摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
前言 | 第8-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-18页 |
·白细胞介素-1 的发现与代谢分泌 | 第10-11页 |
·IL-1β的分子结构 | 第11-12页 |
·IL-1 生物学活性及其应用 | 第12-18页 |
·IL-1 与艾滋病 | 第12-14页 |
·IL-1 与肿瘤 | 第14-15页 |
·IL-1 的多态性与疾病 | 第15-16页 |
·IL-1 与脑损伤 | 第16页 |
·IL-1 与糖尿病 | 第16-18页 |
第二章 实验内容 | 第18-58页 |
实验一 新疆多浪羊 IL-1β基因克隆及序列分析 | 第18-35页 |
·实验材料及方法 | 第18-25页 |
·实验材料 | 第18-20页 |
·实验方法 | 第20-25页 |
·结果 | 第25-32页 |
·新疆多浪羊 RNA 提取结果 | 第25-26页 |
·多浪羊 IL-1β基因的 PCR 扩增 | 第26页 |
·多浪羊 IL-1β-pMD-18T 菌液 PCR 和双酶切鉴定 | 第26-27页 |
·多浪羊 IL-1β基因的序列分析 | 第27-32页 |
·讨论 | 第32-34页 |
·RNA 提取 | 第32页 |
·IL-1β基因克隆 | 第32-33页 |
·IL-1β的序列分析及生物信息学预测 | 第33-34页 |
·小结 | 第34-35页 |
实验二 新疆多浪羊 IL-1β基因原核表达载体的构建及其表达 | 第35-50页 |
·实验材料及方法 | 第35-43页 |
·实验材料 | 第35-37页 |
·实验方法 | 第37-43页 |
·结果 | 第43-47页 |
·目的片段与载体的获得 | 第43-44页 |
·重组质粒的鉴定 | 第44页 |
·测序结果 | 第44-45页 |
·IL-1β基因在大肠杆菌 BL21(DE3)中的诱导表达 | 第45-46页 |
·融合蛋白表达形式的确定 | 第46页 |
·Western blotting 检测目的蛋白 | 第46-47页 |
·讨论 | 第47-49页 |
·抗体的选择 | 第47-48页 |
·融合蛋白表达方式的确定 | 第48页 |
·原核表达系统构建 | 第48页 |
·Western blotting | 第48-49页 |
·小结 | 第49-50页 |
实验三 新疆多浪羊 IL-1β真核表达载体构建 | 第50-58页 |
·实验材料及方法 | 第50-54页 |
·实验材料 | 第50-51页 |
·试验方法 | 第51-54页 |
·结果 | 第54-56页 |
·IL-1β基因 PCR 结果 | 第54页 |
·pcDNA3.1(+)真核表达质粒的双酶切 | 第54-55页 |
·重组质粒 pcDNA3.1-IL-1β真核表达质粒的鉴定 | 第55页 |
·无内毒素的 pcDNA3.1-IL-1β真核表达质粒的提取 | 第55-56页 |
·讨论 | 第56-57页 |
·小结 | 第57-58页 |
第三章 结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
作者简介 | 第67页 |