| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-38页 |
| 第一节 研究概况与进展 | 第14-34页 |
| 1 免疫组织与器官 | 第14-16页 |
| ·头肾(Head kidney) | 第14-15页 |
| ·脾脏(Spleen) | 第15页 |
| ·胸腺(Thymus) | 第15页 |
| ·粘膜相关淋巴组织(Mucosa-associated lymphoid tissue,MALT) | 第15-16页 |
| 2 淋巴细胞 | 第16-17页 |
| 3 免疫分子 | 第17页 |
| 4 免疫球蛋白 | 第17-31页 |
| ·免疫球蛋白的基本结构 | 第18-19页 |
| ·免疫球蛋白基因结构 | 第19-21页 |
| ·免疫球蛋白的基因重排 | 第21-22页 |
| ·鱼类免疫球蛋白多样性产生的遗传机制 | 第22-24页 |
| ·免疫球蛋白的类别转换 | 第24页 |
| ·免疫球蛋白的生物学功能 | 第24-25页 |
| ·疫球蛋白分子类型的多样性 | 第25-30页 |
| ·免疫球蛋白基因的进化 | 第30-31页 |
| 5 免疫球蛋白M的应答和发生研究进展 | 第31-34页 |
| ·免疫球蛋白M的应答规律 | 第31-33页 |
| ·免疫球蛋白M的个体发生 | 第33-34页 |
| 第二节 选题依据与意义 | 第34-38页 |
| 第二章 黄颡鱼IgM基因cDNA克隆和序列分析 | 第38-70页 |
| 第一节 黄颡鱼IgM重链基因cDNA克隆和序列分析 | 第38-53页 |
| 1 材料与方法 | 第38-47页 |
| ·实验动物 | 第39页 |
| ·试剂和药品 | 第39页 |
| ·主要试剂配制 | 第39页 |
| ·细菌制备 | 第39-40页 |
| ·分子克隆 | 第40-46页 |
| ·测序 | 第46-47页 |
| ·黄颡鱼IgM-H基因cDNA序列和系统进化分析 | 第47页 |
| 2 结果 | 第47-53页 |
| ·黄颡鱼IgM重链基因cDNA序列 | 第47-48页 |
| ·黄颡鱼IgM氨基酸序列分析 | 第48-49页 |
| ·黄颡鱼IgM-H氨基酸序列的系统进化分析 | 第49-53页 |
| 第二节 黄颡鱼IgM轻链(IgL)基因cDNA克隆和序列分析 | 第53-63页 |
| 1 材料与方法 | 第53-54页 |
| ·实验鱼、药品与试剂 | 第53页 |
| ·黄颡鱼全长IgL cDNA的获得 | 第53-54页 |
| ·黄颡鱼IgL基因cDNA序列和系统进化分析 | 第54页 |
| 2 结果 | 第54-63页 |
| ·黄颡鱼IgL cDNA序列分析 | 第54-57页 |
| ·黄颡鱼IgL氨基酸组成和序列分析 | 第57-59页 |
| ·黄颡鱼与其他脊椎动物IgL的系统发育分析 | 第59-63页 |
| 第三节 讨论 | 第63-70页 |
| 1 IgM-H序列特征分析 | 第63-66页 |
| ·IgM表现形式的多样性 | 第64页 |
| ·IgM的保守基序 | 第64页 |
| ·IgM铰链区 | 第64-65页 |
| ·补体结合位点分析 | 第65页 |
| ·糖基化位点 | 第65-66页 |
| 2 IgM-H的系统进化分析 | 第66页 |
| 3 黄颡鱼IgL cDNA和氨基酸序列 | 第66-68页 |
| 4 黄颡鱼与其它脊椎动物IgL序列的联系 | 第68页 |
| 5 Ig H与L之间的关系 | 第68-70页 |
| 第三章 黄颡鱼IgM转录表达模式 | 第70-92页 |
| 第一节 黄颡鱼IgM基因转录表达的组织特异性 | 第70-74页 |
| 1 材料与方法 | 第70-71页 |
| ·组织表达模式研究的引物设计 | 第70页 |
| ·各组织总RNA的提取和第一链cDNA的合成 | 第70页 |
| ·黄颡鱼IgM重链和轻链L1、L2及L3组织分布研究 | 第70-71页 |
| 2 结果 | 第71-74页 |
| ·IgM重链基因组织表达模式 | 第71-72页 |
| ·黄颡鱼IgL基因组织表达模式 | 第72-74页 |
| 第二节 黄颡鱼IgM基因转录表达的组织细胞定位 | 第74-84页 |
| 1 材料与方法 | 第74-79页 |
| ·RNA探针的制备 | 第74-76页 |
| ·试剂的配制 | 第76-77页 |
| ·材料的固定 | 第77页 |
| ·原位杂交 | 第77-78页 |
| ·注射嗜水气单胞菌后IgM的细胞模式变化 | 第78-79页 |
| 2 结果 | 第79-84页 |
| ·黄颡鱼IgM基因的细胞表达模式 | 第79-82页 |
| ·注射嗜水气单胞菌后IgM阳性细胞的分布及密度变化 | 第82-84页 |
| 第三节 黄颡鱼IgM基因转录表达水平随时间的变化规律 | 第84-87页 |
| 1 材料和方法 | 第84-85页 |
| ·样品采集 | 第84页 |
| ·各组织总RNA的提取和第一链cDNA的合成 | 第84-85页 |
| ·Real-time PCR分析 | 第85页 |
| 2 结果 | 第85-87页 |
| ·Real-time PCR分析注射嗜水气单胞菌后IgM的转录表达变化 | 第85-87页 |
| 第四节 讨论 | 第87-92页 |
| 1 IgM-H的组织分布分析 | 第87页 |
| 2 黄颡鱼IgM-L基因的组织表达分析 | 第87-88页 |
| 3 IgM阳性细胞的研究 | 第88-89页 |
| 4 IgM对抗原的应答研究 | 第89-92页 |
| 第四章 黄颡鱼IgM蛋白表达的时空模式 | 第92-111页 |
| 第一节 黄颡鱼IgM蛋白的组织细胞定位 | 第92-104页 |
| 1 材料与方法 | 第92-96页 |
| ·实验材料与试剂 | 第92-93页 |
| ·黄颡鱼IgM重链基因的原核表达 | 第93-94页 |
| ·多杭的制备与效价测定 | 第94页 |
| ·黄颡鱼IgM Western blotting | 第94-95页 |
| ·IgM蛋白的组织细胞定位 | 第95-96页 |
| 2 结果 | 第96-104页 |
| ·黄颡鱼IgM在原核系统中的表达 | 第96-97页 |
| ·多抗效价的测定 | 第97页 |
| ·Western blotting检测IgM组织蛋白水平的表达 | 第97-98页 |
| ·免疫组化分析IgM的组织细胞定位 | 第98-104页 |
| 第二节 黄颡鱼不同组织IgM蛋白水平随时间的表达变化规律 | 第104-107页 |
| 1 材料与方法 | 第104页 |
| ·样品准备 | 第104页 |
| ·间接ELISA检测黄颡鱼注射免疫后组织IgM蛋白水平变化 | 第104页 |
| 2 结果 | 第104-107页 |
| 第三节 讨论 | 第107-111页 |
| 1 抗体制备 | 第107页 |
| 2 表达分析 | 第107-108页 |
| 3 IgM的应答规律 | 第108-109页 |
| 4 免疫荧光和免疫组化分析IgM的在组织细胞定位 | 第109-111页 |
| 第五章 黄颡鱼IgM传递和个体发生 | 第111-121页 |
| 第一节 黄颡鱼IgM的个体发生 | 第111-116页 |
| 1 材料和方法 | 第111-112页 |
| ·实验鱼 | 第111-112页 |
| ·RT-PCR分析黄颡鱼卵巢、胚胎和仔鱼IgM转录变化 | 第112页 |
| ·Real-time分析卵巢、胚胎和仔鱼IgM转录变化 | 第112页 |
| ·原位杂交分析幼鱼中IgM阳性信号 | 第112页 |
| 2 结果 | 第112-116页 |
| ·RT-PCR分析 | 第112-113页 |
| ·Real-time PCR分析 | 第113-115页 |
| ·幼鱼中IgM阳性信号 | 第115-116页 |
| 第二节 黄颡鱼IgM的代间传递 | 第116-117页 |
| 1 材料和方法 | 第116页 |
| ·样品准备 | 第116页 |
| ·ELISA分析注射嗜水气单胞菌前后IgM蛋白在卵巢、胚胎和仔鱼中的含量变化 | 第116页 |
| 2 结果 | 第116-117页 |
| 第三节 讨论 | 第117-121页 |
| 全文总结 | 第121-123页 |
| 缩略语表 | 第123-127页 |
| 参考文献 | 第127-145页 |
| 致谢 | 第145-147页 |
| 在读期间完成的论文 | 第147-148页 |
