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棉花GhSAMDC2/3/4基因的克隆及功能研究

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
缩写词中英文对照表第12-13页
引言第13-14页
第一章 文献综述第14-25页
   ·棉花抗逆育种第14-16页
     ·棉花抗逆育种的意义第14页
     ·棉花抗旱耐盐资源筛选第14-15页
     ·棉花抗旱耐盐的分子标记第15-16页
   ·多胺及其抗盐性第16-19页
     ·多胺及其功能第16页
     ·多胺代谢第16-17页
     ·多胺与抗盐性第17-18页
     ·逆境胁迫下多胺的作用第18-19页
   ·S-腺苷蛋氨酸脱羧酶第19-21页
   ·植物抗盐调节机制第21-23页
     ·SOS信号通路第21-22页
     ·蛋白激酶途径第22页
     ·ABA及渗透胁迫信号第22-23页
     ·盐胁迫诱导的基因表达第23页
   ·研究目的和意义第23-25页
第二章 材料和方法第25-37页
   ·实验材料第25-26页
     ·植物材料第25页
     ·菌株与质粒第25页
     ·试剂第25-26页
   ·实验方法第26-29页
     ·棉花RNA提取第26页
     ·拟南芥RNA提取第26-27页
     ·RNA的质量检测第27页
     ·除去RNA中的基因组DNA第27-28页
     ·RNA反转录为cDNA过程第28页
     ·植物基因组DNA的提取第28-29页
   ·植物超表达载体的构建第29-32页
     ·GhSAMDC2/3/4 基因克隆第29-30页
     ·连接pEASY-Blunt cloning载体第30页
     ·Top10大肠杆菌感受态的制备第30页
     ·连接体系转化大肠杆菌第30页
     ·细菌质粒DNA的提取第30-31页
     ·重组质粒鉴定第31页
     ·pGWB17-GhSAMDC2/3/4 载体构建第31-32页
   ·构建载体导入根癌农杆菌第32-33页
     ·根癌农杆菌LBA4404感受态细胞的制备第32页
     ·根癌农杆菌感受态的电击转化第32-33页
   ·拟南芥的遗传转化第33-35页
     ·植株种植第33页
     ·菌液的培养第33页
     ·蘸花法侵染拟南芥第33页
     ·转基因拟南芥筛选第33页
     ·转基因拟南芥验证第33-34页
     ·转pGWB17-GhSAMDC3基因拟南芥植株盐处理第34页
     ·QRT-PCR分析转pGWB17-GhSAMDC3拟南芥植株抗盐性第34-35页
     ·高压液相色谱法测定盐处理下转基因拟南芥多胺含量第35页
   ·棉花的遗传转化第35-37页
     ·菌液制备第35页
     ·无菌苗培养第35-36页
     ·愈伤诱导及筛选第36页
     ·胚状体的发生及再生苗的获得第36页
     ·抗性棉花的PCR验证第36-37页
第三章 结果与分析第37-55页
   ·GhSAMDC2/3/4 基因克隆及生物信息学分析第37-42页
     ·GhSAMDC2/3/4 的克隆及序列分析第37-38页
     ·GhSAMDC2/3/4 氨基酸序列比对及系统进化树分析第38-39页
     ·GhSAMDC2/3/4 基因在不同组织的表达分析第39-40页
     ·GhSAMDC2/3/4 基因在非生物逆境胁迫下的表达分析第40-42页
   ·Gateway技术构建植物表达载体第42-43页
     ·BP反应后阳性克隆的鉴定第42页
     ·LR反应后阳性克隆的鉴定第42-43页
     ·pGWB17-GhSAMDC2/3/4 超表达载体转化农杆菌第43页
   ·pGWB17-GhSAMDC2/3/4 转化拟南芥研究第43-50页
     ·转pGWB17-GhSAMDC2/3/4 拟南芥筛选第43页
     ·转pGWB17-GhSAMDC3拟南芥表型分析第43-45页
     ·NaCl处理下转pGWB17-GhSAMDC3拟南芥萌发情况第45-46页
     ·GhSAMDC3显著提高了拟南芥抗盐性第46-48页
     ·转pGWB17-GhSAMDC3拟南芥中抗盐相关基因的表达第48-50页
   ·棉花转化第50-55页
     ·转GhSAMDC2/3/4 基因胚性愈伤出愈情况比较第50-51页
     ·转GhSAMDC3基因棉花胚性愈伤组织PCR验证第51-52页
     ·转GhSAMDC2/3/4 基因棉花的诱导和培养第52-53页
     ·GhSAMDC3促进胚性愈伤快速生长第53-55页
第四章 讨论第55-58页
   ·GhSAMDC2/3/4 基因功能第55-56页
   ·GhSAMDC3基因与耐盐性第56-57页
   ·农杆菌侵染棉花第57-58页
第五章 总结与展望第58-59页
参考文献第59-63页
附录第63-67页
致谢第67-68页
作者简介第68-69页
导师评阅表第69页

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