| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-26页 |
| 第一节 甲壳动物卵子发生相关基因研究进展 | 第12-25页 |
| 1. 卵黄蛋白原和卵黄蛋白原受体基因 | 第12-19页 |
| 1.1 卵黄蛋白原基因 | 第12-15页 |
| 1.2 卵黄蛋白原受体基因 | 第15-19页 |
| 2. Vasa基因 | 第19-20页 |
| 3. PL10基因 | 第20-21页 |
| 4. Gustavus基因 | 第21页 |
| 5. 周期蛋白家族基因 | 第21-22页 |
| 6. 组织蛋白酶家族 | 第22-23页 |
| 7. 热休克蛋白基因 | 第23页 |
| 8. 其它相关基因 | 第23-25页 |
| 第二节 本研究的目的意义 | 第25-26页 |
| 第二章 青虾卵黄蛋白原基因的克隆、表达及功能研究 | 第26-60页 |
| 第一节 青虾卵黄蛋白原基因的克隆及序列分析 | 第26-41页 |
| 1. 实验材料 | 第26-27页 |
| 1.1 实验用虾 | 第26页 |
| 1.2 试剂 | 第26-27页 |
| 1.3 仪器 | 第27页 |
| 2. 实验方法 | 第27-33页 |
| 2.1 青虾总RNA的提取 | 第27页 |
| 2.2 青虾肝胰腺总RNA第一链cDNA的合成 | 第27-28页 |
| 2.3 青虾Vg基因中间片段的获得及验证 | 第28-29页 |
| 2.4 PCR产物的克隆测序 | 第29-31页 |
| 2.5 青虾Vg基因cDNA全序列的获得 | 第31-32页 |
| 2.6 生物信息学分析 | 第32-33页 |
| 3. 结果与分析 | 第33-40页 |
| 3.1 青虾卵黄蛋白原基因全长cDNA序列结构特征 | 第33-37页 |
| 3.2 青虾Vg基因系统进化分析 | 第37-40页 |
| 4. 讨论 | 第40-41页 |
| 第二节 青虾卵黄蛋白原基因的时空表达分析 | 第41-49页 |
| 1. 实验材料 | 第41-42页 |
| 1.1 实验用虾 | 第41页 |
| 1.2 主要试剂 | 第41页 |
| 1.3 仪器 | 第41-42页 |
| 2. 实验方法 | 第42-44页 |
| 2.1 青虾组织表达样品的采集 | 第42页 |
| 2.2 青虾卵巢不同发育时期样品采集 | 第42页 |
| 2.3 青虾胚后发育样品的采集 | 第42页 |
| 2.4 组织RNA的提取 | 第42-43页 |
| 2.5 cDNA第一链的合成 | 第43页 |
| 2.6 青虾Vg基因时空表达 | 第43-44页 |
| 3. 结果 | 第44-47页 |
| 3.1 青虾各样品总RNA的检测 | 第44页 |
| 3.2 Mn-Vg基因在胚胎、幼体、幼虾不同发育时期中表达 | 第44-45页 |
| 3.3 Mn-Vg基因在成体不同组织中的表达 | 第45-46页 |
| 3.4 Mn-Vg基因在卵巢不同发育时期中表达 | 第46-47页 |
| 4. 讨论 | 第47-49页 |
| 4.1 Mn-Vg基因在胚胎、幼体、幼虾不同发育时期中表达 | 第47-48页 |
| 4.2 Mn-Vg在成体不同组织表达差异 | 第48页 |
| 4.3 Mn-Vg基因在卵巢不同发育时期中表达 | 第48-49页 |
| 第三节 眼柄摘除和RNAi对卵黄蛋白原基因表达及性腺发育的影响 | 第49-60页 |
| 1. 材料与方法 | 第49-50页 |
| 1.1 实验用虾 | 第49-50页 |
| 1.2 试剂 | 第50页 |
| 1.3 仪器 | 第50页 |
| 2. 实验方法 | 第50-53页 |
| 2.1 青虾Vg基因双链RNA的准备 | 第50-52页 |
| 2.2 青虾Vg基因的干扰实验 | 第52页 |
| 2.3 青虾眼柄摘除实验 | 第52-53页 |
| 2.4 基因表达量的检测 | 第53页 |
| 3. 结果 | 第53-56页 |
| 3.1 眼柄摘除实验Vg表达量变化 | 第53-54页 |
| 3.2 注射dsRNA后Vg表达量变化 | 第54-55页 |
| 3.3 Vg RNAi对VgR表达影响 | 第55-56页 |
| 4. 讨论 | 第56-60页 |
| 4.1 眼柄摘除之后Vg表达变化 | 第56-57页 |
| 4.2 RNA干扰对Vg基因的表达变化 | 第57页 |
| 4.3 RNA干扰对VgR基因的表达变化 | 第57-60页 |
| 第三章 青虾卵黄蛋白原受体基因的克隆、表达和功能研究 | 第60-84页 |
| 第一节 青虾卵黄蛋白原受体基因的克隆和序列分析 | 第60-70页 |
| 1. 实验材料 | 第60页 |
| 1.1 实验用虾 | 第60页 |
| 1.2 试剂 | 第60页 |
| 1.3 仪器 | 第60页 |
| 2. 实验方法 | 第60-63页 |
| 2.1 青虾卵巢RNA的提取 | 第60-61页 |
| 2.2 青虾总RNA第一链cDNA的合成 | 第61页 |
| 2.3 青虾VgR基因中间片段的获得及验证 | 第61-62页 |
| 2.4 青虾VgR基因全序列的获得 | 第62-63页 |
| 2.5 生物信息学分析 | 第63页 |
| 3. 结果与分析 | 第63-68页 |
| 3.1 青虾VgR基因分子结构特征 | 第63-67页 |
| 3.2 青虾VgR系统进化分析 | 第67-68页 |
| 4. 讨论 | 第68-70页 |
| 第二节 青虾卵黄蛋白原受体基因的时空表达分析 | 第70-76页 |
| 1. 实验材料 | 第70页 |
| 1.1 实验用虾 | 第70页 |
| 1.2 主要试剂 | 第70页 |
| 1.3 仪器 | 第70页 |
| 2. 实验方法 | 第70-72页 |
| 2.1 青虾组织表达样品的采集 | 第70-71页 |
| 2.2 青虾卵巢不同发育时期样品采集 | 第71页 |
| 2.3 青虾胚后发育样品的采集 | 第71页 |
| 2.4 组织RNA的提取 | 第71页 |
| 2.5 cDNA第一链的合成 | 第71页 |
| 2.6 青虾VgR基因时空表达分析 | 第71-72页 |
| 3. 结果与分析 | 第72-75页 |
| 3.1 Mn-VgR在不同组织表达模式 | 第72-73页 |
| 3.2 Mn-VgR在不同发育时期的表达模式 | 第73-74页 |
| 3.3 Mn-VgR在卵巢不同发育时期的表达规律 | 第74-75页 |
| 4. 讨论 | 第75-76页 |
| 第三节 眼柄摘除和RNAi对卵黄蛋白原受体的影响 | 第76-84页 |
| 1. 材料与方法 | 第77页 |
| 1.1 实验虾 | 第77页 |
| 1.2 试剂 | 第77页 |
| 1.3 仪器 | 第77页 |
| 2. 实验方法 | 第77-79页 |
| 2.1 青虾VgR基因双链RNA的准备 | 第77-78页 |
| 2.2 青虾VgR基因的干扰实验 | 第78-79页 |
| 2.3 青虾眼柄摘除实验 | 第79页 |
| 2.4 基因表达量的检测 | 第79页 |
| 3. 结果 | 第79-82页 |
| 3.1 眼柄摘除实验VgR表达量变化 | 第79-80页 |
| 3.2 RNAi对Mn- VgR表达量影响 | 第80-82页 |
| 3.3 RNAi对Mn- Vg表达量影响 | 第82页 |
| 4. 讨论 | 第82-84页 |
| 4.1 眼柄摘除实验VgR表达量变化 | 第82页 |
| 4.2 RNAi对Mn- VgR表达量影响 | 第82-83页 |
| 4.3 RNAi对Mn- Vg表达量影响 | 第83-84页 |
| 全文结论 | 第84-86页 |
| 参考文献 | 第86-94页 |
| 附录 | 第94-102页 |
| 致谢 | 第102-104页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文及专利 | 第104页 |
