) | 第31-32页 |
| 2.3.4 目的基因片段和载体割胶回收 | 第32-33页 |
| 2.3.5 重组质粒His9-SAC的构建 | 第33页 |
| 2.3.6 重组质粒His9-SAC转化 | 第33-34页 |
| 2.3.7 重组质粒His9-SAC诱导表达 | 第34页 |
| 2.3.8 透析袋的预处理 | 第34-35页 |
| 2.4 转基因植株的鉴定 | 第35-39页 |
| 2.4.1 日本晴、SHC-7和SHC-10种子的萌发和培养 | 第35-36页 |
| 2.4.2 GUS染色验证 | 第36页 |
| 2.4.3 Western Blotting | 第36-39页 |
| 2.4.3.1 SHC-10叶片总蛋白提取与浓缩 | 第36-37页 |
| 2.4.3.2 SDS-PAGE凝胶配置 | 第37页 |
| 2.4.3.3 电泳 | 第37-38页 |
| 2.4.3.4 转膜 | 第38-39页 |
| 2.4.3.5 免疫反应 | 第39页 |
| 2.4.3.6 显色反应 | 第39页 |
| 2.5 SHC-10与日本晴(WT)生理数据的测定 | 第39-42页 |
| 2.5.1 叶绿素 | 第39-40页 |
| 2.5.2 MDA | 第40-41页 |
| 2.5.3 POD | 第41页 |
| 2.5.4 GSH | 第41-42页 |
| 3 实验结果 | 第42-53页 |
| 3.1 载体His9-YRY与pHND-GFP-SAC双酶切 | 第42-43页 |
| 3.2 表达载体His9-SAC构建及酶切验证 | 第43-44页 |
| 3.3 转基因植株的鉴定 | 第44-46页 |
| 3.3.1 GUS鉴定 | 第44-45页 |
| 3.3.2 Western Blotting | 第45-46页 |
| 3.4 生理数据的测定 | 第46-53页 |
| 3.4.1 不同盐梯度处理对水稻苗高的影响 | 第46-47页 |
| 3.4.2 不同盐梯度处理对水稻叶绿素的影响 | 第47-49页 |
| 3.4.3 不同盐梯度处理对水稻叶片中MDA含量的影响 | 第49-50页 |
| 3.4.4 不同盐梯度处理对水稻叶片中POD含量的影响 | 第50-51页 |
| 3.4.5 不同盐梯度处理对水稻叶片中GSH含量的影响 | 第51-53页 |
| 4 讨论 | 第53-54页 |
| 第二章 SAC对水稻耐盐性提高的机理分析 | 第54-71页 |
| 1 前言 | 第54-55页 |
| 2 材料与方法 | 第55-63页 |
| 2.1 酶与试剂 | 第55页 |
| 2.2 实验材料 | 第55页 |
| 2.3 水稻叶片RNA的提取 | 第55-56页 |
| 2.4 反转录 | 第56页 |
| 2.5 引物设计 | 第56-57页 |
| 2.6 RT-PCR扩增条件及程序 | 第57-58页 |
| 2.7 水稻SAC蛋白的纯化与酶活测定 | 第58-60页 |
| 2.7.1 水稻SAC蛋白的提取 | 第58页 |
| 2.7.2 水稻SAC蛋白的纯化(Ni-NTA His Bind Superflow亲和层析) | 第58-59页 |
| 2.7.3 透析袋的处理 | 第59页 |
| 2.7.4 SDS-PAGE电泳 | 第59-60页 |
| 2.8 目的蛋白SAC浓度的测定体系 | 第60-61页 |
| 2.8.1 所用试剂 | 第60页 |
| 2.8.2 绘制标准曲线 | 第60-61页 |
| 2.8.3 目的蛋白浓度测定 | 第61页 |
| 2.9 目的蛋白SAC酶活力测定 | 第61-63页 |
| 3 实验结果 | 第63-70页 |
| 3.1 RT-PCR与半定量结果分析 | 第63-67页 |
| 3.2 目的蛋白SAC的纯化 | 第67-68页 |
| 3.3 蛋白定量与酶活测定 | 第68-70页 |
| 4 讨论 | 第70-71页 |
| 结论与展望 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-83页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
