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MTB PhoPR双组分系统过表达对MTB致病性的影响及机制研究

摘要第1-6页
Abstract第6-9页
英汉缩略语名词对照表第9-10页
前言第10-12页
材料和方法第12-26页
 1 材料第12-17页
   ·菌株第12页
   ·主要试剂第12-14页
   ·主要实验仪器设备第14-15页
   ·主要溶液和培养基第15-17页
     ·主要溶液第15-16页
     ·主要培养基第16-17页
 2 实验方法第17-26页
   ·结核分枝杆菌的培养第17页
   ·pMV361载体重组质粒的构建第17-20页
   ·结核分枝杆菌PhoP/PhoR基因过表达菌株的构建第20-23页
   ·RAW264.7 细胞的培养第23-24页
   ·结核杆菌感染巨噬细胞模型的建立第24页
   ·细菌在巨噬细胞内增殖能力的检测(CFU计数)第24页
   ·Annexin V-FITC/PI技术检测各组感染细胞的凋亡率第24-25页
   ·统计学分析第25-26页
结果第26-35页
 1 菌株的培养第26页
 2 MTB Pho P基因、Pho R基因pMV361载体重组质粒的构建第26-27页
   ·目的基因的PCR扩增第26页
   ·重组穿梭质粒的鉴定第26-27页
 3 MTB Pho P/PhoR基因过表达结核分枝杆菌各毒力菌株的构建第27-29页
   ·质粒p MV361-PhoP和pMV361-Pho R的提取第27页
   ·PhoP/Pho R基因过表达菌株抗性筛选第27-28页
   ·PhoP/Pho R基因过表达菌株质粒的提取与鉴定第28页
   ·PhoP/Pho R基因的PCR扩增及双酶切鉴定第28-29页
 4 实时荧光定量PCR检测第29-31页
   ·结核分枝杆菌总RNA的提取及鉴定第29页
   ·各Pho P基因过表达毒力菌株的PhoP基因相对表达量第29页
   ·各Pho R基因过表达毒力菌株的PhoR基因相对表达量第29-30页
   ·比较H37Rv、BCG、H37Ra的PhoP/PhoR基因的相对表达量第30-31页
 5 CFU菌落计数结果第31-32页
 6 各菌株感染巨噬细胞凋亡率检测结果第32-35页
   ·巨噬细胞凋亡结果第32-33页
   ·巨噬细胞凋亡结果第33-35页
讨论第35-39页
结论第39-40页
参考文献第40-43页
文献综述第43-49页
 参考文献第47-49页
致谢第49-50页
作者简介第50-51页
导师评阅表第51页

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