合成达玛烯二醇酿酒酵母底盘细胞性能优化
| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-25页 |
| 1.1 萜类化合物的生物合成 | 第10-19页 |
| 1.1.1 萜类化合物概述 | 第10-13页 |
| 1.1.2 萜类合物分类及其生物合成的研究 | 第13-16页 |
| 1.1.3 人参皂苷的生物合成 | 第16-19页 |
| 1.2 酿酒酵母平台的合成生物学研究 | 第19-23页 |
| 1.2.1 酿酒酵母作为底盘的平台优势与挑战 | 第19-20页 |
| 1.2.2 酵母MVA途径相关基因的研究 | 第20-22页 |
| 1.2.3 酿酒酵母平台中合成生物学应用 | 第22-23页 |
| 1.3 本文研究内容及思路 | 第23-25页 |
| 第二章 材料与方法 | 第25-35页 |
| 2.1 实验菌株和质粒 | 第25-26页 |
| 2.1.1 质粒 | 第25页 |
| 2.1.2 菌株 | 第25-26页 |
| 2.2 药品与试剂 | 第26-30页 |
| 2.2.1 工具酶与药品 | 第26-28页 |
| 2.2.2 实验试剂的配置 | 第28-29页 |
| 2.2.3 培养基的配置 | 第29-30页 |
| 2.3 实验仪器 | 第30页 |
| 2.4 实验方法 | 第30-35页 |
| 2.4.1 质粒构建 | 第30-32页 |
| 2.4.2 酵母转化 | 第32-34页 |
| 2.4.3 酵母发酵与产物提取 | 第34-35页 |
| 第三章 达玛烯二醇合成模块的构建及DS活性的研究 | 第35-59页 |
| 3.1 前言 | 第35-36页 |
| 3.2 外源达玛烯二醇合成基因DS的优化 | 第36-37页 |
| 3.3 外源优化DS模块的构建 | 第37-38页 |
| 3.4 截短DS模块的构建 | 第38-42页 |
| 3.4.1 DS跨膜结构域的分析 | 第38-40页 |
| 3.4.2 截短tDS0和tDS4表达模块的构建 | 第40-42页 |
| 3.5 不同来源DS蛋白序列的比对与定点突变 | 第42-46页 |
| 3.5.1 现有DS序列比对与突变位点的选择 | 第42-43页 |
| 3.5.2 DS模块的定点突变 | 第43-46页 |
| 3.6 DS蛋白同源建模与活性位点预测 | 第46-55页 |
| 3.6.1 DS蛋白模型的构建 | 第47-50页 |
| 3.6.2 DS蛋白模型去Clash优化 | 第50-52页 |
| 3.6.3 DS模型的评价与活性位点的预测 | 第52-55页 |
| 3.7 不同DS达玛烯二醇产量的对比 | 第55-58页 |
| 3.8 本章小结 | 第58-59页 |
| 第四章 酿酒酵母生产达玛烯二醇途径的优化 | 第59-66页 |
| 4.1 前言 | 第59页 |
| 4.2 基因的提取 | 第59-61页 |
| 4.3 MVA途径相关基因的模块构建 | 第61-63页 |
| 4.4 酵母自组装构建底盘优化菌株 | 第63-65页 |
| 4.5 本章小结 | 第65-66页 |
| 第五章 产达玛烯二醇酵母工程菌的构建与发酵 | 第66-74页 |
| 5.1 前言 | 第66页 |
| 5.2 达玛烯二醇酿酒酵母工程菌的构建 | 第66-68页 |
| 5.3 酵母工程菌生长曲线的测绘 | 第68-70页 |
| 5.4 发酵产物的定性分析 | 第70-71页 |
| 5.5 发酵产物的定量分析 | 第71-72页 |
| 5.6 发酵结果与讨论 | 第72-74页 |
| 第六章 结论与展望 | 第74-76页 |
| 6.1 结论 | 第74-75页 |
| 6.2 展望 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-82页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
