| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第一章 引言 | 第11-35页 |
| 第一节 内质网的形态和功能 | 第11-20页 |
| ·内质网的形态结构 | 第11-13页 |
| ·内质网成管蛋白和成片蛋白维持膜形态的机制 | 第13-18页 |
| ·内质网的功能及调节 | 第18-19页 |
| ·内质网网络结构形成机制 | 第19-20页 |
| 第二节 ATL家族及其同源基因的结构与功能 | 第20-23页 |
| ·ATL1结构和功能 | 第20-22页 |
| ·ATL1同源基因简介 | 第22-23页 |
| ·ATLs家族蛋白简介 | 第23页 |
| 第三节 线粒体的形态与功能 | 第23-29页 |
| ·线粒体的形态 | 第23-24页 |
| ·线粒体的功能 | 第24-25页 |
| ·线粒体膜融合机制 | 第25-29页 |
| 第四节 MFN家族结构与功能 | 第29-31页 |
| 第五节 膜曲度产生和膜融合机制探讨 | 第31-34页 |
| 第六节 本论文立题依据、研究结论和研究意义 | 第34-35页 |
| 第二章 实验材料、原理及方法 | 第35-49页 |
| 第一节 实验材料 | 第35-40页 |
| ·细胞系 | 第35页 |
| ·菌株 | 第35页 |
| ·主要试剂 | 第35-37页 |
| ·主要实验仪器 | 第37-39页 |
| ·主要溶液配制 | 第39-40页 |
| 第二节 实验方法 | 第40-49页 |
| ·MFN-ATL嵌合体载体的构建 | 第40-41页 |
| ·Atlastins家族蛋白所用质粒 | 第41页 |
| ·细胞培养与转染 | 第41-42页 |
| ·免疫荧光共定位分析 | 第42-43页 |
| ·免疫印记(Western Blotting)法 | 第43-44页 |
| ·酵母总蛋白提取 | 第44页 |
| ·酵母内质网形态观察 | 第44-45页 |
| ·酵母内质网体内融合实验 | 第45页 |
| ·免疫共沉淀实验 | 第45-46页 |
| ·ATLs家族蛋白纯化 | 第46-47页 |
| ·分析性超离心 | 第47-48页 |
| ·GTP酶活的测定 | 第48-49页 |
| 第三章 GTP酶家族蛋白MFN介导膜融合机制的研究 | 第49-73页 |
| 第一节 MFN1的序列分析及结构域划分 | 第49-52页 |
| ·MFN1 GTP酶的二级结构分析 | 第49-50页 |
| ·MFN1和ATL1的结构域划分 | 第50-52页 |
| 第二节 MFN-ATL嵌合体蛋白的构建 | 第52-56页 |
| ·定位于线粒体嵌合体的构建 | 第52-55页 |
| ·定位于内质网嵌合体的构建 | 第55-56页 |
| 第三节 MFN-ATL嵌合体蛋白在酵母细胞中的功能分析 | 第56-60页 |
| ·酵母内质网形态分类 | 第56-57页 |
| ·MFN-ATL嵌合体蛋白形态回补实验 | 第57-60页 |
| 第四节 MFN-ATL嵌合体介导的酵母内质网融合实验 | 第60-64页 |
| ·酵母内质网体内融合回补实验 | 第60-62页 |
| ·嵌合体介导的酵母内质网体内融合时间统计 | 第62-64页 |
| 第五节 MFN1不同结构域的相互作用 | 第64-70页 |
| ·截短的MFN1共转及分开转细胞的相互作用 | 第64-67页 |
| ·MFN1 C端结构域的相互作用 | 第67-69页 |
| ·全长MFN1共转及分开转细胞的相互作用 | 第69-70页 |
| 第六节 ATL1和MFN1不同结构域功能的比较 | 第70-73页 |
| 第四章 Atlastins家族蛋白介导内质网膜融合能力的研究 | 第73-83页 |
| 第一节 哺乳动物细胞中ATLs家族蛋白的功能分析 | 第73-77页 |
| 第二节 酵母细胞中ATLs家族蛋白的功能分析 | 第77-79页 |
| 第三节 胞浆区ATLs家族蛋白的生化分析 | 第79-83页 |
| ·依赖核苷酸的ATLs家族蛋白二聚化能力比较 | 第79-81页 |
| ·ATLs家族蛋白的酶活比较 | 第81-83页 |
| 第五章 讨论与分析 | 第83-87页 |
| 第一节 MFN1介导膜融合研究 | 第83-85页 |
| 第二节 GTP酶ATLASTINS家族蛋白促进膜融合能力的讨论 | 第85-87页 |
| 参考文献 | 第87-95页 |
| 致谢 | 第95-96页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第96页 |
