| 摘要 | 第1-9页 |
| 缩略语表 | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第10-19页 |
| ·黄烷醇类多酚与花色苷的结构和种类 | 第10-13页 |
| ·黄烷醇类多酚的结构和种类 | 第10-12页 |
| ·花色苷的结构和种类 | 第12-13页 |
| ·黄烷醇类多酚与花色苷的生物合成 | 第13-15页 |
| ·植物黄烷醇类多酚和花色苷生物合成途径中的转录因子的研究进展 | 第15-17页 |
| ·本课题研究目的与意义 | 第17-19页 |
| 2 材料与试剂 | 第19-33页 |
| ·试验材料 | 第19页 |
| ·实验仪器 | 第19页 |
| ·生物化学试剂 | 第19-20页 |
| ·试剂的配置 | 第20-21页 |
| ·RNA提取所需药品及其配制方法 | 第20页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳试剂 | 第20-21页 |
| ·蛋白质电泳溶液 | 第21页 |
| ·蛋白质纯化溶液 | 第21页 |
| ·实验方法 | 第21-33页 |
| ·葡萄果实总RNA提取与纯化 | 第21-23页 |
| ·RT-PCR扩增MybA2基因 | 第23-24页 |
| ·DNA片段的回收纯化 | 第24页 |
| ·构建克隆载体pEASY-mybA2及转化 | 第24-25页 |
| ·重组质粒的鉴定和测序 | 第25页 |
| ·表达载体pET-mybA2的构建及转化 | 第25-27页 |
| ·重组质粒pET-mybA2的鉴定及序列分析 | 第27页 |
| ·MYBA2蛋白在大肠杆菌BL21中的表达 | 第27页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第27-28页 |
| ·MYBA2融合蛋白的纯化 | 第28页 |
| ·免疫新西兰白兔 | 第28页 |
| ·抗血清效价检测 | 第28-29页 |
| ·抗血清的纯化及抗体纯度检测 | 第29页 |
| ·多酚类物质含量测定 | 第29-30页 |
| ·葡萄各组织蛋白的提取和Western blotting分析 | 第30-31页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第31-33页 |
| 3 试验结果 | 第33-51页 |
| ·葡萄果实总RNA的提取和纯化 | 第33页 |
| ·MybA2基因的RT-PCR扩增 | 第33-34页 |
| ·重组质粒pEASY-mybA2的鉴定 | 第34-36页 |
| ·PCR法快速鉴定重组质粒 | 第34-35页 |
| ·MybA2基因测序序列结果和分析 | 第35-36页 |
| ·重组pET-mybA2质粒的鉴定 | 第36-38页 |
| ·pET-mybA2重组质粒的酶切鉴定 | 第36-37页 |
| ·MybA2基因测序序列结果和分析 | 第37-38页 |
| ·MYBA2蛋白理化性质分析 | 第38页 |
| ·MYBA2编码蛋白的跨膜区和信号肽分析 | 第38-40页 |
| ·MYBA2蛋白在大肠杆菌BL21中的表达 | 第40-43页 |
| ·pET-mybA2生长曲线 | 第40页 |
| ·MYBA2蛋白表达条件优化 | 第40-43页 |
| ·MYBA2重组蛋白的纯化 | 第43页 |
| ·间接ELISA检测抗血清效价 | 第43-44页 |
| ·SDS-PAGE检测纯化后抗体纯度 | 第44页 |
| ·抗体特异性分析 | 第44-45页 |
| ·葡萄果实多酚类物质含量变化规律 | 第45-47页 |
| ·葡萄果实发育过程中黄烷醇类多酚含量变化规律 | 第45-46页 |
| ·葡萄果实发育过程中黄烷-3-醇含量变化规律 | 第46页 |
| ·葡萄果实发育过程中花色苷含量变化规律 | 第46-47页 |
| ·葡萄各组织及果实发育过程MYBA2蛋白含量变化规律 | 第47-48页 |
| ·葡萄各组织及果实发育过程MybA2基因表达变化 | 第48-49页 |
| ·果实发育过程中类黄酮类物质合成关键酶LAR1、LAR2、DFR、ANS、ANR和UFGT的表达 | 第49-51页 |
| 4 相关性分析 | 第51-53页 |
| ·MybA2表达与黄烷醇类多酚、黄烷-3-醇及花色苷含量的相关性 | 第51页 |
| ·葡萄果实发育过程中黄烷醇类多酚、黄烷-3-醇及花色苷含量与LAR1、LAR2、DFR、ANS、ANR和UFGT的相关性 | 第51-52页 |
| ·葡萄果实发育过程中MybA2表达与LAR1、LAR2、DFR、ANS、ANR和UFGT的相关性 | 第52-53页 |
| 5 讨论 | 第53-55页 |
| 6 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-60页 |
| Abstract | 第60-62页 |
| 附录 | 第62-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
