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新疆多浪羊IL-1β的克隆、原核表达及其真核表达载体的构建

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
前言第8-10页
第一章 文献综述第10-18页
   ·白细胞介素-1 的发现与代谢分泌第10-11页
   ·IL-1β的分子结构第11-12页
   ·IL-1 生物学活性及其应用第12-18页
     ·IL-1 与艾滋病第12-14页
     ·IL-1 与肿瘤第14-15页
     ·IL-1 的多态性与疾病第15-16页
     ·IL-1 与脑损伤第16页
     ·IL-1 与糖尿病第16-18页
第二章 实验内容第18-58页
 实验一 新疆多浪羊 IL-1β基因克隆及序列分析第18-35页
   ·实验材料及方法第18-25页
     ·实验材料第18-20页
     ·实验方法第20-25页
   ·结果第25-32页
     ·新疆多浪羊 RNA 提取结果第25-26页
     ·多浪羊 IL-1β基因的 PCR 扩增第26页
     ·多浪羊 IL-1β-pMD-18T 菌液 PCR 和双酶切鉴定第26-27页
     ·多浪羊 IL-1β基因的序列分析第27-32页
   ·讨论第32-34页
     ·RNA 提取第32页
     ·IL-1β基因克隆第32-33页
     ·IL-1β的序列分析及生物信息学预测第33-34页
   ·小结第34-35页
 实验二 新疆多浪羊 IL-1β基因原核表达载体的构建及其表达第35-50页
   ·实验材料及方法第35-43页
     ·实验材料第35-37页
     ·实验方法第37-43页
   ·结果第43-47页
     ·目的片段与载体的获得第43-44页
     ·重组质粒的鉴定第44页
     ·测序结果第44-45页
     ·IL-1β基因在大肠杆菌 BL21(DE3)中的诱导表达第45-46页
     ·融合蛋白表达形式的确定第46页
     ·Western blotting 检测目的蛋白第46-47页
   ·讨论第47-49页
     ·抗体的选择第47-48页
     ·融合蛋白表达方式的确定第48页
     ·原核表达系统构建第48页
     ·Western blotting第48-49页
   ·小结第49-50页
 实验三 新疆多浪羊 IL-1β真核表达载体构建第50-58页
   ·实验材料及方法第50-54页
     ·实验材料第50-51页
     ·试验方法第51-54页
   ·结果第54-56页
     ·IL-1β基因 PCR 结果第54页
     ·pcDNA3.1(+)真核表达质粒的双酶切第54-55页
     ·重组质粒 pcDNA3.1-IL-1β真核表达质粒的鉴定第55页
     ·无内毒素的 pcDNA3.1-IL-1β真核表达质粒的提取第55-56页
   ·讨论第56-57页
   ·小结第57-58页
第三章 结论第58-59页
参考文献第59-66页
致谢第66-67页
作者简介第67页

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