| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第11-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-30页 |
| 1.1 研究目的和意义 | 第13-14页 |
| 1.2 脊椎动物骨骼肌生长发育 | 第14-16页 |
| 1.2.1 骨骼肌生长发生 | 第14-15页 |
| 1.2.2 骨骼肌发育相关重要基因 | 第15-16页 |
| 1.3 LncRNA | 第16-22页 |
| 1.3.1 LncRNA概述 | 第16-17页 |
| 1.3.2 LncRNA生物学功能 | 第17-18页 |
| 1.3.3 LncRNA与肌肉发育 | 第18-20页 |
| 1.3.4 LncRNA研究策略 | 第20-22页 |
| 1.4 LncRNA国内外研究现状 | 第22-26页 |
| 1.5 IGF-2基因的研究进展 | 第26-30页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第30-56页 |
| 2.1 实验材料 | 第30-34页 |
| 2.1.1 试验动物 | 第30页 |
| 2.1.2 试验样品 | 第30页 |
| 2.1.3 绵羊成肌细胞 | 第30页 |
| 2.1.4 质粒和载体 | 第30页 |
| 2.1.5 免疫荧光染色用抗体 | 第30-31页 |
| 2.1.6 Western Blot用抗体 | 第31页 |
| 2.1.7 主要仪器设备 | 第31-34页 |
| 2.2 试验方法 | 第34-56页 |
| 2.2.1 提取总RNA | 第34-35页 |
| 2.2.2 检测RNA样品质量 | 第35页 |
| 2.2.3 RNA文库构建及生物信息学分析 | 第35-38页 |
| 2.2.4 Total RNA合成cDNA | 第38-40页 |
| 2.2.5 PCR反应 | 第40-41页 |
| 2.2.6 基因片段的回收、纯化、及测序 | 第41页 |
| 2.2.7 目的片段与载体的连接 | 第41页 |
| 2.2.8 反转录及荧光定量PCR | 第41-43页 |
| 2.2.9 质粒的小量制备 | 第43页 |
| 2.2.10 质粒DNA的大量提取及纯化 | 第43-44页 |
| 2.2.11 Western Blot | 第44-45页 |
| 2.2.12 原代绵羊成肌细胞培养 | 第45-47页 |
| 2.2.13 绵羊成肌细胞诱导分化 | 第47页 |
| 2.2.14 细胞过表达载体脂质体转染 | 第47页 |
| 2.2.15 细胞siRNA试验 | 第47-48页 |
| 2.2.16 绵羊lnc-SEMT的siRNA转染的效果验证 | 第48-49页 |
| 2.2.17 统计分析 | 第49-50页 |
| 2.2.18 细胞爬片免疫荧光染色 | 第50-51页 |
| 2.2.19 数据统计 | 第51页 |
| 2.2.20 组织学检测分析 | 第51-52页 |
| 2.2.21 肌纤维数目与横截面积的分析 | 第52页 |
| 2.2.22 ELISA检测 | 第52页 |
| 2.2.23 生物素标记的miR-125b捕获试验 | 第52-53页 |
| 2.2.24 原核注射 | 第53-54页 |
| 2.2.25 数据分析 | 第54页 |
| 2.2.26 miRNA结合位点和靶基因预测 | 第54页 |
| 2.2.27 实验技术路线图 | 第54-56页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第56-79页 |
| 3.1 lncRNA测序结果与讨论 | 第56-65页 |
| 3.1.1 测序RNA样本的提取 | 第56页 |
| 3.1.2 测序数据预处理及质量评估 | 第56-60页 |
| 3.1.3 候选lncRNA描述性统计 | 第60-62页 |
| 3.1.4 LncRNA的差异分析 | 第62-63页 |
| 3.1.5 LncRNA鉴定与分析 | 第63页 |
| 3.1.6 LncRNA筛选与分析 | 第63-65页 |
| 3.2 Lnc-SEMT对绵羊成肌细胞分化作用的研究结果与讨论 | 第65-69页 |
| 3.2.1 siRNA干扰载体对成肌细胞分化的研究结果与讨论 | 第66-67页 |
| 3.2.2 lnc-SEMT过表达载体对成肌细胞分化的研究结果与讨论 | 第67-69页 |
| 3.3 转lnc-SEMT绵羊制备的结果与讨论 | 第69-72页 |
| 3.3.1 转lnc-SEMT绵羊的制备 | 第69页 |
| 3.3.2 转lnc-SEMT绵羊的定量检测结果与讨论 | 第69-70页 |
| 3.3.3 转lnc-SEMT绵羊的部分生产性能测定结果与分析 | 第70-71页 |
| 3.3.4 转lnc-SEMT绵羊的组织学检测结果与分析 | 第71-72页 |
| 3.4 lnc-SEMT促进绵羊成肌生成的结果与讨论 | 第72-79页 |
| 3.4.1 lnc-SEMT和miR-125b潜在结合位点的预测与验证 | 第72-75页 |
| 3.4.2 lnc-SEMT和miR-125b竞争性结合IGF2的验证与讨论 | 第75-79页 |
| 第四章 结论 | 第79-80页 |
| 4.1 结论 | 第79页 |
| 4.2 展望 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-93页 |
| 致谢 | 第93-95页 |
| 作者简历 | 第95页 |
