| 中英文缩略词表 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 第一部分 基于MRM结合Qcon CAT法对肝微粒体CYP450定量方法的建立 | 第13-33页 |
| 1. 引言 | 第13-14页 |
| 2. 实验材料与仪器设备 | 第14-15页 |
| ·实验材料 | 第14-15页 |
| ·实验动物大鼠 | 第14页 |
| ·主要试剂 | 第14-15页 |
| ·试剂的配制（见附录） | 第15页 |
| ·仪器设备 | 第15页 |
| 3. 实验方法 | 第15-22页 |
| ·大鼠肝微粒体的提取 | 第15-16页 |
| ·大鼠肝脏微粒体样本蛋白浓度测定（BCA法） | 第16-17页 |
| ·实验原理 | 第16页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第16-17页 |
| ·大鼠肝脏微粒体浓度测定 | 第17页 |
| ·Qcon CAT质粒的设计与生成 | 第17页 |
| ·Qcon CAT质粒的转化 | 第17-18页 |
| ·Qcon CAT蛋白的表达和纯化 | 第18-19页 |
| ·Qcon CAT蛋白胶内酶切 | 第19-20页 |
| ·大鼠肝脏微粒体蛋白FASP酶切 | 第20-21页 |
| ·CYP450蛋白肽段离子对的优化 | 第21页 |
| ·重标Qcon CAT蛋白标记效率的考察 | 第21页 |
| ·精密度与准确度的考察 | 第21-22页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第22页 |
| ·大鼠肝脏微粒体中 CYP450 浓度的测定 | 第22页 |
| 4. 实验结果 | 第22-32页 |
| ·Qcon CAT蛋白的设计以及蛋白表达纯化 | 第22-25页 |
| ·特异肽段离子对的优化 | 第25-27页 |
| ·重标肽段的标记效率 | 第27-28页 |
| ·方法的精密度与准确度 | 第28-29页 |
| ·目的蛋白标准曲线的绘制 | 第29-31页 |
| ·大鼠肝微粒体目的蛋白丰度测定 | 第31-32页 |
| 5.小结 | 第32-33页 |
| 第二部分MRM定量方法应用于评估中药对大鼠CYP450的丰度调控作用 | 第33-41页 |
| 1. 引言 | 第33-34页 |
| 2. 实验材料与仪器设备 | 第34页 |
| ·实验材料 | 第34页 |
| ·实验动物大鼠 | 第34页 |
| ·主要试剂（同第一章） | 第34页 |
| ·药物 | 第34页 |
| ·仪器设备（同第一章） | 第34页 |
| 3. 实验方法 | 第34-35页 |
| ·大鼠药物模型的制备 | 第34-35页 |
| ·大鼠肝微粒体的提取（同第一章） | 第35页 |
| ·大鼠肝脏微粒体样本蛋白浓度测定（同第一章） | 第35页 |
| ·五味中药作用模型大鼠肝脏微粒体中CYP450浓度的测定 | 第35页 |
| 4. 实验结果 | 第35-38页 |
| ·五味中药药物大鼠模型肝微粒体目的蛋白丰度测定 | 第35-37页 |
| ·五味中药对大鼠肝微粒中CYP450酶丰度的调控作用 | 第37-38页 |
| 5. 讨论 | 第38-41页 |
| 第三部分MRM定量方法应用于原代肝实质细胞主要肝药酶CYP3A4绝对定量研究 | 第41-49页 |
| 1. 引言 | 第41-42页 |
| 2. 实验材料与仪器设备 | 第42-43页 |
| ·实验材料 | 第42-43页 |
| ·实验样本 | 第42页 |
| ·试剂 | 第42-43页 |
| ·试剂的配制（见附录） | 第43页 |
| ·仪器设备 | 第43页 |
| 3. 实验方法 | 第43-45页 |
| ·人肝实质细胞的分离 | 第43-44页 |
| ·人肝实质细胞的培养 | 第44页 |
| ·利福平药物处理肝脏实质细胞以及细胞内CYP450的富集 | 第44页 |
| ·微粒体蛋白的酶切与质谱测定 | 第44-45页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第45页 |
| 4.实验结果 | 第45-48页 |
| ·人肝实质细胞的分离与培养评价 | 第45-46页 |
| ·CYP3A4特异肽段离子对信息及质谱响应条件 | 第46-47页 |
| ·目的肽段的标准曲线的绘制 | 第47页 |
| ·利福平处理前后原代肝实质细胞中CYP450蛋白的表达情况 | 第47-48页 |
| 5.讨论 | 第48-49页 |
| 全文总结 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 附录 1 | 第56-59页 |
| 附录 2 | 第59-67页 |
| 个人简历 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-70页 |
| 综述 | 第70-80页 |
| 参考文献 | 第76-80页 |
