| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 第一章 绪论 | 第12-23页 |
| 1.1 生物燃料研究目的和意义 | 第12页 |
| 1.2 生物燃料发展历程 | 第12-15页 |
| 1.2.1 第一代生物燃料 | 第13页 |
| 1.2.2 第二代生物燃料 | 第13页 |
| 1.2.3 第三代生物燃料 | 第13-15页 |
| 1.2.4 能源产物的变化历程 | 第15页 |
| 1.3 国内外研究现状 | 第15-16页 |
| 1.3.1 国外生物燃料的发展和现状 | 第15-16页 |
| 1.3.2 中国生物燃料的发展和现状 | 第16页 |
| 1.4 蓝藻萜类的代谢过程及基因改造途径 | 第16-22页 |
| 1.4.1 蓝藻 | 第16-17页 |
| 1.4.2 萜烯 | 第17-18页 |
| 1.4.3 蓝藻萜类代谢途径 | 第18-21页 |
| 1.4.4 代谢工程 | 第21-22页 |
| 1.5 存在问题 | 第22-23页 |
| 第二章 材料和方法 | 第23-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-24页 |
| 2.1.1 菌株和载体 | 第23页 |
| 2.1.2 酶和缓冲液 | 第23页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第24页 |
| 2.2 菌株生长条件 | 第24-26页 |
| 2.2.1 培养基 | 第24-25页 |
| 2.2.2 蓝藻生长条件 | 第25-26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-36页 |
| 2.3.1 质粒构建 | 第26-28页 |
| 2.3.2 转化 | 第28-29页 |
| 2.3.3 质粒验证 | 第29-31页 |
| 2.3.4 菌落PCR (Segregation PCR) | 第31页 |
| 2.3.5 引物 | 第31-33页 |
| 2.3.6 菌落培养 | 第33页 |
| 2.3.7 萜类收集和分析 | 第33-36页 |
| 第三章 蓝藻代谢单萜产物-柠檬烯(C_(10)H_(16)) | 第36-48页 |
| 3.1 柠檬烯及其合成路径 | 第36-40页 |
| 3.1.1 柠檬烯简介及应用 | 第36-37页 |
| 3.1.2 柠檬烯合成路径 | 第37页 |
| 3.1.3 柠檬烯质粒构建 | 第37-40页 |
| 3.2 实验过程 | 第40-44页 |
| 3.2.1 PCR扩增片段 | 第40-41页 |
| 3.2.2 柠檬烯质粒验证 | 第41页 |
| 3.2.3 Segregation PCR | 第41-43页 |
| 3.2.4 菌株培养和数据收集 | 第43-44页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第44-48页 |
| 3.3.1 工程菌的细胞生长状况 | 第45-46页 |
| 3.3.2 柠檬烯合成基因的作用 | 第46页 |
| 3.3.3 启动子及RBS对基因表达的影响 | 第46-48页 |
| 第四章 蓝藻代谢倍半萜产物-法呢烯(C_(15)H_(24)) | 第48-54页 |
| 4.1 法呢烯及其合成路径 | 第48-50页 |
| 4.1.1 法呢烯简介及应用 | 第48页 |
| 4.1.2 法呢烯合成路径 | 第48-49页 |
| 4.1.3 法呢烯质粒构建 | 第49-50页 |
| 4.2 实验过程 | 第50-52页 |
| 4.2.1 PCR扩增质粒片段 | 第50页 |
| 4.2.2 法呢烯质粒验证 | 第50-51页 |
| 4.2.3 Segregation PCR | 第51页 |
| 4.2.4 菌株培养和数据收集 | 第51-52页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第52-54页 |
| 4.3.1 工程菌生长状况 | 第52页 |
| 4.3.2 法呢烯合成基因的作用 | 第52-54页 |
| 第五章 蓝藻代谢三萜产物-鲨烯(C_(30)H_(48)) | 第54-60页 |
| 5.1 鲨烯及其合成路径 | 第54-56页 |
| 5.1.1 鲨烯简介及应用 | 第54-55页 |
| 5.1.2 鲨烯的生物代谢路径 | 第55-56页 |
| 5.2 实验过程 | 第56-57页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第57-60页 |
| 5.3.1 细胞生长 | 第57页 |
| 5.3.2 鲨烯累积 | 第57-58页 |
| 5.3.3 如何提高鲨烯的产量 | 第58-60页 |
| 第六章 结论与展望 | 第60-64页 |
| 6.1 结论 | 第60-61页 |
| 6.2 展望 | 第61-64页 |
| 6.2.1 启动子的优化 | 第61页 |
| 6.2.2 提高蓝藻菌浓度 | 第61-62页 |
| 6.2.3 提高能量的利用率和转化 | 第62页 |
| 6.2.4 碳的固定和分配 | 第62-63页 |
| 6.2.5 运输载体 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-69页 |
| 附件1 | 第69-70页 |
| 附件2 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
