| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 第1章 文献综述 | 第8-22页 |
| ·研究背景及理论依据 | 第8-14页 |
| ·基因打靶的应用研究现状 | 第8-11页 |
| ·基因打靶技术的安全隐忧 | 第11-13页 |
| ·安全转基因策略的探索 | 第13-14页 |
| ·TALEN效应蛋白研究概述 | 第14-16页 |
| ·TALEN效应蛋白的结构与功能域 | 第14页 |
| ·TALEN效应蛋白理化特性及作用机理 | 第14-15页 |
| ·TALEN效应蛋白的组装方法及优点 | 第15-16页 |
| ·TALEN效应蛋白的研究现状 | 第16页 |
| ·Cre-LoxP重组酶系统概述 | 第16-19页 |
| ·Cre-LoxP重组酶系统的结构与功能域 | 第16页 |
| ·Cre-LoxP重组酶系统的理化特性及作用机理 | 第16-17页 |
| ·Cre-LoxP重组酶系统的优点 | 第17-18页 |
| ·Cre-LoxP重组酶系统的研究现状 | 第18-19页 |
| ·肌肉生长抑制素概述 | 第19-22页 |
| ·肌肉生长抑制素的来源与功能 | 第19页 |
| ·肌肉生长抑制素的研究现状 | 第19-22页 |
| 第2章 TALEN打靶载体的构建及敲除检测 | 第22-42页 |
| ·模式细胞的制备 | 第22-26页 |
| ·试验材料 | 第22页 |
| ·试验涉及的溶液配制 | 第22-24页 |
| ·模式细胞的培养 | 第24-26页 |
| ·TALEN打靶载体的构建及转染 | 第26-31页 |
| ·试验材料 | 第26-27页 |
| ·试验方法 | 第27-31页 |
| ·筛删除反应的DNA水平鉴定 | 第31-37页 |
| ·PCR检测 | 第31-33页 |
| ·PCR产物回收 | 第33-34页 |
| ·突变检测 | 第34-37页 |
| ·结果与分析 | 第37-40页 |
| ·TALEN模块的构建及酶切结果 | 第37页 |
| ·PCR检测结果 | 第37-38页 |
| ·T7核酸内切酶酶切结果 | 第38页 |
| ·SURVEYOR 杂交酶切检测结果 | 第38-40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| 第3章 Cre-loxP重组酶系统的构建及敲除检测 | 第42-54页 |
| ·Cre-LoxP-ΔMSTN表达载体构建 | 第42-44页 |
| ·试验材料 | 第42-43页 |
| ·试验方法 | 第43-44页 |
| ·Cre-LoxP重组酶表达载体pTurbo-Cre的转染 | 第44-46页 |
| ·试验材料 | 第44-45页 |
| ·试验方法 | 第45-46页 |
| ·流式筛选分析(FACS) | 第46页 |
| ·Cre-LoxP删除反应的DNA水平鉴定 | 第46-47页 |
| ·删除效率的定量检测 | 第47-48页 |
| ·DNA测序分析 | 第48页 |
| ·结果与分析 | 第48-53页 |
| ·ΔMSTN打靶载体构建及酶切鉴定结果 | 第48-49页 |
| ·ΔMSTN打靶载体的转染及单克隆荧光细胞挑选结果 | 第49-50页 |
| ·流式筛选分析结果(FACS) | 第50-51页 |
| ·删除反应的PCR检测与定量分析结果 | 第51-52页 |
| ·DNA测序结果 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53-54页 |
| 第4章 结论 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 缩略语词汇表 | 第62-64页 |
| 致谢 | 第64-66页 |
| 攻读硕士学位期间的研究成果 | 第66页 |
