摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-9页 |
英汉缩略语名词对照表 | 第9-10页 |
前言 | 第10-12页 |
材料和方法 | 第12-26页 |
1 材料 | 第12-17页 |
·菌株 | 第12页 |
·主要试剂 | 第12-14页 |
·主要实验仪器设备 | 第14-15页 |
·主要溶液和培养基 | 第15-17页 |
·主要溶液 | 第15-16页 |
·主要培养基 | 第16-17页 |
2 实验方法 | 第17-26页 |
·结核分枝杆菌的培养 | 第17页 |
·pMV361载体重组质粒的构建 | 第17-20页 |
·结核分枝杆菌PhoP/PhoR基因过表达菌株的构建 | 第20-23页 |
·RAW264.7 细胞的培养 | 第23-24页 |
·结核杆菌感染巨噬细胞模型的建立 | 第24页 |
·细菌在巨噬细胞内增殖能力的检测(CFU计数) | 第24页 |
·Annexin V-FITC/PI技术检测各组感染细胞的凋亡率 | 第24-25页 |
·统计学分析 | 第25-26页 |
结果 | 第26-35页 |
1 菌株的培养 | 第26页 |
2 MTB Pho P基因、Pho R基因pMV361载体重组质粒的构建 | 第26-27页 |
·目的基因的PCR扩增 | 第26页 |
·重组穿梭质粒的鉴定 | 第26-27页 |
3 MTB Pho P/PhoR基因过表达结核分枝杆菌各毒力菌株的构建 | 第27-29页 |
·质粒p MV361-PhoP和pMV361-Pho R的提取 | 第27页 |
·PhoP/Pho R基因过表达菌株抗性筛选 | 第27-28页 |
·PhoP/Pho R基因过表达菌株质粒的提取与鉴定 | 第28页 |
·PhoP/Pho R基因的PCR扩增及双酶切鉴定 | 第28-29页 |
4 实时荧光定量PCR检测 | 第29-31页 |
·结核分枝杆菌总RNA的提取及鉴定 | 第29页 |
·各Pho P基因过表达毒力菌株的PhoP基因相对表达量 | 第29页 |
·各Pho R基因过表达毒力菌株的PhoR基因相对表达量 | 第29-30页 |
·比较H37Rv、BCG、H37Ra的PhoP/PhoR基因的相对表达量 | 第30-31页 |
5 CFU菌落计数结果 | 第31-32页 |
6 各菌株感染巨噬细胞凋亡率检测结果 | 第32-35页 |
·巨噬细胞凋亡结果 | 第32-33页 |
·巨噬细胞凋亡结果 | 第33-35页 |
讨论 | 第35-39页 |
结论 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-43页 |
文献综述 | 第43-49页 |
参考文献 | 第47-49页 |
致谢 | 第49-50页 |
作者简介 | 第50-51页 |
导师评阅表 | 第51页 |